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.2012:826:33-47.
doi:10.1007/978-1-61779-468-1_4。

小鼠胚胎成肝细胞的分离纯化方法

附属公司

小鼠胚胎成肝细胞的分离纯化方法

吕克·盖尔胡斯特. 摩尔生物法. 2012.

摘要

在发育过程中,肝前体细胞是多能干细胞的宝贵来源,具有分化为肝脏和胆道谱系的能力。在本章中,我们报告了我们小组开发的分离高纯度小鼠胎肝母细胞(MFH)的实验程序。该方法基于从胎儿(E 14.5)中选择性采集肝实质细胞,然后通过使用磁珠和特定抗体对E-cadherin(+)祖细胞进行分类。该方案允许分离表达肝胆标志物的双功能肝干细胞。纯化MFH的原代培养物可以保持增殖直至融合,从而在存在肝营养因子的情况下促进分化过程。通过使用定量实时聚合酶链反应方法,我们显示了MFH的肝脏特异性表型和进行性成熟,描绘了早期(α-胎蛋白)、中期(白蛋白)和晚期(葡萄糖-6-磷酸酶)肝脏标记物。因此,该模型似乎是研究肝脏分化过程中发生的分子和细胞方面的一个有价值的细胞系统。

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