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.1990年1月;4(1):59-68.
doi:10.1210/mend4-1-59。

α-蛋白激酶C的激活导致与GH4C1细胞中不溶于洗涤剂的成分相关

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α-蛋白激酶C的激活导致与GH4C1细胞中不溶于洗涤剂的成分相关

S C基利等。 分子内分泌学. 1990年1月.

摘要

TRH和二丁酸佛波酯(PDBu)通过激活蛋白激酶C(PKC)刺激GH4C1大鼠垂体细胞分泌和合成PRL。TRH反应由两种PKC激活剂Ca2+和二酰甘油(DAG)的细胞水平升高介导,而PDBu作为DAG类似物。我们进行了实验,以比较Ca2+和PDBu/DAG对α-PKC再分配的影响,并确定颗粒部分的哪些成分激活了α-PKC。亚细胞分馏实验表明,TRH和PDBu均导致α-PKC与颗粒组分的螯合稳定结合。相反,Ca2+介导的与微粒组分的关联不稳定。免疫细胞荧光实验还表明,TRH、PDBu和胞浆Ca2+增加(由于离子霉素或K+去极化)导致重新分布。TRH的作用是快速和短暂的,类似于TRH刺激磷脂酶C。TRH或PDBu处理的培养物颗粒部分中易位的α-PKC没有被Triton X-100溶解。在使用免疫荧光分析的对比研究中,α-PKC免疫荧光仍存在于TRH-和PDBu-刺激的洗涤剂不溶性制剂中,但不存在于静止细胞中。活化的α-PKC与螯合剂和洗涤剂不溶性物质的结合表明,活化的α-PKC可能与膜和细胞骨架成分有关。

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