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.2009年2月19日;457(7232):1028-32.
doi:10.1038/nature07759。 Epub 2009年1月25日。

转录后处理产生多种5'修饰的长RNA和短RNA

合作者

转录后处理产生多种5'修饰的长RNA和短RNA

Affymetrix ENCODE转录组项目等人。 自然. .

摘要

真核细胞的转录体极其复杂。单个非编码RNA使蛋白质编码基因的数量相形见绌,包括人们熟知的类别,以及性质、范围和功能作用不明的类别。人类HeLa和HepG2细胞的小RNA(<200核苷酸)的深度测序显示了物种的显著广度。这些基因来自注释基因内和未注释基因间区域。总的来说,小RNA倾向于与CAGE(基因表达的cap分析)标签对齐,CAGE标签标记长RNA转录物的5’末端。许多小RNA,包括之前描述的启动子相关的小RNA,似乎具有帽结构。一类广泛的小RNA和CAGE标签的成员分布在注释蛋白编码和非编码基因的内部外显子上,有时跨越外显子-外显子连接。这里我们表明,成熟mRNA通过一种尚不清楚的机制进行处理,可能会产生复杂的长RNA和短RNA群体,其明显的5’末端重叠。提供与c-MYC转录起始位点相对应的合成启动子相关的小RNA减少了MYC信使RNA的丰度。本文的研究扩展了细胞小RNA的目录,并证明了至少一类非规范小RNA的生物学影响。

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数字

图1
图1。小RNA的基因组分布
a、,来自测序的sRNAs注释。”Rest’代表未标记的sRNA,过滤线粒体、Y染色体、重复序列和已知sRNA。miRNA,microRNA;ncRNA,非编码RNA。(显示了折叠数据。)b、,将未注释的序列映射到注释的基因组标志。as,对应转录物的反义;s、 感觉。(折叠数据。)阴影内部部分表示PASR分数。c、,sRNAs在TSS上的分布。方向是关于长的成绩单。反义sRNA用不同的-轴下方。(未折叠的数据。)日期:,PASR 5′端的表征。不详。,未经处理。提取U4、5S rRNA和mir-21的5′端序列作为对照。(未折叠数据。)
图2
图2。sRNA与CAGE标签的相关性
a、,CAGE标签在带注释的TSS上的分布。方向是关于长的成绩单。反义sRNA用不同的-轴下方。(未折叠数据。)b、,PASR(顶部)和非PASR sRNA(底部)在CAGE标记5′周围的分布结束。绘制每个CAGE标记到最近短RNA5′端的距离。(折叠的数据。)
图3
图3。CAGE标签、sRNAs和注释转录本内显子的相关性
a、,左:映射的CAGE标签5′端跨内部外显子分布。外显子长度标准化为100个片段。右:CAGE标签的分布没有映射到基因组,而是映射到内部外显子的外显子-外显子连接(EEJ)。b、,内部CAGE标签的患病率。黑线代表随机抽样中预期的最大外显子(见方法)。颜色对应于每个数据点表示的抄本数量。c、,CAGE标签和sRNA覆盖率载脂蛋白基因。来自cap-immunopreciption(IP)的sRNAs分别显示。组蛋白H3乙酰化(H3AC)模式如下所示。两个内部外显子被放大。日期:,抗cap-免疫沉淀RNA文库的特征。顶部面板:sRNA在总库和IP文库中的表示(未折叠数据)。对于除U4分数外的所有分数,考虑了唯一映射序列。底部面板:内部外显子CAGE 5′端到最近sRNA 5′端的距离(塌陷数据)。
图4
图4。PASR对基因表达的调节
a、,MYC基因座的表达谱。Affymetrix拼接阵列上HeLa细胞的长短RNA图谱。红色矩形表示设计的合成PASR(MYC_1–5用数字表示,序列信息见补充表2),对应于sRNA阵列轮廓中的峰值。b、,逆转录定量PCR检测HeLa细胞MYC mRNA表达水平(n个= 3,P(P)值<0.01)。c、,PASR转染对HeLa细胞中MYC应答荧光素酶转录报告子的影响以相对光单位(RLU)测量(n个= 2, *P(P)<0.01, **P(P)<0.001). 作为参考,显示了针对荧光素酶(siGL3)的对照33-mer和siRNA。
图5
图5。基因转录物代谢为长RNA和短RNA多样性的拟议模型
基因区域的转录产生包含5′帽结构的前体长RNA,如星号所示。在加工成剪接RNA后,蛋白质编码RNA要么被翻译,要么被进一步加工。这种进一步加工需要解理,在某些情况下,还需要添加5′修饰,可能是帽状结构。这些中间产物的额外裂解可以产生一类短RNA,一些还具有帽结构。lRNAs,长RNAs。

中的注释

  • 分子生物学:RNA的长短。
    卡尼奇P。 卡尼奇P。 自然。2009年2月19日;457(7232):974-5. doi:10.1038/457974b。 自然。2009 PMID:19225515 没有可用的摘要。

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