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.2009年11月4日；1（5）:5ra13。
doi:10.1126/scitranslmed.3000111。

血清淀粉样蛋白P通过Fc-γ-R依赖性单核巨噬细胞调节抑制纤维化

安娜·P·卡斯塔诺 1, Shuei-Long Lin公司, 特蕾莎·苏洛维, 布莱恩·T·诺林, 斯瓦蒂A Turlapati, 特贾斯·帕特尔, 阿杰·辛格, 肖恩·李, Mark L Lupher Jr公司, 杰里米·达菲尔德
附属公司

血清淀粉样蛋白P通过Fc-γ-R依赖性单核巨噬细胞调节抑制纤维化

安娜·P·卡斯塔诺等。 科学转化医学. .

勘误表in

  • 科学与运输医学，2009年11月4日；1（5）:5ra13

摘要

迫切需要针对慢性炎症和纤维化的新疗法。越来越多的证据表明，炎症细胞的先天激活导致了慢性器官纤维化。血清淀粉样蛋白P是一种自然循环的可溶性模式识别受体，是戊状腺素蛋白家族的成员。它将危险相关分子模式识别与Fcγ受体介导的吞噬作用联系起来。在这里，我们表明，治疗性服用人类血清淀粉样蛋白P可显著抑制小鼠肾脏的纤维化进程，通过激活Fc-γ受体进行调节，并依赖炎症单核细胞和巨噬细胞，但不依赖纤维细胞。人血清淀粉样蛋白介导的小鼠肾纤维化抑制与人血清淀粉状蛋白与细胞碎片的特异性结合以及随后在体内外对炎性单核细胞和肾巨噬细胞的抑制相关，并且依赖于对激活Fcγ受体和白介素-10表达的调节结合。这些研究揭示了Fc-γ受体在无菌性炎症中先前未确定的作用，并强调血清淀粉样蛋白P通过局部产生白细胞介素-10作为一种潜在的抗纤维化治疗。

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数字

图1
图1
SAP抑制单侧输尿管梗阻后肾纤维化。(A类)用HSA或hSAP治疗的Coll1a1-GFP小鼠第14天UUO肾脏的天狼星红染色或GFP免疫荧光显微照片。比例尺，50µm。(B类和C类)HSA或hSAP治疗小鼠肾脏UUO后第7天（B）天（d7）或UUO之后第14天（C）天狼星红染色区域的形态计量学定量[20 mg/kg每2天（q2d），n个=每组6个]。CON，控制。(D类和E类)肾脏UUO后（D）d7或（E）d14 GFP区域的形态定量Coll-GFP公司用HSA或hSAP处理的小鼠(n个=每组6人）。(F类)显示不同剂量和频率的hSAP对Trichrome染色的纤维化的影响的图表。每天qd。(克)肾αSMA阳性（肌成纤维细胞标志物）区域的免疫荧光Coll-GFP公司UUO小鼠经HSA或hSAP治疗后第7天（左侧），以及经SAP或HSA治疗的肾脏中Coll1a1-GFP阳性的αSMA阳性细胞百分比（右侧）。注：hSAP抑制肾肌成纤维细胞中Coll1a1基因的转录。标记，50µm。(H（H）)HSA或hSAP治疗小鼠肾脏UUO后第7天F4/80阳性（巨噬细胞标记物）区域的形态计量学定量(n个=每组6人）*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.01.
图2
图2
SAP抑制IRI后的纤维化，并选择性地沉积在受损肾脏中。(A类)用HSA或hSAP（20 mg/kg q2d）治疗的C57BL6小鼠IRI后d15肾脏的天狼星红染色（标记物，100µm）。(B类和C类)用HSA或hSAP处理的小鼠的（B）IRI后d7肾或（C）IRI后d15肾中天狼星红区的形态计量学定量。(D类)免疫荧光法检测经hSAP或HSA治疗的第7天IRI后肾脏与对照非疾病肾脏SAP沉积的形态定量。(E类)隔天腹腔注射hSAP或HSA后，IRI后肾脏中检测到SAP（绿色）的免疫荧光图像（左图）。请注意，SAP在管状细胞碎片（左）中检测到，在那里可以看到核碎片（箭头），但在间质巨噬细胞（F4/80，绿色）中也可以看到（中央），主要在内吞体和吞噬体中（箭头）(F类)UUO后第10天肾脏和正常肾脏中SAP的全肾蛋白Western blot检测。n个=每组6人。标记，50µm*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.01.
图3
图3
SAP与单核细胞谱系细胞和FcγRs的表面结合。(A类)SAP-594与HSA-594与纯化的原代培养小鼠肾间质成纤维细胞结合的直方图比较Coll-GFP公司老鼠。(B类)直方图Coll-GFP公司原代肾成纤维细胞的荧光强度Coll-GFP公司小鼠用HSA（50µg/ml；黑色）、hSAP（25µg/ml；灰色）或hSAP（50μg/ml；浅灰色）培养24小时。(C类)与CD11b分隔的人PBMC结合的SAP-488图。SAP-488选择性地与CD11b高白细胞（单核细胞）结合（FSC高，SSC低），而不与其他白细胞结合。(D类)显示HSA-488（深灰色）和SAP-488（浅灰色）与人类单核细胞结合的直方图。(E类到H（H）)显示HSA-488（黑色）或SAP-488（白色）与（E）纯化的成熟小鼠BMM、（F）来自健康小鼠的小鼠PBM、（G）UUO后第d7天的小鼠PBM、（H）UUO后第d7天的小鼠纯化肾巨噬细胞结合的直方图进行比较。(我)表达单独FcγRs的3T3小鼠成纤维细胞系的直方图，带有或不带有共受体FcRγ链。单个细胞系（左栏）的细胞表面FcγR表达（白色）与同型对照（黑色）相比。单个细胞系（右栏）显示SAP-488（白色）与HSA-488（黑色）的结合。7-AAD阳性细胞被排除在这些结合研究之外。(J型到L（左）)用双核表面等离子体共振技术对hSAP与hFcγRs结合的生化特性进行研究。（J） 人IgG的传感器图1当受体固定在Biacore CM5葡聚糖芯片上时，（上面板）与hFcγRI（重组外结构域）结合，但hSAP（下面板）无法在此方向与hFc-γRI结合。（K） 钙的传感器图2+-hSAP与CM5右旋糖酐的依赖性结合，然后在钙存在下解离2+螯合作用（10mM EDTA）。（五十） 通过Ca定向hFcγRIIIB与芯片结合hSAP结合的单循环动力学分析传感器图2+-与CM5右旋糖酐的依赖性结合。按照浓度增加的顺序注射五种不同的受体浓度，以获得亲和力计算的数据。hFcγRIIIB的结合时间为180 s，最后的长分离时间为7200 s（为呈现而衰减）。原始数据（黑色）和适用于1:1绑定的数据（红色）均显示在同一传感器图上，并表示背景减法后的数据。Off-rate非常慢，并且驱动了我们观察到的高亲和力的交互作用。结果代表了每个FcγR的三个独立实验。
图4
图4
条件巨噬细胞消融抑制输尿管梗阻患者的肾纤维化。(A类)巨噬细胞F4/80免疫染色或天狼星红染色检测肝纤维化的显微照片CD11b-DTRUUO后第10天用DT或载体治疗肾脏以清除巨噬细胞。(B类)用CD11b抗体和7/4标记单核细胞的同一小鼠PBMC的FACS图显示，DT也能消融循环单核细胞。(C类到E类)溶媒UU（VEH）治疗或DT治疗10天后肾脏F4/80免疫染色（C）、III型胶原免疫染色（D）或天狼星红染色的形态计量学定量CD11b-DTR老鼠*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.01.
图5
图5
hSAP通过触发hSAP调理凋亡细胞的FcγR依赖性摄取，在体内外抑制小鼠单核细胞和肾巨噬细胞的激活。(A类)直方图显示紫外线照射诱导凋亡后SAP-488与Jurkat T淋巴细胞结合的时间进程（小时）。(B类)3T3-FcγR/FcRγ链细胞系共同培养4小时后hSAP-调理凋亡胸腺细胞吞噬百分比的代表图。(C类)通过bDNA扩增（归一化为看家基因）评估相对转录表达Hprt1（小时）)通过纯化的小鼠骨髓基质细胞与凋亡细胞（AC）孵育，未补肾（黑色）或与hSAP调理（白色），并与无刺激、固定化IgG或IFN-γ共同激活。(D类)通过bDNA扩增（归一化为看家基因HPRT1）评估UUO后7天纯化肾巨噬细胞的三个亚群的相对转录表达，并通过标记物Ly6C进行区分你好、Ly6C整数和Ly6C洛来自通过腹腔注射HSA（黑色）或hSAP（白色）治疗7天的小鼠。此外，相对伊尔-10通过hSAP处理，通过Q-PCR（标准化为管家基因GAPDH）评估的转录物表达在所有肾巨噬细胞群体中显著增加。(E类)全肾裂解物的Western blot显示，hSAP治疗的小鼠d10 UUO肾脏中存在IL-10（18kD），但HSA治疗的小鼠中仅微弱检测到IL-10。(F类)用SAP（5µg/ml）培养的人单核细胞触发上清液中IL-10蛋白的释放(n个=≥3个/组*P（P）< 0.05).
图6
图6
hSAP抑制的肾纤维化依赖于FcγR和IL-10的表达。(A类到C类)年龄和应变匹配野生型（WT）小鼠UUO后10天天狼星红染色肾纤维化的形态计量学定量与（A）FcRγ链的比较−/−小鼠（缺乏FcγRI、III和IV），（B）FcγRAI−/−小鼠和（C）FcγRIII−/−老鼠。(D类)天狼星红纤维化的形态定量。FcRγ链的hSAP处理−/−与用hSAP治疗的应变匹配野生型小鼠相比，UUO后第10天，小鼠纤维化导致的纤维化减少明显较小。(E类)野生型单核细胞、FcRγ链用炎症细胞因子（IFN-γ、iIgG、LPS或组合）激活后24小时CXCL2相关基因转录−/−单核细胞或FcRγ链−/−单核细胞与hSAP（25µg/ml）共激活。(F类)应变匹配野生型和IL-10中UUO后天狼星红染肾纤维化d10的形态计量学定量−/−用HSA或hSAP处理的小鼠。(克)经Ad-IL-10、Ad-Mock或无病毒全身治疗的C57BL6小鼠UUO后10天天狼星红染色肾纤维化的形态计量学定量。(H（H）)培养的直方图Coll-GFP公司流式细胞术检测IL-10孵育8小时的肾成纤维细胞显示减少第1A1列基因转录。(n个=每组6人*P（P）< 0.05, **P（P）< 0.01).
图7
图7
SAP的抗纤维化作用机制。SAP对凋亡细胞或碎片进行调理，从而使SAP成为hFcγRIIA或hFcβRIII的高亲和力配体你好和Ly6C洛炎性巨噬细胞结合SAP调理碎片，触发IL-10释放，抑制巨噬细胞的纤维化前功能（通过周细胞/肌成纤维细胞的募集和激活），并直接抑制肌成纤维母细胞生成胶原1a1。虽然SAP抑制纤维细胞的出现，但纤维细胞在肾纤维化中不起作用。
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    1. Sansonetti私人。危险的先天信号和先天信号的危险。自然免疫学。2006;7:1237–1242.-公共医学
    1. Eddy AA。慢性肾脏疾病的进展。晚期慢性肾脏疾病。2005;12:353–365.-公共医学
    1. Lupher ML，Jr，Gallatin WM公司。免疫系统对纤维化的调节。高级免疫学。2006;89:245–288.-公共医学
    1. 达菲尔德JS。炎性巨噬细胞：杰基尔和海德的故事。临床。科学。（伦敦）2003年；104:27–38.-公共医学
    1. Gordon S.巨噬细胞的替代激活。《自然免疫学评论》。2003;3:23–35.-公共医学

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