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.2009年4月1日；182(7):4237-43.
doi:10.4049/jimmunol.0803449。

通过抑制TNF-{α}调节T淋巴细胞复制性衰老：caspase-3的作用

斯坦利T教区 1, 詹妮弗·E·吴, 丽塔·B·埃夫罗斯
附属公司

通过抑制TNF-{α}调节T淋巴细胞复制性衰老：caspase-3的作用

斯坦利T教区等。 免疫学杂志. .

摘要

缺乏CD28表达的CD8（+）T淋巴细胞数量的增加与多种有害的临床结果相关，包括老年人的早期死亡率、更快发展为艾滋病、心血管疾病和肿瘤细胞生长增强。在细胞培养中，CD28表达的不可逆丧失与TNF-α的生成增加相关，因为CD8（+）T细胞通过多轮银驱动细胞分裂被驱动到复制性衰老的非增殖终末阶段。有趣的是，在类风湿关节炎患者中，TNF-α的抑制或中和降低了疾病关节中缺乏CD28的T细胞的比例，这与显示这种细胞因子直接参与CD28基因转录的研究一致。在这里，我们表明，通过长期接触中和抗体或TNF-α受体-1抑制剂，调节长期培养的人CD8（+）T淋巴细胞中的TNF-阿尔法水平，增加增殖潜能，延迟CD28表达的丢失，延缓细胞因子谱的变化，并增强端粒酶活性。我们还表明，组成性caspase-3是TNF-αR1结合的下游效应器之一，在长期培养中随着CD28的丢失而增加，但这种作用在TNF-β抑制剂的存在下减弱。与体外培养数据一致，立即体外检测的CD8（+）CD28（-）T淋巴细胞也显示出与CD28（+）对应物相比，caspase-3水平显著升高。这些发现有助于阐明CD28基因调控的复杂性，并可能最终为与CD28（-）T淋巴细胞比例增加相关的疾病提供新的治疗方法。

PubMed免责声明

利益冲突声明

披露

作者没有经济利益冲突。

数字

图1
图1
抑制TNF-α增加CD8 T淋巴细胞的增殖潜能。长期CD8+健康献血者PBMC T淋巴细胞培养(n个=5）。每次继代培养时，抗体到肿瘤坏死因子-α（40纳克/毫升），肿瘤坏死因子-αR1-抑制剂（10μg/ml），或添加培养基，然后进行PD，直到达到复制衰老。A类，比较每个供体经处理和未经处理培养物的总PD。B类，未经处理和处理培养物的总PD平均数。DN，供者。
图2
图2
抑制TNF可延缓CD28表达的丧失-α如图1所示建立培养物，每次刺激后（刺激后约21–30天）培养物达到静止状态后，通过流式细胞仪测定CD28的表达。A类，代表性供体的流动直方图，显示CD28在6和18 PD时的表达。B类，CD8的平均（±SD）百分比+在早期（6个PD）和晚期（18个PD）时间点表达CD28的T细胞。C类，CD8的比较+CD28编号+，CD8−CD28编号−和总CD8+PHA刺激的T细胞（6μg/ml）在没有或存在TNF的情况下代表性供体-α（5 ng/ml和10 ng/ml）。PD的计算方法如材料和方法部分。D类，CD28转录表达(n个=5）根据GAPDH标准化。*，第页< 0.05; **,第页< 0.01.
图3
图3
TNF的影响-α抑制作用改变了衰老相关的细胞因子模式。在治疗和未治疗的培养物中，在6和18PD时评估细胞因子谱。A类，每个献血者未经治疗和治疗的培养物培养上清液中IL-6的浓度（pg/ml）(n个=5）通过ELISA评估。B类，IL-2 mRNA通过实时定量PCR进行分析，结果与GAPDH相关。*，第页< 0.05; **,第页< 0.01.
图4
图4
TNF公司-α抑制与端粒酶活性增加有关。第二次刺激后第4天，使用TRAP分析法分析10000个细胞裂解液中的端粒酶活性，如材料和方法。A类代表性凝胶显示，三种稀释液（10000、5000和2500细胞当量）均在端粒酶活性的线性范围内。B类来自代表性培养物的TRAP分析凝胶，每条通道使用5000个细胞当量。HI，热失活；IC、内部控制。
图5
图5
减少CD8中caspase-3的积累+TNF作用下的T细胞培养-α抑制。使用Apo-Alert比色分析试剂盒（Chemicon International）在CD8中测量组成型胱天蛋白酶-3活性+静止时的T细胞。A类，未经治疗的培养物中早期（6个PD）与晚期（18个PD）的时间点。B类，在晚期（18PD）时间点，所有供体的caspase-3浓度显示为所有条件(n个= 5). *,第页< 0.05; **,第页< 0.01.
图6
图6
CD8中caspase-3水平较高+CD28编号−与CD8相比+CD28编号−T细胞立即进行体内试验。CD8（CD8）+将T细胞分离成CD28+或CD28−通过磁珠筛选得到亚群，并通过流式细胞术确认每个亚群的纯度。如图5所示，使用Apo-Alert比色法测量Caspase-3活性(n个= 10). CD28的结果+和CD28−来自每个供体的亚群通过一条线连接。caspase-3活性差异极显著(第页< 0.001).
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    1. Lindstein T、June CH、Ledbetter JA、Stella G、Thompson CB。通过表面介导的T细胞激活途径调节淋巴因子信使RNA的稳定性。科学。1989;244:339–343.-公共医学
    1. Powell JD，Ragheb JA，Kitagawa-Sakakida S，Schwartz RH.CD28协同刺激和无能对白细胞介素-2表达的分子调控.免疫学评论，1998；165:287–300.-公共医学
    1. Valenzuela HF，Effros RB公司。重复遭遇相同抗原刺激后，人类CD4和CD8 T细胞的端粒酶和CD28表达模式不同。临床免疫学。2002;105:117–125.-公共医学
    1. Posnett DN，Sinha R，Kabak S，Russo C.正常老年人T细胞克隆群：相当于“良性单克隆γ-丙种球蛋白病”的T细胞。《实验医学杂志》，1994年；179:609–618.-项目管理咨询公司-公共医学

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