跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

政府意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2008年10月31日；322(5902):750-6.
doi:10.1126/science.1163045。

短重复RNA靶向小鼠X染色体的多梳蛋白

赵静（音译） 1, 布莱恩·K·孙, 詹妮弗·阿埃尔文, Ji-Joon宋, 珍妮·T·李
附属公司

短重复RNA靶向小鼠X染色体的多梳蛋白

赵静（音译）等人。 科学类. .

摘要

为了使性别间的X染色体剂量相等，雌性哺乳动物会使其两条X染色体中的一条失活。X染色体失活（XCI）是由Xist的表达启动的，Xist是一种17-kb的非编码RNA（ncRNA），顺式积累在X上。由于相互作用的因素尚未被分离出来，Xist诱导沉默的机制尚不清楚。我们在Xist中发现了一个1.6千碱基的ncRNA（RepA），并确定Polycomb复合体PRC2为其直接靶点。PRC2最初由RepA RNA招募到X，Ezh2作为RNA结合亚单位。反义Tsix RNA抑制这种相互作用。RepA缺失消除了X的组蛋白H3的赖氨酸27上的全长Xist诱导和三甲基化。同样，PRC2缺乏会损害Xist的上调。因此，需要RepA和PRC2来启动和传播XCI。我们得出结论，ncRNA辅因子将Polycomb复合物招募到其靶位点。

PubMed免责声明

数字

图1
图1。PRG2复合体包含Xist
A.地图西斯特。B、 指示细胞中的C，D.RIP，α，抗体。核糖核酸酶预处理对RIP信号的影响。F.通过实时PCR将R1处的链特异性RIP归一化为输入RNA。误差栏，1个标准偏差（SD）。G.通过实时PCR在R1–R5位置定量RIP。H.DNA ChIP使用指示抗体，显示为输入的一部分，并标准化为正常IgG ChIP。
图2
图2。Xist中的一个小RNA
A.地图回购协议和5′端西斯特。B、 C.链特异性实时PCR定量ES细胞（B）或MEFs（C）中R6–R9的RNA拷贝，标准化为标准曲线。D.使用RepA探针的RNA FISH。E.RepA和Tsix的北部分析（5′和3′位置）。F.3′RepA种族。G.荧光素酶报告子瞬时转染构建比较RepA（bp79-320）和Xist P1启动子，每个启动子均归一化为载体控制。P（P），学生t吨-在指示的两两比较中进行测试。H.DNA鱼类回购协议转基因雌性ES细胞。Xist P1启动子不在转基因中。箭头，转基因。Tsix公司通过pSx7检测。I.代表性克隆B5和C5+/-多西环素诱导中的定量RIP。无抗体对照未产生可检测的RNA。
图3
图3。RepA RNA直接结合PRC2体外试验。
A.一次重复一个单位。WT，野性感。哑巴，变异。AS，反义。DsI和DsII，随机Xist序列。B.EMSA使用雌性ES核提取物（NE）。竞争对手的摩尔过量为500倍。箭头，感测位移。箭头，AS shift。C.反义结合由感觉而非非特异性RNA竞争。D.EMSA超位移（*）与α-Ezh2。E.EMSA使用重组hPRC2（sub）复合物。fEzh2，果蝇Ezh2。hPRC2受反义而非随机探针结合。
图4
图4。RepA/PRC2击倒危及XCI启动
A.敲除克隆中的Xist RNA-H3K27me3免疫FISH。shRNA:RA、RepA。X1，Xist外显子1。Scr，加扰控制。B.击倒克隆中指定位置的Xist和Tsix水平。C.ImmunoFISH:Xist上调的频率（Xist+)和H3-K27me3病灶。P（P），与Xist的Scr-12控件进行成对比较+频率。D.shRNA克隆中的EB生长。Eed、Ezh2或对照敲除后的E.Xist-H3K27me3免疫FISH。F.Eed和Ezh2mRNA水平Tsix公司Δ/+ES细胞。P（P），学生t吨-测试。指示敲除后的Xist RNA的G.qRT-PCR。P（P），学生t吨-测试。H.ImmunoFISH：在指示敲除后，Xist上调和H3-K27三甲基化的频率。P（P）比较了对照组（“预期”）和Eed/Ezh2击倒组中的Xist焦点数。
图5
图5。XCI后核周隔区PRC2和Xi联合
A.免疫染色：Ezh2和Suz12集中在核仁周围（B23+）。B.Ezh2和Suz12表现出核周富集，但H3K9me3没有。C.Xist RNA-Ezh2免疫鱼类。Xa中的D.Xist DNA-Ezh2免疫FISH重量Xi（希）Δ西斯特MEF（6）。E.总结和模型。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

  • hnRNPK招募PCGF3/5-PRC1到Xist RNA B-Repeat以建立多梳介导的染色体沉默。
    Pintacuda G、Wei G、Roustan C、Kirmizitas BA、Solcan N、Cerase A、Castello A、Mohammed S、Moindrot B、Nesterova TB、Brockdorff N。 Pintacuda G等人。 分子细胞。2017年12月7日；68（5）：955-969.e10。doi:10.1016/j.molcel.2017.11.013。 分子细胞。2017 PMID：29220657 免费PMC文章。
  • 非编码RNA和多梳招募。
    布罗克多夫N。 Brockdorff N。 RNA。2013年4月；19(4):429-42. doi:10.1261/rna.037598.112。Epub 2013年2月19日。 RNA。2013 PMID：23431328 免费PMC文章。 审查。
  • X失活开始时的Xist基因调控。
    参议员CE，Brockdorff N。 Senner CE等人。 2009年4月通用操作基因开发；19(2):122-6. doi:10.1016/j.gde.20009.03.003。Epub 2009年4月1日。 2009年通用操作基因开发。 PMID：19345091 审查。
  • Eed和Tsix在抑制Xist基因和X染色体失活中的协同作用。
    Shibata S、Yokota T、Wutz A。 Shibata S等人。 EMBO J.2008年7月9日；27(13):1816-26. doi:10.1038/emboj.2008.110。Epub 2008年5月29日。 EMBO J.2008。 PMID：18511907 免费PMC文章。
  • X失活开始时PRC1功能的恢复与PRC2和沉默无关。
    Schoeftner S、Sengupta AK、Kubicek S、Mechtler K、Spahn L、Koseki H、Jenuwein T、Wutz A。 Schoeftner S等人。 EMBO J.2006年7月12日；25(13):3110-22. doi:10.1038/sj.emboj.7601187。Epub 2006年6月8日。 EMBO J.2006年。 PMID：16763550 免费PMC文章。
查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Brown CJ等，《细胞》。1992;71:527.-公共医学
    1. Penny GD、Kay GF、Sheardown SA、Rastan S、Brockdorff N.Nature。1996;379:131.-公共医学
    1. Lee JT、Lu N.Cell。1999;99:47.-公共医学
    1. 克莱姆森CM、麦克尼尔JA、威拉德H、劳伦斯JB。细胞生物学杂志。1996;132:259.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Lucchesi JC、Kelly WG、Panning B.Annu Rev Genet。2005;39:615.-公共医学

出版物类型

MeSH术语

关联数据