跳到主页面内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息,确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https(https)://确保您连接到官方网站,并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2011:791:11-21.
doi:10.1007/978-1-61779-316-52。

DNA甲基化检测:亚硫酸氢盐基因组测序分析

附属公司

DNA甲基化检测:亚硫酸氢盐基因组测序分析

李媛媛等。 摩尔生物法. 2011.

摘要

DNA甲基化通常发生在CpG二核苷酸内胞嘧啶的C5位置,在基因表达、胚胎发育、细胞增殖、分化和染色体稳定性等许多生物学过程中起着关键作用。异常的DNA甲基化通常与DNA稳态的丧失和基因组不稳定有关,从而导致人类疾病的发展,如癌症。DNA甲基化的重要性迫切需要高灵敏度和可靠性的有效方法来探索创新的诊断和治疗策略。Frommer及其同事开发的亚硫酸氢钠基因组测序被认为是基于亚硫酸氢钠转化基因组DNA的DNA甲基化分析的一场革命。除了亚硫酸氢盐基因组测序方法的各种优点(如高度定性和定量)外,它还是许多衍生方法的基本原理,以更好地解释DNA甲基化的奥秘。在这里,我们介绍了一个目前在我们实验室中经常使用的协议,该协议已被证明能够产生最佳结果。我们还讨论了该领域中各种应用程序的潜在技术问题和故障排除说明。

PubMed免责声明

数字

图1
图1
亚硫酸氢盐基因组测序甲基化分析原理。用亚硫酸氢钠处理后,未甲基化的胞嘧啶残基转化为尿嘧啶,而5-甲基胞嘧啶(5mC)未受影响。PCR扩增后,尿嘧啶残基转化为胸腺嘧啶。DNA甲基化状态可以通过直接PCR测序或克隆测序来确定。
图2
图2
甲基化测序结果的解释。亚硫酸氢盐处理后,所有非甲基化胞嘧啶(C)都转化为胸腺嘧啶(T),C峰的存在表明基因组中存在5mC。单个残基的总甲基化或完全转化显示出一个单峰。C峰和T峰的存在表明部分甲基化或潜在的亚硫酸氢转化不完全。

类似文章

引用人

工具书类

    1. 伯德A.对表观遗传学的认识。自然。2007;447:396–398.-公共医学
    1. Li E.哺乳动物发育中的染色质修饰和表观遗传学重编程。《遗传学自然评论》。2002;3:662–673.-公共医学
    1. Robertson KD,Wolffe AP。健康和疾病中的DNA甲基化。《遗传学自然评论》。2000;1:11–19.-公共医学
    1. 鸟AP。富含CpG的岛屿和DNA甲基化的功能。自然。1986;321:209–213.-公共医学
    1. Jones PA,Baylin SB。表观遗传事件在癌症中的基本作用。《遗传学自然评论》。2002;3:415–428.-公共医学

出版物类型