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.1991年4月;138(4):867-73.

单克隆抗体Ki-67定义的细胞增殖相关核抗原的免疫生化和分子生物学特性

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单克隆抗体Ki-67定义的细胞增殖相关核抗原的免疫生化和分子生物学特性

杰德斯等。 美国病理学杂志. 1991年4月.

摘要

单克隆抗体Ki-67检测增殖细胞中存在但静止细胞中不存在的人类核抗原。本研究的目的是通过免疫生化和分子生物学技术对Ki-67抗原进行表征。酶消化实验表明,该抗原对蛋白酶处理高度敏感,0.1正常HCl不能提取该抗原,表明Ki-67抗原是非组蛋白。Ki-67细胞裂解物的免疫印迹分析显示,无论凝胶是在还原条件下还是在非还原条件下运行,其表观分子量均为395 kd和345 kd的双带。值得注意的是,这些条带只在从增殖细胞制备的裂解液中检测到,而在从静止细胞获得的裂解液里则没有。我们的分子克隆方法进一步证实了这些免疫生化数据。通过Ki-67免疫克隆,作者从lambda gt11文库中分离并测序了几个cDNA片段。在用增殖细胞制备的RNA进行的Northern印迹分析中,1095bp的片段在7.5-9.5kb处给出了强杂交信号,而用静止细胞制备的RNA则为阴性。该cDNA片段可以在细菌中表达,并且在随后的免疫印迹分析中,Ki-67仅与那些来源于含有插入物的细菌的融合蛋白反应。

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引用人

工具书类

    1. 美国国家科学院院刊,1983年7月;80(13):4045-9-公共医学
    1. 细胞科学杂志。1989年4月;92(第4部分):531-40-公共医学
    1. 免疫学杂志。1984年10月;133(4):1710-5-公共医学
    1. 血醇癌。1984年10月至12月;2(4):365-71-公共医学
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