跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2011年2月；300（2）：G303-15。
doi:10.1152/ajpgi.00368.2010。 Epub 2010年11月11日。

成人胆管细胞5-羟色胺合成的旁分泌调节与胆道重塑

阿莱西亚·奥梅内蒂 1, 刘洋, 劳尔·盖尼丁诺夫, 辛西娅·D·盖伊, 史蒂夫·S·崔, 魏晨, 马克·卡隆, 安娜·梅·迪尔
附属公司

成人胆管细胞5-羟色胺合成的旁分泌调节与胆道重塑

阿莱西亚·奥梅内蒂等。 美国生理学杂志胃肠测试肝脏生理学. 2011年2月.

摘要

胆管细胞和基质细胞之间的旁分泌信号调节胆道重塑。胆管细胞具有神经上皮特性，5-羟色胺受体激动剂抑制其生长，但它们是否能够合成5-羟色素尚不清楚。我们假设胆管细胞合成5-羟色胺，肝肌成纤维细胞（MF）和胆管细胞之间的相互作用调节这一过程，从而影响胆道重塑。对具有神经元色氨酸羟化酶（TPH）亚型失活突变的胆管细胞±MF和色氨酸羟基酶-2敲除蛋白（TPH2KI）小鼠的跨阱培养进行了评估。细胞培养模型的结果证实，胆管细胞具有5-羟色胺受体，并首次证明这些细胞表达TPH2并产生5-羟色宁，这会自动抑制其生长，但会刺激MF生成TGF-β（1）。TGF-β（1）的增加反过来通过抑制胆管细胞TPH2的表达来抵消胆管细胞生长的自分泌抑制。对TPH2KI小鼠的研究证实，TPH2介导的血清素生成在受损胆管重塑中起着重要作用，因为TPH2功能降低的小鼠胆汁血清素水平降低，并表现出胆管细胞过度增殖，异常小管和肝祖细胞积聚，胆管结扎后肝纤维化加重。这一新证据表明，胆管细胞表达所谓的TPH神经元同种型，从头合成血清素，并将血清素作为自分泌/旁分泌信号来调节胆管树的再生，这补充了早期的研究，即血小板被动释放血清素刺激肝细胞增殖。鉴于5-羟色胺调节药物的广泛使用，这些发现对从各种类型的肝损伤中恢复具有潜在的重要意义。

PubMed免责声明

数字

图1。
图1。
胆管细胞表达HTR1A，并通过降低增殖活性对5-HT治疗作出反应。A类：原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者或健康对照者（NL）代表性切片中1A型5-HT受体（HTR1A）免疫染色；插入). 箭头表示HRT1A阳性胆管/小管，并指向HTR1A阳性基质细胞。原始放大倍数×40。B类和C类小鼠603B系的免疫细胞化学(B类)和大鼠正常胆管细胞（NRC）系(C类)证明胆管细胞均匀表达HT1RA。插入在里面B类显示603B胆管细胞暴露于非免疫血清作为阴性（NEG）对照。原始放大倍数×63。D类：外源性5-HT处理小鼠胆管细胞导致细胞增殖抑制，5-溴-2′-脱氧尿苷（BrdU）标记指数呈剂量依赖性降低(顶部、和左下角)和ELISA BrdU掺入试验(右下角). 在×10原始放大倍数下，显示了暴露于外源性5-HT（0-6-60-180 ng/ml）48小时的胆管细胞腔玻片的代表性图片。定量数据表示为平均值±SE，组间差异由双尾学生的t吨-测试*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.001.
图2。
图2。
胆管细胞表达5-HT生物合成、分解代谢和转运的酶。A类：Western印迹(左边)和免疫细胞化学(中间的和正确的)分析表明，小鼠603B和大鼠NRC胆管细胞均均匀表达导管标志物角蛋白19（KRT19）。原始放大倍数×63。B类定量实时逆转录聚合酶链反应（QRT-PCR）扩增子的2%琼脂糖凝胶显示603B胆管细胞中色氨酸羟化酶（tph）-1和-2、htr1A和B、单胺氧化酶（mao）A和B以及5-羟色胺（5-HT）转运体（sert）的表达。C类和D类：绿色TPH1免疫荧光细胞染色(C类)和TPH2为红色(D类)表明两种小鼠（603B，C类和D类,左边)和大鼠（NRC，D类和电子,正确的)表达5-HT生物合成的速率限制酶。4′，6-二氨基-2-苯基吲哚（DAPI）显示细胞核。用非免疫血清和次级抗体孵育的603B和NRC显示为阴性对照。原始放大倍数×40(C类和D类). 603B显示红色TPH2与绿色导管标记物γ-谷氨酰转肽酶（GGT）的协同免疫荧光(电子)和NRC(F类)胆管细胞。原始放大倍数×63。
图3。
图3。
肌成纤维细胞（MF）衍生的TGF-β抑制邻近胆管细胞中Angpt1/Tie2/TPH2轴和5-HT的产生。A类：采用高效液相色谱法检测603B胆管细胞（实心条）或MF（开放条）单培养物和胆管细胞/MF共培养物（阴影条）培养液中的5-HT含量。数据表示为绝对浓度（ng/ml）的平均值±SE。B类和C类：单培养和共培养胆管细胞（分别为实心和阴影条）的QRT-PCR显示tph-1和tph-2的差异表达(B类)血管生成素1（angpt1）和tie-2(C类). 将数据归一化为单个培养的胆管细胞，并显示为平均值±SE。D类：ELISA检测显示TGF-β1单个培养的603B胆管细胞培养基（实心条）或MF（开放条）和共培养条件培养基（阴影条）中的含量。将结果归一化为胆管细胞单细胞培养的值，并表示为平均值±SE。电子：603B-单培养胆管细胞暴露于重组TGF-β1（2 ng/ml）或载体在无血清培养基中培养24 h，并进行QRT-PCR分析以评估angpt1、tie2和tph2的表达。数据按照车辆处理控制标准化，并显示为平均值±SE。F类：MF单细胞培养物用外源性5-HT和TGF-β处理48 h1QRT-PCR检测细胞诱导率。结果归一化为车辆处理的MF，并表示为平均值±SE。对于所有数据集，双尾Student’st吨-测试用于评估组间差异*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.001.
图4。
图4。
调节5-HT-TGF-β的旁分泌机制的工作模型1肝MF和胆管细胞的生成。胆管细胞衍生的5-HT（红色球体）以自分泌方式限制胆管细胞生长(1)并以旁分泌方式刺激TGF-β的产生1相邻MF（蓝色球体）(2). MF-衍生TGF-β1反过来，为MF的增长提供了一种自给自足的刺激(三)但以旁分泌方式下调胆管细胞5-HT的生成(4). 5-HT抑制胆管细胞生长，使导管细胞数量增加(5). 增殖的胆管细胞反过来产生可溶性因子（例如，Hedgehog配体、PDGF-BB、TGF-β1)尽管当地5-HT减少，但仍能维持MF的增长(6).
图5。
图5。
TPH2功能失活（TPH2KI）的小鼠表现出胆管结扎（BDL）导致的导管和肝细胞过度增殖。A类：采用高效液相色谱法评估TPH2KI胆汁中的5-HT含量(n个=10）和野生型（WT；n个=8）小鼠在BDL手术后2周。点表示每只动物的5-HT绝对胆汁浓度（ng/ml）。黑色条显示每组数值的平均值±SE。B类：在任一Sham后2周安乐死的代表性小鼠肝脏切片的苏木精和伊红（H&E）染色(左边)或BDL(正确的)手术。原始放大倍数×20。C类：WT中角蛋白（KRT）-19染色的代表性图片(顶部)或TPH2KI(底部)小鼠BDL手术后2周。原始放大倍数×40。右图显示了KRT19的计算机辅助形态测量评估结果+Sham或BDL手术后2周，WT和TPH2KI小鼠的面积。数据按照WT-Sham控制标准化，并显示为平均值±SE。D类：术后2周，给小鼠注射BrdU，2小时后处死；肝门管区（PT）胆管细胞BrdU标记指数定量(顶部)和TPH2KI(底部). 数据归一化为WT BDL，并表示为平均值±SE。原始放大倍数×40。插入显示BrdU阳性细胞核的小导管放大图像。电子：BDL TPH2KI小鼠截面的代表性图片显示KRT19/BrdU与BrdU合作定位到KRT19+管道(顶部)至KRT19−门脉周围区的肝细胞(顶部和底部).F类：肝细胞BrdU标记指数在WT门脉周围区域定量(顶部)和TPH2KI(底部). 数据归一化为WT BDL，并表示为平均值±SE。原始放大倍数×40。所有定量数据均表示为平均值±SE，组间差异由双尾学生的t吨-测试*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.001.
图6。
图6。
TPH2活性和胆汁5-HT含量的降低促进肝祖细胞的生长。AE1/AE3（标记祖细胞相关细胞角蛋白）的免疫组织化学分析(A类和B类)和α-甲胎蛋白（AFP）(C类和D类)WT代表路段(左边)和TPH2KI小鼠(正确的)假手术后2周(顶部)或BDL(底部)手术。代表性图片以40倍原始放大倍数显示。B类：AE1/AE3+面积通过计算机辅助形态测量评估进行量化。数据按照WT-Sham控制标准化，并显示为平均值±SE。D类：法新社+在免疫染色的肝脏切片中，对门脉附近的肝细胞进行计数(n个=5/组）。显示平均值±SE结果*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.001.
图7。
图7。
BDL后TPH2KI小鼠肝纤维化增加。A类：采用QRT-PCR分析BDL后2周TPH2KI（阴影条）和WT（实心条）小鼠的全肝组织，以评估纤维生成标记物[血小板衍生生长因子BB（PDGFBB）、TGF-β1，胶原蛋白1α（I），α-平滑肌肌动蛋白（αSMA）]。数据标准化为WT-BDL值，并显示为平均值±SE。组间差异由双尾学生的t吨-测试*P（P）< 0.05.B类：进行天狼星红染色以显示纤维基质的差异。显示了各组的典型显微照片。原始放大倍数×20。C类：计算机辅助定量苦味酸红+WT（实心条）和TPH2KI（阴影条）小鼠肝脏切片中的面积(N个=每组5人），2周BDL手术。结果归一化为WT-BDL值，并显示为平均值±SE。两组之间的差异由双尾学生的t吨-测试*P（P）< 0.05.
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

  • 神经内分泌激素5-羟色胺对胆道树生长的自分泌/旁分泌调节。
    Marzioni M、Glaser S、Francis H、Marucci L、Benedetti A、Alvaro D、Taffetani S、Ueno Y、Roskams T、Phinizy JL、Venter J、Fava G、Lesage GD、Alpini G。 Marzioni M等人。 胃肠病学。2005年1月；128(1):121-37. doi:10.1053/j.gastro.2004.10.002。 胃肠病学。2005 PMID：15633129
  • 整合素αvbeta6对胆管细胞的抑制阻断转化生长因子β的激活并延缓胆管纤维化的进展。
    Patsenker E、Popov Y、Stickel F、Jonczyk A、Goodman SL、Schuppan D。 Patsenker E等人。 胃肠病学。2008年8月；135(2):660-70. doi:10.1053/j.gastro.2008.04.009。Epub 2008年4月16日。 胃肠病学。2008 PMID：18538673 免费PMC文章。
  • 孕酮通过自分泌/旁分泌机制刺激雌性和雄性胆管细胞的增殖。
    Glaser S、DeMorrow S、Francis H、Ueno Y、Gaudio E、Vaculin S、Venter J、Franchitto A、Onori P、Vaculli B、Marzioni M、Wise C、Pilanthananond M、Savage J、Pierce L、Mancinelli R、Alpini G。 Glaser S等人。 美国生理学杂志胃肠病学肝病生理学。2008年7月；295（1）:G124-G136。doi:10.1152/ajpgi.00536.2007。Epub 2008年5月29日。 美国生理学杂志胃肠病学肝病生理学。2008 PMID：18511743 免费PMC文章。
  • 胆管细胞对损伤的反应机制。
    佐藤K、孟F、江T、格拉泽S、阿尔皮尼G。 Sato K等人。 Biochim Biophys Acta Mol基础疾病。2018年4月；1864年（第4部分B）：1262-1269。doi:10.1016/j.bbadis.2017.06.017。Epub 2017年6月23日。 Biochim Biophys Acta Mol基础疾病。2018 PMID：28648950 免费PMC文章。 审查。
  • 胆管细胞增殖与肝纤维化。
    Glaser SS、Gaudio E、Miller T、Alvaro D、Alpini G。 Glaser SS等人。 《分子医学专家评论》，2009年2月25日；11:e7。doi:10.1017/S1462399409000994。 《分子医学专家评论》，2009年。 PMID：19239726 免费PMC文章。 审查。
查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Beaulieu JM、Zhang X、Rodriguiz RM、Sotnikova TD、Cools MJ、Wetsel WC、Gainetdinov RR、Caron MG。GSK3β在血清素缺乏引起的行为异常中的作用。美国国家科学院院刊105:1333–13382008-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Bochkis IM、Rubins NE、White P、Furth EE、Friedman JR、Kaestner KH。Foxa2肝细胞特异性消融改变胆汁酸稳态并导致内质网应激。Nat Med 14:828–8362008年-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Clotman F、Jacquemin P、Plumb-Rudewiez N、Pierreux CE、Van der Smissen P、Dietz HC、Courtoy PJ、Rousseau GG、Lemaigre FP。通过由Onecut转录因子调节的TGF-β信号梯度控制肝细胞命运决定。基因开发19:1849–18542005-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Dewachter L、Adnot S、Fadel E、Humbert M、Maitre B、Barlier-Mur AM、Simonneau G、Hamon M、Naeije R、Eddahibi S.血管生成素/Tie2途径影响特发性肺动脉高压患者的平滑肌增生。Am J Respir Crit Care Med 174:1025–10332006年-公共医学
    1. Eddahibi S、Guignabert C、Barlier Mur AM、Dewachter L、Fadel E、Dartevelle P、Humbert M、Simoneau G、Hanoun N、Saurini F、Hamon M、Adnot S。肺动脉高压中内皮细胞和平滑肌细胞之间的串扰：血清素诱导的平滑肌增生的关键作用。发行量113:1857–18642006-公共医学

出版物类型

MeSH术语

LinkOut-更多资源