Lin28 modulates cell growth and associates with a subset of cell cycle regulator mRNAs in mouse embryonic stem cells

doi:10.1261/rna.1368009

.2009年3月；15(3):357-61.

doi:10.1261/rna.1368009。 Epub 2009年1月15日。

Lin28调节细胞生长并与小鼠胚胎干细胞中细胞周期调节因子mRNA的子集相关

徐炳森（Bingsen Xu）, 张克雄, 黄英群

PMID： 19147696
预防性维修识别码：项目经理2657009
内政部： 10.1261/rna.1368009

Lin28调节细胞生长并与小鼠胚胎干细胞中细胞周期调节因子mRNA的子集相关

徐炳森等。核糖核酸. 2009年3月.

.2009年3月；15(3):357-61.

doi:10.1261/rna.1368009。 Epub 2009年1月15日。

作者

徐炳森（Bingsen Xu）, 张克雄, 黄英群

PMID： 19147696
预防性维修识别码：项目经理2657009
内政部： 10.1261/rna.1368009

摘要

Lin28在人类和小鼠胚胎干细胞中高度表达。在这里，我们表明，在小鼠ES细胞中，Lin28的特异性抑制导致细胞增殖降低，而Lin28的过度表达加速了细胞增殖。此外，Lin28与含有细胞周期蛋白A、B和cdk4 mRNA的核糖核蛋白颗粒特异性结合。重要的是，Lin28水平的变化导致这些蛋白质水平的相应变化，来自细胞周期蛋白B和cdk4 mRNA的3'非翻译区的序列以Lin28依赖的方式对报告基因的翻译产生刺激作用。因此，我们假设Lin28可能在调节对多能干细胞的生长和维持至关重要的基因的翻译中发挥作用。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
Lin28表达改变细胞周期结构。(A类,B)如前所述，分别用指示的siRNA或质粒DNA转染ES细胞（Zhang等人，2007年）。48小时后，用BrdU脉冲标记细胞1小时，并进行流式细胞仪分析。G中细胞的百分比₁-、S-或G₂/图中显示了M相以及代表性的点图。值是两个实验的平均值。

**图2。**
Lin28与mRNA的一个特定子集相关。(A类)将Flag-Lin28转染小鼠ES细胞。24 h后进行免疫沉淀（IP），RT-qPCR分析RNP-相关RNA。显示了抗Flag中相对于对照IgG复合物的mRNA水平。每个bar表示平均值±SD(n个= 3). (B)相对于β-肌动蛋白mRNA的稳定mRNA水平绘制。每个条形代表平均值±标准偏差(n个= 3).

**图3。**
Lin28可能影响其相关mRNA的翻译。(A类)用Lin28 siRNA或对照siRNA转染小鼠ES细胞，分离细胞蛋白并进行蛋白质印迹分析。(顶部)使用抗体进行免疫印迹。(底部)相同膜的蛋白质印迹，但使用gapdh特异性抗体。斜体数字底部用gapdh信号正常化后处理的Lin28 siRNA与对照siRNA的百分比表示蛋白质水平。(B)将含有cdk4 3′UTR（UTR）、细胞周期蛋白B 3′UTR的中间（B1U2）或第一（B1U1）部分序列的荧光素酶报告基因构建物（Vasudevan和Steitz 2007）转染到HEK293细胞中，同时增加Flag-Lin28的数量。转染24小时后测量荧光素酶活性并绘制相对荧光素酶活性图。未经Flag-Lin28共转染的细胞的荧光素酶活性被任意设置为100%。结果代表了至少三个独立实验。所示数字是重复样本的平均值。显示在*正确的*是各个片段的示意图映射。图形未按比例绘制。

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