Technical Advance: The rat aorta contains resident mononuclear phagocytes with proliferative capacity and proangiogenic properties

doi:10.1189/jlb.0310178

.2010年11月；88(5):1051-9.

doi:10.1189/jlb.0310178。 Epub 2010年7月13日。

技术进展：大鼠主动脉含有具有增殖能力和促血管生成特性的常驻单核吞噬细胞

佩内洛普·佐齐¹, 阿尔弗雷德·卡普林, 凯利·德·史密斯, 罗伯托·F·尼科西亚

附属公司

PMID： 20628067
预防性维修识别码：项目经理3072232
内政部： 10.1189/jlb.0310178号

技术进展：大鼠主动脉含有具有增殖能力和促血管生成特性的常驻单核吞噬细胞

佩内洛普·佐齐等。白细胞生物学杂志. 2010年11月.

.2010年11月；88(5):1051-9.

doi:10.1189/jlb.0310178。 Epub 2010年7月13日。

作者

佩内洛普·佐齐¹, 阿尔弗雷德·卡普林, 凯利·德·史密斯, 罗伯托·F·尼科西亚

附属

¹VA Puget Sound Health Care System，1660 South Columbian Way，Seattle，WA 98108，USA弗吉尼亚州普吉桑德医疗保健系统。

PMID： 20628067
预防性维修识别码：项目经理3072232
内政部： 10.1189/jlb.0310178号

摘要

主动脉环模型中的血管生成是在免疫系统激活之前进行的，并因外膜巨噬细胞的消融而受损。用M-CSF处理主动脉培养物诱导CD45（+）CD68（+）单核细胞在主动脉周围广泛生长，具有巨噬细胞和DC的超微结构特征。主动脉周胶原溶解导致许多CD45（+）CD68（+）细胞附着在培养皿底部。提起胶原蛋白凝胶会留下CD45（+）CD68（+）细胞的斑块，这些斑块局部组织成分支索。这些细胞也表达CD14、CD169、F4/80和α-SMA，但不表达CD31、vWF、结蛋白或CD163。DNA合成研究表明，M-CSF刺激的细胞增殖活跃。主动脉斑块细胞表现出吞噬特性，对IL-4和GM-CSF产生反应，表现为表达MHC II，分化为DC，并形成多核巨细胞。它们还刺激主动脉环培养物中的血管生成和VEGF的产生。这项研究表明，大鼠主动脉含有一个独特的未成熟免疫细胞亚群，能够增殖、分化为巨噬细胞和树突状细胞，并刺激血管生成。从M-CSF刺激的主动脉环斑块中分离这些细胞，为研究主动脉壁常驻免疫系统的生物学和血管生成作用提供了一个可重复的系统。

PubMed免责声明

数字

图1。 — **图1.M-CSF促进CD45的生长⁺CD68型⁺大鼠主动脉血管生成培养物中的细胞。**
进行血管退行性变的大鼠主动脉的未经刺激、9天龄对照胶原凝胶培养显示，主动脉周围胶原溶解晕（a）周围有一些残余微血管（箭头）。经M-CSF处理的平行培养物在血管生成性突起的根部有一个致密的细胞边缘（箭头，B）。免疫过氧化物酶染色显示，新生血管根部的M-CSF刺激细胞对CD45（D）和CD68（F）具有反应性。少量CD45⁺和C68⁺在未刺激的对照组（C和E）中识别细胞。免疫染色主动脉培养物的定量分析显示CD45的数量显著增加⁺和C68⁺M-CSF处理后的细胞（G）。阴性对照用非免疫IgG（H）反应。放大倍数条：1000μm（A和B，条显示在A中）；200μm（C–F和H，bar以C表示）*****P（P）*< 0.001.

图2。 — **图2主动脉环培养中M-CSF刺激细胞的生长模式和超微结构特征。**
（A） CD45包围的微血管的免疫过氧化物酶染色⁺细胞，其中许多细胞附着在血管壁上（箭头所示）。通过电子显微镜，这些细胞显示出显著的细胞质空泡（B、C和E，箭头）、细长的细胞质突起（B和C，星号）和广泛的表面微绒毛突起（D和E，箭形）。相邻的细胞通过细胞连接（D和E，白色箭头）连接。（E，插图）接合复合体的高倍视图，具有间隙接合样特征（白色箭头）。放大倍数条=50μm（A）、5μm（B）和2μm（C–E）。

图3。 — **图3.M-CSF刺激的主动脉环培养物中细胞斑块的形成。**
M-CSF处理的主动脉环培养物随着时间的推移发生胶原溶解。M-CSF刺激的细胞聚集在胶原蛋白溶解室的壁上，形成密集的环形带（a，示意图；B，活培养图像）。将胶原蛋白凝胶与外植体一起提起，会留下一片附着在培养皿底部的M-CSF刺激细胞（C）。（B，C）放大镜棒=400μm。

图4。 — **图4 M-CSF刺激的主动脉斑块细胞的特征。**
（A） ABC免疫过氧化物酶法染色的斑贴细胞对CD45、CD68、CD169、F4/80和α-SMA表现出较强的免疫反应性，对CD163、CD31、vWF、结蛋白和非免疫IgG控制呈阴性；放大杆=100μm。（B）共聚焦图像显示CD68和α-SMA的主动脉斑块细胞共表达；放大倍数棒=20μm。（C） RT-PCR显示主动脉斑块细胞（A）表达CD68、CD14和α-SMA，CD163和CD31为阴性。阳性对照包括大鼠骨髓源性巨噬细胞（B）、大鼠主动脉内皮细胞（C）和大鼠主动脉平滑肌细胞（D）。（D）经CD45、CD68和α-SMA染色的主动脉斑块细胞的活培养物（左上角）和福尔马林固定培养物证明了这些细胞组织成线性阵列和分支线状结构的能力；放大杆：100μm。（E） M-CSF处理的大鼠主动脉胶原凝胶培养物（左上）和分离的主动脉细胞片，在有（左下）或无（右下）相位对比的情况下拍摄，显示出几个CD68⁺用胸腺嘧啶类似物EdU（绿色）孵育后的（红色）-增殖细胞。增殖性CD68⁺在主动脉培养物中，细胞形成集落（右上角，免疫过氧化物酶染色）。放大率条=50μm（左上和右下图像中显示的条）和100μm（右上）。（F） CD68免疫反应的主动脉斑块细胞在O.N.与荧光乳胶珠孵育后显示吞噬活性（上部，相差显微镜；下部，免疫荧光图像）。放大倍数棒=50μm。

图5。 — **图5主动脉斑块细胞具有表达MHC II、分化为DC和形成多核巨细胞的能力。**
显微照片显示未经处理（A）或用M-CSF（B）、GM-CSF（C）、IL-4（D）或GM-CSF/IL-4组合（E和F）处理的主动脉斑块细胞的MHC II免疫过氧化物酶染色。GM-CSF和IL-4（而非M-CSF）诱导DC分化，包括细胞质扩大、外周棘突形成和MHC II表达。GM-CSF/IL-4组合也促进多核巨细胞的形成（F，箭头）。（E）放大倍数棒=100μm。

图6。 — **图6主动脉斑块细胞刺激血管生成。**
在没有（A）或（B）主动脉斑块细胞的胶原凝胶中培养的大鼠主动脉环的显微照片（第7天）。主动脉环（箭头）的血管生成芽生受到主动脉斑块细胞的显著刺激。血管生成的定量分析表明，共培养物中新生血管的萌芽增加了50%（C，n个=4***P（P）*<0.01; ****P（P）*<0.001). 主动脉斑块细胞刺激血管生成与第7天VEGF浓度增加150%相关(n个=4;****P（P）*<0.001). （A）放大倍数棒=300μm。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

主动脉环模型中不同细胞类型对血管生成的旁分泌调节。
Nicosia RF、Zorzi P、Ligresti G、Morishita A、Aplin AC。尼科西亚RF等。国际开发生物学杂志。2011;55(4-5):447-53. doi:10.1387/ijdb.103222rn。国际开发生物学杂志。2011 PMID：21858770 审查。
主动脉对损伤和炎症细胞因子的血管生成反应需要巨噬细胞。
Gelati M、Aplin AC、Fogel E、Smith KD、Nicosia RF。 Gelati M等人。免疫学杂志。2008年10月15日；181(8):5711-9. doi:10.4049/jimmunol.181.8.5711。免疫学杂志。2008 PMID：18832730 免费PMC文章。
巨噬细胞和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子对大鼠肺泡巨噬细胞分化为多核巨细胞（MGC）期间细胞因子基因表达的差异影响：IL-6在2型MGC形成中的作用。
Lemaire I、Yang H、Lafont V、Dornand J、Commes T、Cantin MF。 Lemaire I等人。免疫学杂志。1996年12月1日；157(11):5118-25. 免疫学杂志。1996 PMID：8943422
M-CSF和GM-CSF促进肺泡巨噬细胞分化为具有不同表型的多核巨细胞。
Lemaire I、Yang H、Lauzon W、Gendron N。 Lemaire I等人。白细胞生物学杂志。1996年10月；60(4):509-18. doi:10.1002/jlb.60.4.509。白细胞生物学杂志。1996 PMID：8864136
使用粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子从正常小鼠肝脏中繁殖树突状细胞祖细胞，并在1型胶原存在下进行成熟发育。
Lu L、Woo J、Rao AS、Li Y、Watkins SC、Qian S、Starzl TE、Demetris AJ、Thomson AW。 Lu L等人。《实验医学杂志》，1994年6月1日；179(6):1823-34. doi:10.1084/jem.179.6.1823。《实验医学杂志》，1994年。 PMID：8195710 免费PMC文章。

查看所有类似文章

引用人

钙化条件培养基中的旁分泌信号在初级主动脉血管平滑肌细胞和外膜成纤维细胞中引起不同的反应。
Kennon AM，小Stewart JA。 Kennon AM等人。国际分子科学杂志。2023年2月10日；24(4):3599. doi:10.3390/ijms204043599。国际分子科学杂志。2023 PMID：36835011 免费PMC文章。
血管损伤和修复中的血管干/祖细胞。
陶J、曹X、于B、瞿A。陶杰等。《前心血管医学》，2022年2月10日；9:845070. doi:10.3389/fcvm.2022.845070。eCollection 2022年。《Front Cardiovasc Med.2022》。 PMID：35224067 免费PMC文章。审查。
RAGE差异改变在体外糖尿病诱导血管钙化中血管平滑肌细胞和外膜成纤维细胞的反应。
Kennon AM，小Stewart JA。 Kennon AM等人。前生理学。2021年6月7日；12:676727. doi:10.3389/fphys.2021.676727。eCollection 2021年。前生理学。2021 PMID：34163373 免费PMC文章。
外膜祖细胞的异质亚群调节血管稳态和病理性血管重塑。
Jolly AJ、Lu S、Strand KA、Dubner AM、Mutryn MF、Nemenoff RA、Majesky MW、Moulton KS、Weiser-Evans MCM。 Jolly AJ等人。《心血管研究》2022年5月6日；118(6):1452-1465. doi:10.1093/cvr/cvab174。心血管研究2022。 PMID：33989378 免费PMC文章。审查。
对经典大鼠主动脉环模型进行修改，以进行血管变性研究。
Blot G、Sartoris TM、Sennlaub F、Guillonneau X。 Blot G等人。 STAR协议。2021年1月21日；2(1):100281. doi:10.1016/j.xpro.2020.100281。eCollection 2021年3月19日。 STAR协议。2021 PMID：33532730 免费PMC文章。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Carmeliet P.（2005）《生命、疾病和医学中的血管生成》。《自然》438932-936。-公共医学
1. Noonan D.M.、De Lerma B.A.、Vannini N.、Mortara L.、Albini A.（2008）《炎症、炎症细胞和血管生成：决定和决定》。癌症转移评论27，31–40。-公共医学
1. Sunderkotter C.、Steinbrink K.、Goebeler M.、Bhardwaj R.、Sorg C.（1994）《巨噬细胞与血管生成》。J.Leukoc。生物学第55410–422页。-公共医学
1. David Dong Z.M.、Aplin A.C.、Nicosia R.F.（2009）巨噬细胞、树突状细胞和循环骨髓单核细胞对血管生成的调节。货币。药物设计。15, 365–379.-公共医学
1. Polverini P.J.（1997）巨噬细胞在血管生成依赖性疾病中的作用。EXS 79，11-28。-公共医学

出版物类型

行动
行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

赠款和资金

LinkOut-更多资源

[1] Carmeliet P.（2005）《生命、疾病和医学中的血管生成》。《自然》438932-936。-公共医学

[2] Carmeliet P.（2005）《生命、疾病和医学中的血管生成》。《自然》438932-936。-公共医学

[3] Noonan D.M.、De Lerma B.A.、Vannini N.、Mortara L.、Albini A.（2008）《炎症、炎症细胞和血管生成：决定和决定》。癌症转移评论27，31–40。-公共医学

[4] Noonan D.M.、De Lerma B.A.、Vannini N.、Mortara L.、Albini A.（2008）《炎症、炎症细胞和血管生成：决定和决定》。癌症转移评论27，31–40。-公共医学

[5] Sunderkotter C.、Steinbrink K.、Goebeler M.、Bhardwaj R.、Sorg C.（1994）《巨噬细胞与血管生成》。J.Leukoc。生物学第55410–422页。-公共医学

[6] Sunderkotter C.、Steinbrink K.、Goebeler M.、Bhardwaj R.、Sorg C.（1994）《巨噬细胞与血管生成》。J.Leukoc。生物学第55410–422页。-公共医学

[7] David Dong Z.M.、Aplin A.C.、Nicosia R.F.（2009）巨噬细胞、树突状细胞和循环骨髓单核细胞对血管生成的调节。货币。药物设计。15, 365–379.-公共医学

[8] David Dong Z.M.、Aplin A.C.、Nicosia R.F.（2009）巨噬细胞、树突状细胞和循环骨髓单核细胞对血管生成的调节。货币。药物设计。15, 365–379.-公共医学

[9] Polverini P.J.（1997）巨噬细胞在血管生成依赖性疾病中的作用。EXS 79，11-28。-公共医学

[10] Polverini P.J.（1997）巨噬细胞在血管生成依赖性疾病中的作用。EXS 79，11-28。-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

你的RSS订阅源

技术进展：大鼠主动脉含有具有增殖能力和促血管生成特性的常驻单核吞噬细胞

附属

技术进展：大鼠主动脉含有具有增殖能力和促血管生成特性的常驻单核吞噬细胞

作者

附属

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

分子生物学数据库

研究材料

其他

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

分子生物学数据库

研究材料

其他