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1991年10月5日;266(28):18792-6.

编码线粒体谷氨酰胺酶肾脏同工酶的cDNA的分离、表征和体外表达

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  • PMID: 1918000
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线粒体谷氨酰胺酶肾脏同工酶编码cDNA的分离、鉴定和体外表达

R A夏皮罗等人。 生物化学杂志
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摘要

通过重组从随机给药的大鼠脑lambda gt11文库中分离的两个cDNA,生成编码线粒体谷氨酰胺酶(pGA)肾脏同工酶的cDNA。pGA编码674个氨基酸,其中包括16个残基的N末端序列,这些残基应该形成一个两亲螺旋,这是典型的线粒体靶向序列。残基73-90对应于更丰富的65-kDa谷氨酰胺酶肽的N末端序列。pGA的体外转录和翻译产生72-kDa肽,该肽用谷氨酰胺酶特异性抗体免疫沉淀。谷氨酰胺酶前体与分离的线粒体孵育产生68和65 kDa的肽,这是成熟谷氨酰胺酶的特征。因此,两种成熟的谷氨酰胺酶肽是由单个前体合成的。通过对从寡核苷酸(dT)引物大鼠肾脏lambda gt10文库中分离出的GA cDNA(pGA12)进行测序,对GA mRNA的完整3'非翻译区进行了表征。该片段包含大量AU富集区、四个潜在的干环结构和CA二核苷酸的48碱基对重复序列。这些结构域可能有助于增加GA mRNA的稳定性,这是对代谢性酸中毒的反应。

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