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.2008年10月20日；183(2):213-21.
doi:10.1083/jcb.200806137。 Epub 2008年10月13日。

皮质星形胶质细胞吸收和再循环前BDNF促进传质诱导分泌

马泰奥·贝加米 1, 斯巴达克·桑蒂, 埃琳娜·福马吉奥, 肉桂, 克劳迪娅·维尔德里奥, 罗伯特·布仑姆, Benedikt Berninger公司, 米歇尔·马泰奥利, 马可·卡诺萨
附属公司

皮质星形胶质细胞吸收和再循环前BDNF促进传质诱导分泌

马泰奥·贝加米等。 J细胞生物学. .

摘要

脑源性神经营养因子（BDNF）的活性依赖性分泌被认为可以增强突触可塑性，但控制分泌的BDNF的细胞外可用性和清除的机制尚不清楚。我们发现BDNF以其前体形式（pro-BDNF）分泌，然后在皮层切片第II/III层的θ突发刺激后，通过附近的星形胶质细胞的快速摄取，从细胞外空间清除，这是一种导致突触传递长期增强的范式。前BDNF内化通过与泛神经营养素受体p75形成复合物和随后的氯氰菊酯依赖性内吞发生。在培养的星形胶质细胞中使用荧光标记的前BDNF和实时全内反射荧光显微镜来监测单个内吞小泡对神经递质谷氨酸的反应。我们发现，内吞的前BDNF进入了一个快速循环途径，用于随后的可溶性NSF附着蛋白受体依赖性分泌。因此，星形胶质细胞包含一个内吞室，能够进行前BDNF循环，这表明神经元和胶质细胞之间存在一种特殊的双向通讯形式。

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数字

图1。
图1。
将前BDNF从神经元转移到神经元周围星形胶质细胞。（A） 切片准备的示意图。（B） 使用α-BDNF或α-pro-BDNF特异性抗体对BDNF（混合物）或抗劈裂原-BDNF进行Western blot分析（Mowla等人，2001年）。（C） 基础（对照）或TBS刺激时的场电位振幅（黑色圆圈）和BDNF水平（灰色圆圈）。记录后，使用α-pro-BDNF对切片进行免疫染色。免疫反应性显示在与A的A1和A2区相对应的两个相邻区域。（D）使用α-BDNF进行免疫组织化学。棒材，100μm。（E） TBS后20分钟切片中A1的高分辨率共聚焦图像。Pro-BDNF免疫反应显示在星形细胞与神经元接触的部位（方框和插图1）、星形细胞胞体（方框和附图2）和突起（方框和附表3）。显示具有GFAP免疫反应性的前BDNF染色，并叠加到GFAP信号的3D重建上。箭头表示前BDNF免疫反应阳性点状物沿星形细胞突起分布。棒材，20μm。（F） pro-BDNF/GFAP共定位的时间进程（四片九个细胞）。（G） 刺激10分钟后，Pro-BDNF/GFAP在对照组星形胶质细胞（三片12细胞）或TBS片（六片24细胞）或无茴香霉素（五片11细胞）、TrkB-Fc（四片九细胞）和纤溶酶（五片二十四细胞）的星形胶质细胞中共定位。神经核，神经元核。数据为平均值±SEM（误差线）。*，P≤0.05。
图2。
图2。
第75页NTR公司–网格蛋白介导星形胶质细胞中前BDNF的内化。（A） GFAP、pro-BDNF和p75之间的ColocalizationNTR公司切片暴露于TBS后10分钟，星形胶质细胞中的氯氰菊酯或EEA1免疫反应。星形胶质细胞与神经元接触的部位（方框和插图1）和星形胶质细胞突起（方框和附图2）显示出结肠化信号。棒材，10μm。（B） Pro-BDNF/GFAP在p75的对照组（5片22细胞）或TBS片（5片18细胞）星形胶质细胞中的共定位NTR公司+/+和p75NTR−/−老鼠。（C） 在没有K252a（四片九细胞）、MDC（三片十一细胞）或D15（三片十一月细胞）的对照组（六片九细胞组）或TBS片（四片十二细胞组）的星形胶质细胞中，Pro-BDNF/GFAP共定位。（D） 蛋白质印迹显示p75的表面表达NTR公司来自对照星形胶质细胞或暴露于BDNF（混合物）的星形胶质细胞的TrkB或TrkB-t。显示培养神经元中TrkB和TrkB-t的表达以进行比较。右侧面板显示了星形胶质细胞中BDNF浓度的ELISA测量。数据为平均值±SEM（误差线）。*，P≤0.05。
图3。
图3。
pro-BDNF的内部化–p75NTR公司培养的星形胶质细胞中的复合物。（A） TIRF成像显示培养星形胶质细胞中前BDNF–QD–p75-GFP内化的时间序列。白色箭头表示前BDNF-QD（红色）与转染p75-GFP的星形胶质细胞膜非常接近（绿色）。黄色箭头指向参考QD。插图描述了集中在QD位置的p75-GFP荧光。棒材，5μm。（B） 转染p75-GFP（九个细胞）或Lck-GFP的星形胶质细胞中的Pro-BDNF-QD内化。（C） p75星形胶质细胞中Pro-BDNF–QD内化NTR公司+/+（22个细胞）和p75NTR−/−（11个细胞）小鼠。（D） 免疫细胞化学显示QD（蓝色）和p75之间的共定位（箭头）NTR公司（红色）转染p75-GFP或Lck-GFP（绿色）的星形胶质细胞。棒材，2μm。数据为平均值±SEM（误差线）。*，P≤0.05。
图4。
图4。
星形胶质细胞再循环内吞原-BDNF以调节分泌。（A） 使用α-BDNF或α-pro-BDNF抗体对BDNF-YFP（混合物）进行Western blot分析。（B） 未经治疗的星形胶质细胞的免疫细胞化学(n个=12）或与BDNF-YFP（混合；n个=18），然后是酸条。棒材，10μm。（C） 星形胶质细胞暴露于BDNF-YFP金10分钟后的超微结构特征。箭头指向囊泡细胞器中的金颗粒。条形，500 nm。（D） 用BDNF-YFP孵育5分钟的星形胶质细胞的代表性TIRF图像。顶部序列描绘了谷氨酸灌注前后选定星形胶质细胞区域（白色矩形）中的胞外融合（箭头）。底部序列显示单个囊泡融合。荧光强度在以囊泡为中心的圆形掩模和圆周上的同心环中测量。棒材，2μm。（E） 谷氨酸应用后融合事件（闪光）的时间分布。插图显示了之前每个星形胶质细胞的闪光总数(n个=17）及之后(n个=13）谷氨酸。（F） ELISA定量检测星形胶质细胞BDNF分泌(n个=18）及之后(n个=22）施加谷氨酸5分钟。在没有谷氨酸的情况下，用谷氨酸刺激之前暴露于BDNF（混合物）10分钟的星形胶质细胞(n个=14）或存在(n个=TeNT的4）。（G） 无AMPA或t-ACPD诱导BDNF分泌(n个=23）或存在(n个=17）各拮抗剂CNQX或AIDA和50 Hz(n个= 6). 数据为平均值±SEM（误差线）。*，P≤0.05。
图5。
图5。
含有前BDNF–p75的囊泡NTR公司表达SNARE核心复合物的Vamp2成分，用于囊泡融合。（A） TBS后10分钟，星形胶质细胞中GFAP、前BDNF和Vamp2免疫反应性之间的结肠化。结肠化信号（箭头）显示在星形胶质细胞与神经元接触的部位（方框和插图1）和星形胶质细胞突起（方框和附图2）。棒材，20μm。（B） 免疫细胞化学显示转染p75-GFP的星形胶质细胞中，前BDNF-QDs和Vamp2共定位。右侧面板显示了选定星形细胞区域（方框区域）中的QD/Vamp2共定位（箭头）。棒材，2μm。（C） 蛋白印迹显示p75NTR公司α-p75包被磁珠免疫纯化（IP）的内吞囊泡中Vamp2的表达NTR公司来自未经处理或经BDNF（混合物）处理的星形胶质细胞的α-Vamp2或α-Map2。
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    1. An，J.J.，K.Gharami，G.Y.Liao，N.H.Woo，A.G.Lau，F.Vanevski，E.R.Torre，K.R.Jones，Y.Feng，B.Lu和B.Xu。2008.长3′UTR BDNF mRNA在海马神经元脊柱形态和突触可塑性中的独特作用。单元格。134:175–187.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. A.Balkowiec和D.M.Katz。2000.通过ELISA原位检测初级感觉神经元内源性脑源性神经营养因子的活性依赖性释放。《神经科学杂志》。20:7417–7423.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Bezzi，P.、V.Gundersen、J.L.Galbete、G.Seifert、C.Steinhauser、E.Pilati和A.Volterra。星形胶质细胞含有一个囊泡隔室，能够调节谷氨酸的分泌。自然神经科学。7:613–620.-公共医学

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