跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2010年4月；84(8):3835-44.
doi:10.1128/JVI.01553-09。 Epub 2010年2月10日。

用于溶瘤病毒治疗的I型干扰素敏感重组新城疫病毒

苏比亚·埃兰库马兰 1, Vrushali Chavan公司, 丹乔, Raghunath Shobana公司, 戈帕库马尔·穆尔卡纳特, 莫阿纳罗·比斯瓦斯, 西巴·萨马尔
附属公司

用于溶瘤病毒治疗的I型干扰素敏感重组新城疫病毒

苏比亚·埃兰库马兰等。 J维罗尔. 2010年4月.

摘要

新城疫病毒（NDV）是一种禽副粘病毒，由于具有诱导细胞凋亡的强大能力，具有肿瘤选择性和内在溶瘤性。一些研究表明，由于肿瘤细胞的干扰素（IFN）抗病毒反应存在缺陷，NDV对肿瘤细胞具有选择性细胞毒作用，但对正常细胞不具有选择性细胞毒性。许多自然产生的NDV毒株具有完整的IFN拮抗功能，并且仍然可以在正常人类细胞中复制。为了避免NDV的潜在毒性问题，特别是在免疫抑制的癌症患者中，需要安全的NDV溶瘤载体。我们比较了（i）含有IFN拮抗性野生型V蛋白（rBC）的重组NDV（rNDV）菌株Beaudette C，（ii）具有突变V蛋白（rBC-Edit病毒）的同基因重组病毒的细胞杀伤能力，该突变V蛋白在感染细胞中诱导IFN增加，并且其在正常人细胞中的复制受到限制，以及（iii）一种重组LaSota病毒，具有与rBC-Edit病毒（LaSota V.F.病毒）一样对干扰素敏感的致命F蛋白裂解位点。我们的结果表明，rNDV的肿瘤选择性复制取决于IFN-α和IFN-α诱导的下游抗病毒基因的差异调节，尤其是通过IRF-7途径。在人纤维肉瘤裸鼠模型中，我们表明IFN敏感的NDV变体在清除肿瘤负担方面与IFN耐药的rBC病毒一样有效。此外，用rNDV治疗的小鼠对病毒没有毒性迹象。这些发现表明，NDV增强先天性免疫反应导致选择性溶瘤，并提供了一个新的安全的病毒治疗平台。

PubMed免责声明

数字

图1。
图1。
NDV在正常人上皮细胞和HuTu80肿瘤细胞中的病毒复制和传播水平不同。SVHUC1、正常的永生化人尿上皮细胞和HuTu80肠上皮肿瘤细胞感染rBC-EGFP病毒，感染指数为0.01。（A至D）左侧面板表示SVHUC1单元，右侧面板表示HuTu80单元。（A） 模拟感染细胞；（B） 感染后12h少数病毒感染的正常细胞中EGFP的表达与病毒感染的HuTu80细胞中广泛EGFP荧光的比较；（C） 与广泛的EGFP和感染后24小时病毒在肿瘤细胞中传播相比，病毒在正常细胞中没有传播和复制；（D） EGFP在少数细胞中表达，48小时后正常人细胞中没有病毒传播，单层完全破坏，HuTu80肿瘤细胞中有成簇表达EGFP的死亡细胞。
图2。
图2。
rNDV在正常和人类肿瘤细胞中的病毒复制和I型干扰素诱导。（A） rNDV的干扰素敏感性。将正常人（SVHUC1）和肿瘤（HuTu80）细胞（一式两份）用10 pg/ml的人干扰素-α处理24 h，并在感染后24、48和72 h通过Vero细胞的菌斑试验检测病毒产量，rNDV感染多重性为0.01。（B） DF1鸡胚成纤维细胞、正常肿瘤细胞和人肿瘤细胞被模拟感染或感染rNDV，MOI为10，无需IFN预处理。培养上清液用ELISA法检测IFN-β和IFN-α。感染后48小时rNDV感染细胞中IFN-β的产生。（C） 感染后48小时IFN-α的产生。（D） MOI为0.01的HuTu80细胞中IFN-β生成的时间进程分析。（E） MOI为0.01的HuTu80细胞IFN-α生成的时间进程分析。（F） 未经干扰素预处理的rNDV在正常细胞和HuTu80细胞中的多周期病毒复制。细胞被0.01的rNDV MOI感染。在Vero细胞中评估了rNDV在HuTu80肿瘤细胞中产生病毒的动力学。结果表示两个独立实验的平均值加上平均值的标准误差。
图3。
图3。
未能激活IRF-7会加剧NDV的复制和传播。SVHUC1、2fTGH、U3A和U6A人类纤维肉瘤细胞被模拟感染或感染rLaSota V.F.、rBC或rBC-Edit株NDV，MOI为10。EGFP在SVHUC1（IRF-7）中的表达表明病毒复制和传播+)（A）和IRF-7高甲基化野生型和突变型人类纤维肉瘤细胞（B至D）。（B） 2fTGH细胞；（C） U3A细胞；（D） U6A电池。
图4。
图4。
rNDV感染正常细胞和肿瘤细胞后诱导IFN-α应答基因。NDV的二级和三级转录反应（分别为2°TR和3°TR）的失败有助于肿瘤选择性和溶瘤。对病毒感染的主要反应由IRF-3介导，从而刺激IFN-β启动子。然后，IFN-β被翻译和分泌，以自分泌的方式刺激JAK/STAT信号在细胞核中形成ISGF3复合物，介导次级转录反应的诱导。在感染rNDV的细胞中，如果没有IRF-7的后续表达，几乎包括所有IFN-α基因及其下游抗病毒介质的第三转录波就无法发生。在缺乏IFN-α和IFN-α应答抗病毒基因的情况下，病毒在肿瘤细胞中得以复制。在正常人类细胞中，转录事件不受阻碍地进行，导致强大的抗病毒状态阻止病毒复制。感染rNDV后48小时，用RT-PCR检测细胞裂解物中IFN-α应答抗病毒基因。与模拟感染细胞中的水平相比，不同抗病毒介质（如ISG15、2′、5′A、IRF-1和ISG6-16 mRNA）的数量增加了一倍。数值表示两个独立实验中模拟感染细胞水平的平均倍数增加。显示了在2%琼脂糖凝胶中分析的2′，5′A和ISG15的RT-PCR产物，以及用于比较的β-肌动蛋白。
图5：。
图5：。
干扰素敏感性NDV株与干扰素接触性NDV株一样有效地逆转裸鼠体内的异种移植瘤。将HT1080人纤维肉瘤细胞植入BALB/c裸鼠皮下。当肿瘤在任何一个平面上的大小大于5 mm时，将重组NDV菌株作为单次注射（2×107PFU/ml在50μl中）。（A） 第31天患肿瘤的模拟感染小鼠；（B） rBC-EGFP病毒治疗荷瘤小鼠；（C） rBC-Edit病毒治疗小鼠；（D） 在治疗后第31天用rLaSota V.F.病毒治疗的小鼠。（E） 计算出的每种病毒株的肿瘤体积与接种后的天数进行了对比。结果是三只BALB/c小鼠的平均值加上平均值的标准误差。
图6。
图6。
荷瘤BALB/c裸鼠中rBC-EGFP病毒的实时显像。将100μl 2.0×10的HT1080荷瘤小鼠瘤内注射7-PFU/ml rBC-EGFP病毒，并在接种后72小时使用IVIS实时成像仪对病毒分布进行成像。展示了两个受rBC-EGFP感染的荷瘤小鼠的几种观点。sr，甾体；体重，背景。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“引用者”文章

工具书类

    1. Advani，A.S.和A.M.Pendergast。2002.Bcr-Abl变异体：生物学和临床方面。白细胞。决议26:713-720。-公共医学
    1. Arora，T.、G.Floyd-Smith、M.J.Espy和D.F.Jelinek。1999。IFN-α诱导的抗病毒和生长信号通路之间的分离。免疫学杂志。162:3289-3297.-公共医学
    1. 贝尔、S.、S.汉森和J.布奇纳。人类p53抑癌蛋白的复性和结构特征。生物物理学。化学。96:243-257.-公共医学
    1. Bello，M.J.、J.M.de Campos、M.E.Kusak、J.Vaquero、J.L.Sarasa、A.Pestana和J.A.Rey。1p的等位基因缺失与脑膜瘤的肿瘤进展相关。基因染色体癌9:296-298。-公共医学
    1. Bian，H.、P.Fournier、B.Peeters和V.Schirrmacher。2005.通过双特异性融合蛋白修饰的重组新城疫病毒进行体内肿瘤靶向基因转移。国际期刊Oncol。27:377-384.-公共医学

出版物类型

LinkOut-更多资源