SLC36A4 (hPAT4) is a high affinity amino acid transporter when expressed in Xenopus laevis oocytes

doi:10.1074/jbc.M110.172403

.2011年1月28日；286(4):2455-60.

doi:10.1074/jbc。M110.172403。 Epub 2010年11月19日。

SLC36A4（hPAT4）在非洲爪蟾卵母细胞中表达时是一种高亲和力氨基酸转运蛋白

Samyuktha Muralidharan Pillai女士¹, 大卫·梅雷迪思

附属公司

PMID： 21097500
预防性维修识别码：下午3点024739分
内政部： 10.1074/jbc。M10.172403号

SLC36A4（hPAT4）在非洲爪蟾卵母细胞中表达时是一种高亲和力氨基酸转运蛋白

Samyuktha Muralidharan Pillai等。生物化学杂志. 2011.

.2011年1月28日；286(4):2455-60.

doi:10.1074/jbc。M110.172403。 Epub 2010年11月19日。

作者

Samyuktha Muralidharan Pillai¹, 大卫·梅雷迪斯

附属

¹牛津布鲁克斯大学生命科学学院，牛津OX3 0BP，英国。

PMID： 21097500
预防性维修识别码：项目经理3024739
内政部： 10.1074/jbc。M10.172403号

摘要

SLC36转运蛋白家族由四个基因组成，其中两个基因SLC36A1和SLC36A2已被证明编码人类质子偶联氨基酸转运蛋白或hPAT。在这里，我们报道了家族第四个成员SLC36A4或hPAT4的特征，当其在非洲爪蟾卵母细胞中表达时，也编码一个质膜氨基酸转运蛋白，但它不是质子偶联的，并且对氨基酸脯氨酸和色氨酸具有很高的底物亲和力。爪蟾卵母细胞中的hPAT4介导了对[（3）H]脯氨酸的钠依赖性、电中性摄取，当摄取介质pH为7.4和亲和力为3.13μM时，摄取率最高。色氨酸也是一种具有类似高亲和力（1.72μM）的优秀转运底物。其他抑制[（3）H]脯氨酸的氨基酸有异亮氨酸（K（i）0.23 mM）、谷氨酰胺（0.43 mM，蛋氨酸（0.44 mM）和丙氨酸（1.48 mM），亲和力较低的氨基酸有甘氨酸、苏氨酸和半胱氨酸（K。在直接测试的氨基酸运输中，只有脯氨酸、色氨酸和丙氨酸表现出显著的吸收，而甘氨酸和半胱氨酸则没有。在测试的非蛋白氨基酸和药物中，只有肌氨酸产生抑制作用（K（i）1.09 mM），而γ-氨基丁酸（GABA）、β-丙氨酸、L-多巴、D-丝氨酸和δ-氨基乙酰丙酸对[（3）H]脯氨酸摄取无影响。hPAT4作为一种高亲和力/低容量非质子耦合氨基酸转运体的特性提出了关于其生理作用的问题，特别是因为hPAT5的转运特性与果蝇正基因PATH非常相似，后者是一种氨基酸“受体”，在营养物感测中发挥作用。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
**hPAT4介导的脯氨酸摄取的时间和细胞外pH依赖性。** A类hPAT4介导的时间依赖性[^三H] 脯氨酸摄入爪蟾卵母细胞。将数据归一化为1小时摄取量，即2.96±0.98 fmol/卵母细胞/h，n个=4个卵母细胞制剂。B类hPAT4介导的依赖性[^三H] 脯氨酸对细胞外pH值的吸收爪蟾表达hPAT2或hPAT4的卵母细胞。数据标准化为细胞外pH 5.5时的摄取，hPAT2为27.4±7.39fmol/卵母细胞/h，hPAT4为4.26±2.14fmol/卵母细胞/h，n个≥3个卵母细胞制剂。

**图2。**
**hPAT4介导的脯氨酸摄取的浓度依赖性，通过抑制[^三H] 增加未标记脯氨酸的浓度。**这个插入显示0–100μ米脯氨酸在高倍镜下清晰可见。明显的*K（K）_米*为3.13±1.13μ米,n个=3个卵母细胞制剂。

**图3。**
**hPAT4介导的脯氨酸摄取的浓度依赖性和底物特异性。** A类hPAT4介导的异亮氨酸、蛋氨酸、谷氨酰胺和丙氨酸对[^三H] 脯氨酸摄取。这个*K（K）_我*值（单位：m米)分别为：Ile，0.23±0.03；金属，0.44±0.19；Gln为0.43±0.10；和丙氨酸，1.48±0.76，n个=2–4个卵母细胞制剂。B类，hPAT4介导的抑制[^三H] 脯氨酸摄入爪蟾卵母细胞由蛋白质原性氨基酸组成。摄取量已归一化为无抑制剂时的摄取量。*，第页< 0.05, **,第页<0.01、***、，第页<0.001，单样本t检验，n个≥3个卵母细胞制剂。

**图4。**
**hPAT4介导的摄取[^三H] 脯氨酸在无钠或有钠的情况下，标准化为无钠的情况（被胆碱取代，实际摄取量为27.8±15.2fmol/卵母细胞/H）。** 第页>0.05配对t吨测试，n个=4个卵母细胞制剂。

**图5。**
hPAT4介导的摄取[^三H] 正常情况下脯氨酸（2 m米)并升高（50 m米)细胞外钾，归一化为正常钾（平均摄取量分别为25.3±12.2和31.8±24.9 fmol/卵母细胞/h，n个=3个卵母细胞准备第页<0.05，2 m米与50米米对于hPAT1和第页>每个hPAT4为0.05）。

**图6。**
**hPAT4介导的色氨酸抑制的浓度依赖性[^三H] 脯氨酸摄取。** *K（K）_我*为1.72±1.08μ米,n个=2个卵母细胞制剂。

**图7。**
**hPAT4介导的氨基酸摄取爪蟾卵母细胞（fmol/卵母细胞/h）。***,第页与未注射卵母细胞相比<0.05，n个≥3个卵母细胞制剂。

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