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2010年11月16日;107(46):19748-53。
doi:10.1073/pnas.1009999107。 Epub 2010年10月27日。

翻译真核80S核糖体5.5-a分辨率的冷冻电镜结构和rRNA模型

附属公司

5.5-a分辨率下翻译真核生物80S核糖体的冷冻电镜结构和rRNA模型

Jean-Paul Armache公司等。 美国国家科学院程序

摘要

蛋白质生物合成是将遗传密码翻译成多肽,发生在核糖核蛋白颗粒(称为核糖体)上。虽然细菌核糖体的X射线结构可用,但真核生物80S核糖体缺乏高分辨率结构。利用冷冻电子显微镜和单粒子重建技术,我们确定了翻译植物(小麦)80S核糖体的结构,分辨率为5.5。这张图,再加上酿酒酵母80S核糖体的6.1??图,使我们能够对约98%的rRNA进行建模。rRNA扩展片段(ES)和可变区域的准确分配揭示了独特的ES-ES和r-蛋白-ES相互作用,为真核核糖体结构和进化提供了深入的见解。

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利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

数字

图1。
图1。
真核生物80S核糖体的冷冻电镜重建。(A类)夏块菌和(B类)酿酒酵母80S核糖体,小(40S)和大(60S)亚基分别呈黄色和灰色,P-tRNA呈绿色。(C类——F类)的选定视图夏块菌80S密度图(蓝色网格)和相应的分子模型,r蛋白为黄色,rRNA为白色(主干)和红色(碱基)。
图2。
图2。
的原子模型夏块菌80S核糖体。(A类B类)二级结构(A类)小型(18S)和(B类)大亚单位(5S、5.8S和28S)核糖体RNA,新建模区域呈绿色。扩展段和可变区域显示为灰色,未建模区域显示为橙色。(C类D类)rRNA的新建模区域(绿色)突出显示在(C类)小型和(D类)大亚基密度图(左侧)和作为分子模型(赖特). (E类F类)新建模的蛋白质在(E类)小型和(D类)大亚基密度图(左侧)和作为分子模型(赖特). 新识别的蛋白质为红色,而从头建模的延伸部分为浅绿色,建模但未分配的蛋白质为黄色。
图3。
图3。
核糖体RNA扩增片段和可变区域。(A类B类)二级结构夏块菌(A类)小型(18S)和(B类)大亚单位(5S、5.8S和28S)核糖体RNA,ES和可变区(VR)着色明显。(C类D类)的低温电磁图(C类)小型和(D类)带有指定ES和VR颜色的大亚单位,如A类B类. (E类F类)rRNA ES和VR的分子模型C类D类
图4。
图4。
膨胀段ES3的分子模型S公司/欧洲标准6S公司,ES7L(左)和ES27L(左). (A类)ES6的隔离密度S公司d(蓝色)和ES3S公司a、 40S亚基上的c(金)(左侧)和透明的分子模型(居中). rRNA二级结构预测突出ES6环之间的相互作用S公司d和ES3中的凸起S公司c(c)(赖特),如参考文献所建议。(B类)ES7的隔离密度L(左)夏块菌(总吨位。,蓝色)和酿酒酵母(南卡罗来纳州。,金)在80S核糖体上(左侧)和透明的分子模型(居中). 核糖体蛋白L28e(红色)稳定ES7L(左)中的夏块菌80S核糖体,而r蛋白L6e的延伸似乎通过螺旋ES7形成的三向连接L(左)c–e类(赖特). 分子模型公式图像(黄金)和公式图像(蓝色)位置(左侧),如中所述酿酒酵母80S核糖体(缩略图插入)(39)和中间位置(公式图像,灰色)在夏块菌80S核糖体。在酵母中,r蛋白L34e(绿色)和L38e(红色)与公式图像公式图像位置。隧道出口(TE)和L1杆(L1)仅供参考。(C类)原理图(右上)和分子模型(中右对齐)表明公式图像(黄金)和公式图像(蓝色)位置涉及ES27的~110°旋转L(左)a–c相对于H63。连接的二级结构酿酒酵母第27页L(左)a–c和H63。
图5。
图5。
核糖体的冷冻电镜重建(A类)真细菌大肠杆菌(31), (B类)酵母酿酒酵母(27), (C类)小麦胚芽夏块菌(本工程),以及(D类)智人(44). 小亚基和大亚基分别以黄色和灰色显示,P-tRNA(绿色)显示供参考。虚线和数字表示未显示的rRNA扩展片段的核苷酸数量。

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