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.2009年2月6日；284(6):3537-45.
doi:10.1074/jbc。M807001200。 Epub 2008年12月9日。

氧化应激改变肺纤维化患者syndecan-1的分布

Corrine R Kliment公司 1, 贾德森·M·恩格勒, Bernadette R Gochuico公司, 余国英, 纳夫塔利·卡明斯基, 伊万·罗莎斯, 蒂姆·D·欧里
附属公司

氧化应激改变肺纤维化患者syndecan-1的分布

Corrine R Kliment公司等。 生物化学杂志. .

摘要

特发性肺纤维化（IPF）是一种以严重进行性纤维化为特征的间质性肺病。炎症和氧化应激的作用最近已被证明，但尽管在发病机制的理解方面取得了进展，但仍然没有有效的治疗IPF的方法。这项研究研究了细胞外超氧化物歧化酶（EC-SOD），一种合成癸烷结合的抗氧化酶，如何抑制炎症和肺纤维化。我们假设EC-SOD通过阻止syndecan碎片/脱落来保护肺部免受氧化损伤。野生型或EC-SOD-null小鼠暴露于气管内注入石棉或博莱霉素。Western blot检测支气管肺泡灌洗液和肺中的syndecans。还分析了人肺样本（正常和IPF）。对人和小鼠肺进行syndecan-1和EC-SOD免疫组织化学。在体外，肺泡上皮细胞暴露于氧化应激和EC-SOD。通过蛋白质印迹分析细胞上清液中脱落的syndecan-1。Syndecan-1胞外区用于评估伤口愈合和中性粒细胞趋化性。在IPF肺部的肺匀浆和灌洗液中检测到人类syndecan-1的增加。暴露石棉和博莱霉素后，EC-SOD-null小鼠灌洗液中的Syndecan-1也显著升高。在IHC上，syndecan-1染色在人和小鼠肺的纤维化区域增加。在体外，EC-SOD抑制氧化剂诱导的A549细胞合成癸烷-1的丢失。Shed和外源性syndecan-1胞外域诱导中性粒细胞趋化，抑制肺泡上皮伤口愈合，促进纤维形成。syndecan-1的氧化脱落是中性粒细胞趋化和异常伤口愈合的潜在原因，可能导致肺纤维化。

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数字

图1。
图1。
缺乏EC-SOD导致syndecan-1在石棉或石棉后的支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织博莱霉素暴露。BALF和野生动物肺匀浆中的Syndecan-1通过Western blot分析检测类型和EC-SOD KO小鼠，并显示为归一化净强度（平均值±标准偏差），n个=每组5只小鼠。BALF数据的结果标准化为蛋白质负荷，由膜的蓬松红染色。肺匀浆的结果是标准化为β-actin。将syndecan-1放入BALF，地址：(A类)石棉暴露后1天，*，对< 0.05; (B类)14天石棉暴露后，*，对< 0.05; (C)28天石棉暴露后，*，对< 0.05, **,对< 0.001;和(D类)博莱霉素暴露后7天，*，对< 0.001.E类石棉暴露后14天，肺匀浆中的syndecan-1和(F类)石棉暴露后28天，*，对< 0.05.用石棉和纯化的EC-SOD共同处理EC-SODKO小鼠，结果是G–a公司中性粒细胞减少，对< 0.001; **,对< 0.05; 和中G-b公司syndecan-1水平降低，对< 0.05; **,对<0.01，在第1天的BALF中，n个= 4.
图2。
图2。
Syndecan-1增加了IPF肺的BALF和肺匀浆与正常情况相比。通过Western blot分析和表示为标准化净强度（标准化为蛋白质负荷通过BALF样品的膜的胭脂红染色测定，以及肺匀浆样品标准化为β-actin（平均值±S.E.）。syndecan-1增加(A类)BALF样本；*，对< 0.01,n个=5和(B类)肺匀浆样本；*，对<0.05,n个= 4–5.
图3。
图3。
EC-SOD和syndecan-1在人和小鼠肺中的定位部分。 绿色EC-SOD；红色，syndecan-1；蓝色,核染色；黄色的，共同本地化。A类，人肺：那里EC-SOD在正常肺实质中的弥漫表达(一)和syndecan-1表达的焦点区域与EC-SOD共定位(黄色的;箭头). IPF肺的正常肺结构区域(c（c）)显示EC-SOD和syndecan-1的类似标签。相比之下纤维化(b条和d日)syndecan-1染色增强(红色染色，星号)，EC-SOD降低（绿色染色，单色星号），并且只有这个syndecan-1的一小部分仍然与EC-SOD公司(黄色染色，箭头).B类，肺组织用石棉或TiO处理的野生型和EC-SOD KO小鼠2在暴露后28天。一，TiO的正常肺结构2处理过的野生型显示弥散EC-SOD染色(绿色)和焦点与EC-SOD共定位的syndecan-1表达(橙色/黄色)与人类肺部的情况相似。b条石棉纤维区域经处理的野生型小鼠表现出弥漫性syndecan-1染色增强(双重的星号)与EC-SOD共定位(黄色，箭头).对EC-SOD KO小鼠肺进行syndecan-1染色，描绘(c（c）)TiO后正常肺结构2治疗（发现H&E图像补充图E2）和(d日)石棉治疗后纤维化。弥漫性syndecan-1染色在纤维化(双星号). 未发现非免疫性染色血清或IgG对照染色，参见补充图E1。
图4。
图4。
EC-SOD可防止syndecan-1的氧化脱落。A549电池在有或无EC-SOD或CuZnSOD的情况下用活性氧进行治疗。A类用斑点印迹法检测培养基中的人syndecan-1。结果显示，经过介质处理的网点强度增加了倍控制（平均值±S.E.）；*，对< 0.05; **,对<0.01.B类，A549上syndecan-1的代表性荧光染色在没有和存在EC-SOD的情况下，用ROS处理后的细胞。C、用培养基、对照siRNA处理的A549上清液，或syn-1 siRNA在HBSS或ROS治疗前24小时用于趋化试验。上清液中氧化脱落的syndecan-1是对中性粒细胞的趋化作用(项目管理编号). syndecan-1表达下调ROS治疗后抑制趋化性。*，对<0.001和**，对< 0.01与HBSS；^，对< 0.001.D类，氧化碎片硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(热休克蛋白)和(E类)未修饰的hS1ED促进PMN的趋化性(n个= 6, *,对< 0.005). 数据报告为PMN迁移指数（±S.E.）。治疗分三次完成。数据是三个独立实验的代表。
图5。
图5。
hS1ED抑制伤口愈合，而细胞表面syndecan-1促进牙槽骨再上皮化。数据以伤口愈合百分比报告（±S.E.），n个=每组6人。A类，鼠标的相位图像暴露于hS1ED的原发性肺泡上皮细胞单层伤口抑制原代细胞伤口愈合超过20小时*，对< 0.05.B类，暴露于hS1ED的A549单层伤口的相位图像，syndecan-1siRNA或阴性对照siRNA（以伤口百分比表示愈合C). hS1ED抑制A549上皮伤口愈合h.用30μ米siRNA（siRNA处理为伤口前24小时给予）导致伤口愈合受损和变化细胞形态从扁平鳞状变为圆形，对< 0.05; **,对< 0.001. 没有区别在使用培养基和对照siRNA的基线伤口愈合之间。D类,人syndecan-1在A549细胞中成功敲除30μ米和60μ米syndecan-1 siRNA（siRNA处理24小时后）。*，对< 0.05.
图6。
图6。
Syndecan-1胞外域诱导肺成纤维细胞增殖并诱导释放TGF-ß1。 A类，LL47成纤维细胞用培养基或hS1ED培养24小时并测定增殖。已更正490nm处的吸光度与代谢活性物质的数量成正比单元格。*，对< 0.01.B类，成纤维细胞用培养基或hS1ED培养48小时。随后对上清液进行总量分析TGF-ß1（ng/ml）；*，对< 0.01. 活动中没有差异检测TGF-ß1水平。
图7。
图7。
肺中的氧化应激总结。氧化性损伤肺可导致上皮细胞丢失和syndecan-1脱落。这个脱落可能造成细胞趋化性的破坏性循环，异常上皮再形成和TGF-β生物利用度增加导致肺纤维化。
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    1. Flaherty，K.R.、Travis，W.D.、Colby，T.V.、Toews，G.B.、Kazerooni，E.A.、Gross，B.H.、Jain，A.、Strawderman，R.L.、Flint，A.、Lynch，J.P.和Martinez，F.J.（2001）Am.J.Respir。批评。护理医学164 1722–1727-公共医学
    1. Gross，T.J.和Hunninghake，G.W.（2001）《新英格兰》。医学杂志345 517–525-公共医学
    1. Walter，N.、Collard，H.R.和King，T.E.，Jr.（2006）Proc。美国胸科。第3组330–338-公共医学
    1. Kinnula，V.L.、Fattman，C.L.、Tan，R.J.和Oury，T.D.（2005）Am.J.Respir。批评。护理医学172 417–422-项目管理咨询公司-公共医学

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