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.2011年4月;138(8):1459-69.
doi:10.1242/dev.058156。 Epub 2011年3月2日。

通过不同病毒载体的克隆分析鉴定成年斑马鱼端脑中真正的神经干细胞,并表征其分裂特性和命运

附属公司

通过不同病毒载体的克隆分析鉴定成年斑马鱼端脑中真正的神经干细胞,并表征其分裂特性和命运

伊娜·罗森奈格等。 开发. 2011年4月.

摘要

通过维持活跃的生发龛,斑马鱼成年大脑中普遍存在神经发生。为了确定哪些祖细胞特性与这种广泛的神经发生潜能相关,我们建立了一种方法,允许在成年斑马鱼大脑中使用GFP编码的逆转录病毒和慢病毒进行祖细胞转导和追踪。斑马鱼的端脑生发区由静止的放射状胶质前体细胞和活跃分裂的成神经细胞组成。利用克隆病毒载体分析的强大功能,我们证明这些祖细胞遵循不同的分裂模式和命运:成神经细胞首先经历有限的扩增阶段,然后是对称的神经原性分裂;相比之下,放射状胶质细胞能够在单个细胞水平上自我更新并产生不同的细胞类型,因此在体内表现出真正的神经干细胞(NSC)特性。我们还发现,放射状胶质细胞主要经历对称的胶质生成分裂,这扩大了NSC池,可能是其长期维持的原因。我们进一步证明,阻断Notch信号导致增殖细胞和克隆数量显著增加,但不影响克隆组成,表明Notch主要控制增殖而非细胞命运。最后,通过长期追踪,我们说明了前脑成人回路中新生神经元的功能整合。这些结果表征了成年祖细胞和神经发生的基本方面,并为利用基于病毒的技术在斑马鱼成年大脑中进行稳定的遗传操作和克隆分析开辟了道路。

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