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.1990年5月5日;265(13):7301-7.

蛋白激酶C-ε的表达、纯化和表征

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  • PMID: 2185243
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蛋白激酶C-ε的表达、纯化和表征

D沙普等。 生物化学杂志. .
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摘要

在最近描述的蛋白激酶C(PKC)家族成员中(-delta,-epsilon,-zeta),还没有介绍纯化酶的详细特性。在这里,我们使用杆状病毒载体描述了PKC-ε在昆虫细胞中的表达。重组酶已通过DEAE-纤维素、丝氨酸-脑葡萄糖、Mono Q和Superose 12的顺序色谱纯化至均一性;该蛋白在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示出90kDa的分子量。PKC-ε依赖磷脂和二酰甘油(或佛波酯)的活性,并对这些效应器显示出类似于其他PKC同型的特异性模式。同样,staurosporine和H-7对PKC-epsilon的抑制与其他PKC同型的抑制相似。然而,与PKC-α、-β和-γ不同,PKC-ε对Ca2+没有依赖性。此外,PKC-ε的底物特异性与其他特征PKC大不相同。讨论了PKC家族中功能多样性的重要性。

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