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.2010年7月；42(7):619-25.
doi:10.1038/ng.594。 Epub 2010年5月30日。

TMEM216突变干扰纤毛发生并导致Joubert、Meckel和相关综合征

恩扎·玛丽亚·瓦伦特 1, 克莱尔·洛根, 苏马亚·穆古·泽雷利, 李正浩（Jeong Ho Lee）, 詹妮弗·西尔哈维, 弗朗西斯科·布兰卡蒂, 米里亚姆·伊安尼切利, 洛伦娜·特拉瓦格里尼, 斯维娃·罗马尼, 芭芭拉·伊利, 马修·亚当斯, 卡塔兹纳·西曼斯卡, 安娜丽莎·马佐塔, 李智恩（Ji Eun Lee）, 杰林·托伦蒂诺, 多米尼克·斯威斯敦, 卡梅洛·D·萨尔皮埃特罗, 卡梅洛·费德, 斯泰西·加布里埃尔, 卡斯滕·罗斯, 克里斯蒂安·西布尔斯基斯, 卡莉·索格内兹, 弗里德海姆·希尔德布兰特, 埃德加·A·奥托, 苏珊娜·赫尔德, 比尔·H·迪普拉斯, 艾丽卡·E·戴维斯, 马里奥·米库拉, 查尔斯·斯特罗姆, 布鲁里亚·本·泽夫, 多利特·列夫, 塔利·勒曼·萨吉, 玛丽娜·迈克尔逊, 尤瓦尔纱线, 阿曼达·克劳斯, 尤根·博尔沙乌瑟, 纳迪娅·埃尔卡托菲, 乔尔·鲁姆, 斯塔维特·沙列夫, 阿诺德·穆尼奇, 索菲·索尼尔, 克里斯·英格亨, 阿里·萨阿德, 阿迪拉·阿尔金迪, 苏菲汤玛士, 米歇尔·维克曼斯, 布鲁诺·达尔拉皮科拉, 尼古拉斯·卡萨尼斯, 科林·约翰逊, 塔妮娅·阿蒂埃-比塔赫, 约瑟夫·格里森
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TMEM216突变干扰纤毛发生并导致Joubert、Meckel和相关综合征

恩扎·玛丽亚·瓦伦特等。 自然基因. 2010年7月.

摘要

Joubert综合征（JBTS）、相关疾病（JSRD）和梅克尔综合征（MKS）是纤毛病。我们现在报道，MKS2和CORS2（JBTS2）基因座是等位基因，由TMEM216的突变引起，TMEM215编码一个无特征的四跨膜蛋白。CORS2患者经常出现肾结石和多指畸形，两名患者符合口-面-指VI型表型，而骨骼发育不良在MKS影响的胎儿中常见。在所有德系犹太血统（n=10）的病例中，均发现一个G218T突变（蛋白质中的R73L）。TMEM216定位于初级纤毛基底部，在突变的成纤维细胞中或敲除后TMEM217的丢失导致纤毛发生和中心体对接缺陷，伴随着RhoA和Dishevelled的过度激活。TMEM216与Meckelin形成复合物，该复合物由JSRD和MKS中也突变的基因编码。斑马鱼中tmem216表达的中断导致原肠胚发育缺陷，与其他睫状体变体类似。这些数据表明纤毛病中存在一个新的蛋白质家族，并进一步支持纤毛病疾病之间的等位性。

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数字

图1
图1
中的突变TMEM216型与JBTS2型和MKS2公司基因座。（a）染色体定位JBTS2型和MKS2公司Chr基因座。11美分。(b)TMEM216型基因组组织，描述起始密码子和终止密码子，以及确定的碱基变化的位置。（c）最长的剪接亚型编码148 aa四跨膜蛋白。患者突变主要集中在中间，一种流行的p.R73突变反复发生。发现了错义、无义和剪接突变。（d）变异氨基酸的进化保护。（e）患者突变导致蛋白质产品不稳定。与对照组相比，转染有编码野生型（WT）cDNA的细胞全裂解物与患者错义突变的Western blot（p.V71L）。与α-微管蛋白负荷控制相比，每一个突变都导致产生40-50%的WT蛋白水平。
图2
图2
TMEM216纤毛定位。(a至d)内源性TMEM216（绿色）和乙酰化α-微管蛋白或GT335（谷氨酰化微管蛋白）（红色）在IMCD3（a，b）、近端肾小管（c）或hRPE细胞（d）的初级纤毛（箭头）底部重叠定位。白色虚线表示管腔。方框以10倍的放大倍数显示插图。比例尺5μm。
图3
图3
TMEM216型突变或敲除导致纤毛发生和中心体对接受损。（a）两个不同的TMEM216型-突变的患者成纤维细胞系显示纤毛发生缺陷和中心体对接受损（以γ-微管蛋白为标志）。比例尺：左20μm；右侧1μm。（b）TMEM216抗血清与对照细胞中的19kDa带反应，在TMEM216型p.R85X成纤维细胞（一些残留很可能是由于基因治疗的通读），以及siRNA1处理的IMCD3细胞。纤维=成纤维细胞；非传输=未感染；可控硅=爬。（c）转染的IMCD3细胞显示Tmem216型siRNA处理，纤毛发生和中心体对接减少（注意，在击倒后缺少纤毛和顶部定位的中心体）。顶部是x-y轴，底部是x-z轴投影，比例尺10μm。（d）纤毛细胞百分比（定义为长度>1μm的纤毛）减少如下Tmem216型siRNA治疗。具有顶端基底体的细胞百分比（定义为与核位置相比最优越的1.0μm切片）也同样减少*p<0.01，**p<0.001，χ2检验。(e（电子）)显示72小时时的定量方法。比例尺：白色，最顶端1.0μm；灰色，基底1.5μm。
图4
图4
TMEM216与Meckelin复合，其缺失导致Rho过度活化和肌动蛋白细胞骨架重塑。（a）TMEM216-GFP（~37 kDa；箭头）用抗Meckelin抗血清对全细胞提取物（输入WCE）的N-或C-末端进行免疫沉淀（IP），但不在使用无关抗体（irr.Ab）或免疫前抗血清（preimm.）的对照IP中。箭头是IgG重链。（b）α-GFP诱导的TMEM216-GFP的IP可拉下一个含有内源性Meckelin亚型的60kDa C末端（箭头所示），但在没有抗体（无MAb）或无关抗体（irr.MAb）的对照IP中没有。箭头是IgG重链。（c）与正常对照组相比，MKS2成纤维细胞（纤维）WCE的激活RhoA-GTP水平增加。（d）siRNA敲除Tmem216型和Mks3型与加扰控制（scr.）相比，IMCD3细胞中RhoA激活增加。总RhoA和β-actin是负荷控制。阳性对照（+）加载非水解GTPγS，阴性对照（−）加载GDP。（e）用打乱的siRNA处理24小时后，RhoA（红色）定位于IMCD3细胞中的基底体（γ-微管蛋白，绿色），但错误定位于基底体附近的区域（箭头；插图，放大倍率x5）和基底外侧表面（箭头）Tmem216型击倒。γ-微管蛋白定位错误也很明显（底部插图）。比例尺10μm。（f）未分化对照组培养的成纤维细胞和两个MKS胎儿的亚细胞表型TMEM216型【p.R85X纯合子】和MKS3公司【p.R217X】+【p.M261T】，如图所示。两个突变细胞（箭头）中的肌动蛋白应力纤维通过鬼笔色素染色进行检测。比例尺10μm。
图5
图5
TMEM216破坏导致斑马鱼的Dvl1磷酸化和平面细胞极性样表型。（a）siRNA敲除Tmem216型(左侧面板)和TMEM216型p.R85X患者成纤维细胞(右侧面板)与加扰对照组（scr.）相比，导致上部（磷酸化）亚型（P-Dvl1）增加。单独使用Rho抑制剂外酶-C3-转移酶（2μg/ml(右侧面板).（b）TMEM216-GFP转染细胞中Dvl1和RhoA与TMEM216共免疫沉淀。箭头是IgG重链。（c）小鼠中心体/基体对接表型的剂量依赖性挽救Tmem216型在+=0.5，++=1.0，+++=2.0μg/ml Rho抑制剂处理后，siRNA处理的细胞*p<0.01**卡方检验p＜0.001。（d）将翻译嵌段吗啉（MO）注入时间216与打乱的MO相比，注射斑马鱼胚胎的睫状体缺陷表型（每种情况>50）。人的注射TMEM216型RNA在WT胚胎中不产生表型，但允许部分、剂量依赖性地挽救MO表型。（e）注射了时间216或mks3公司MO在8体节期有纤毛病变特征。（f）代表性11体节期胚胎与krox20，pax2，和肌营养不良核糖探针。通过第五菱形节的宽度（水平箭头）和脊索长度（垂直箭头）沿前-后（AP）轴的延伸（n=12-15个胚胎/注射）来测量中线的会聚。抑制时间216或mks3公司与对照组相比，变形原肠胚形成缺陷导致宽度和长度的显著差异（*p<0.005）。苯酚=表型；十一月=胚胎；菱形=菱形；横线=平均值的标准误差。
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    1. Lancaster MA，Gleeson JG。初级纤毛作为细胞信号中心：疾病的教训。2009年通用操作基因开发；19:220–9.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Keeler LC等。Joubert综合征合并眼-肾受累家族的连锁分析确定了染色体11p12-q13.3上的CORS2位点。美国人类遗传学杂志。2003;73:656–62.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Valente EM等。一种新型小脑肾综合征伴磨牙畸形的描述、命名和绘图。美国人类遗传学杂志。2003;73:663–70.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Valente EM等。区分Joubert综合征相关疾病的四种遗传原因。Ann Neurol公司。2005;57:513–9.-公共医学
    1. Baala L等人。Meckel-Gruber综合征基因MKS3在Joubert综合征中发生突变。美国人类遗传学杂志。2007;80:186–94.-项目管理咨询公司-公共医学

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