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.2009年2月;12(2):113-5.
doi:10.1038/nn.2244。 Epub 2009年1月11日。

proBDNF的神经释放

附属公司

proBDNF的神经释放

杨建民等。 自然神经科学. 2009年2月.

摘要

前脑源性神经营养因子(proBDNF)和成熟的BDNF利用不同的受体介导不同的神经元作用。使用新的工具量化内源性BDNF亚型,我们发现小鼠神经元同时分泌前BDNF和成熟BDNF。proBDNF和p75的最高水平在围产期观察到,但在成年期仍能检测到。因此,BDNF的作用在发育过程中受到原BDNF或成熟BDNF分泌以及p75和TrkB的局部表达的调节。

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图1
图1
检测小鼠海马中的前BDNF和成熟BDNF,以及培养海马神经元分泌前BDNF-和成熟BDNF。()用HA抗体免疫沉淀指定基因型4周龄小鼠的海马裂解物,并按指示进行免疫印迹。mAb287是BDNF前体的单克隆抗体,我们在补充图1中对其进行了表征。(b、 c)将所示基因型的P0小鼠的神经元培养7天(b条)或缺席(c(c))α2抗纤溶酶。培养基(M)和细胞裂解物(L)用HA抗体免疫沉淀(IP)。用HA.11抗体检测前BDNF和成熟BDNF。(d、 e(电子))神经细胞培养如b所示。我们添加了TrkB-Fc(d日)或TrkB-Fc或TrkA-Fc(e(电子))在收获前3d将其放入培养基中。在没有TrkB-Fc的情况下培养的神经元作为对照进行分析。裂解物经免疫沉淀;Fc蛋白由蛋白A-琼脂糖捕获(捕获)。((f))在胚胎第16.5天(E16.5)培养神经元b条并用56 mM KCl刺激90分钟。按指示处理培养基和细胞裂解物。()如前所述,将E16.5海马神经元在含或不含氟尿嘧啶的情况下培养2天。第7天在体外,用56 mM KCl刺激细胞90 min,并按指示进行免疫沉淀/western blot分析。我们所有的动物研究都得到了威尔康奈尔医学院动物护理和使用委员会的批准。
图2
图2
proBDNF和p75表达的发育调节。()用单抗287、HA和Cy3-结合链霉亲和素抗体免疫荧光检测小鼠海马(P28)中的BDNF,如Bdnf-HA公司/+或野生型大脑。以非免疫小鼠IgG作为对照。比例尺表示250µm。(b条)对来自指定基因型和年龄的小鼠的海马裂解物进行BDNF亚型免疫沉淀/western blot分析(顶部),探测以检测p75(中部)或探测ERK作为负荷对照(底部)。(e) 使用1周龄和4周龄小鼠大脑免疫荧光检测proBDNF或p75。非免疫IgG作为对照。比例尺表示250µm。

中的注释

  • proBDNF在哪里?
    宾夕法尼亚州巴克。 宾夕法尼亚州巴克。 自然神经科学。2009年2月;12(2):105-6. doi:10.1038/nn0209-105。 自然神经科学。2009 PMID:19172162 审查。 没有可用的摘要。

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