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.1991年1月5日；266(1):630-6.

大鼠肝脏固醇载体蛋白2 cDNA的克隆、表达及核苷酸序列

U西多夫¹, G阿斯曼

附属公司

PMID： 1985920

免费文章

大鼠肝脏固醇载体蛋白2 cDNA的克隆、表达及核苷酸序列

U西多夫等。生物化学杂志. 1991.

免费文章

.1991年1月5日；266(1):630-6.

作者

西多夫大学¹, G阿斯曼

附属

¹德意志联邦共和国慕尼黑大学艺术研究所。

PMID： 1985920

摘要

通过克隆和测序大鼠固醇载体蛋白2（SCP2）cDNA，并将SCP2 cDNA与多种大鼠组织的RNA杂交，研究了SCP2的结构和表达。用来自大鼠SCP2蛋白序列的寡核苷酸探针对大鼠肝脏cDNA文库进行初步筛选，发现一个825碱基对cDNA克隆编码完整的SCP2蛋白质序列。我们的结果表明，大鼠肝脏SCP2有143个氨基酸残基长，包括一个20氨基酸残基前肽（pre-SCP2）。使用大鼠SCP2 cDNA作为探针，在高严格条件下与大鼠肝脏poly（a）RNA进行Northern blot杂交分析，检测到四种不同大小和表达水平的mRNA物种。相应mRNA的长度分别为0.8、1.4、2.1和2.7千碱基（kb）。在所有其他分析的组织中，与SCP2 cDNA探针杂交的mRNA的检测水平远低于肝脏。在这些组织中，绝大多数表达的SCP2 mRNA由0.8 kb mRNA组成。大鼠基因组DNA的Southern杂交分析结果表明，这四种不同的mRNA是单个基因的产物。使用大鼠肝脏SCP2 cDNA探针对大鼠肝脏cDNA文库进行了广泛筛选，分离出10个额外的克隆，所有克隆都包含长度超过0.8kb的cDNA插入。对这些cDNA的限制性定位和核苷酸测序分析表明，8个延伸到SCP2 cDNA的上游，2个延伸到5'和3'。最上游延伸序列的翻译表明，该cDNA是一个几乎全长的cDNA，编码547个氨基酸的蛋白质（SCP-chi）。与前SCP2相比，SCP-chi含有404-氨基酸氨基末端延伸，而其羧基末端部分与前SCP1相同。3'延伸cDNA的测序表明，与其余cDNA相比，多聚腺苷酸化在下游651个核苷酸发生。来自该区域的探针与1.4kb和2.7kb mRNA杂交。根据我们的数据，我们得出结论，1.4kb和2.7kb mRNA物种分别是由0.8kb和2.1kb mRNAs的交替多聚腺苷化产生的。相比之下，2.1 kb和2.7 kb mRNA在0.8 kb和1.4 kb mRNAs的上游含有约1300个核苷酸延伸，表明主要SCP2基因转录物的差异剪接导致前SCP2和SCP chi从单个基因表达。

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