Promoter ChIP-chip analysis in mouse testis reveals Y chromosome occupancy by HSF2

doi:10.1073/pnas.0800620105

.2008年8月12日；105(32):11224-9.

doi:10.1073/pnas.0800620105。 Epub 2008年8月5日。

小鼠睾丸启动子ChIP-ChIP分析揭示HSF2对Y染色体的占据

马林·阿克费尔特¹, 伊娃·亨利克森, 阿斯塔·莱荷, 安妮娜·维赫瓦拉, 卡罗琳娜·劳托马, 努拉·科塔亚, 利亚·西斯顿

附属公司

PMID： 18682557
预防性维修识别码：项目经理2496887
内政部： 10.1073/pnas.0800620105

小鼠睾丸启动子ChIP-ChIP分析揭示HSF2对Y染色体的占据

马林·阿克费尔特等。美国国家科学院程序. 2008.

.2008年8月12日；105(32):11224-9.

doi:10.1073/pnas.0800620105。 Epub 2008年8月5日。

作者

马林·阿克费尔特¹, 伊娃·亨利克森, 阿斯塔·莱荷, 安妮娜·维赫瓦拉, 卡罗琳娜·劳托马, 努拉·科塔亚, 利亚·西斯顿

附属

¹图尔库生物技术中心，图尔库大学和Abo Akademi大学，芬兰图尔库FIN-20520。

PMID： 18682557
预防性维修识别码：项目经理2496887
内政部： 10.1073/pnas.0800620105

摘要

哺乳动物Y染色体对精子发生至关重要，其特征是精子细胞分化和染色质凝聚，以获得正确的精子形状。小鼠Y染色体长臂（MSYq）的雄性特异性区域缺失，包含几个基因的多个拷贝，导致精子头部缺陷和生育能力受损。利用小鼠睾丸启动子芯片上的染色质免疫沉淀（ChIP-ChIP），我们发现体内MSYq被热休克因子2（HSF2）占据，HSF2是一种参与精子发生的转录因子。HSF2也被发现调节MSYq驻留基因的转录，其转录调控尚不清楚。重要的是，Hsf2的破坏引起了与MSYq 2/3缺失相似的表型，即改变了多拷贝基因的表达，增加了轻微的精子头部异常。因此，检测到染色质包装蛋白水平异常和更频繁的DNA断裂，这意味着HSF2是精子中正确染色质组织所必需的。我们的发现确定了HSF2在调节MSYq驻留基因和精子质量中的生理作用。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

数字

**图1。**
体内睾丸中HSF2与新靶基因的结合。(A类)使用SignalMap软件（NimbleGen Systems）可视化六个选定目标启动子上的HSF2-结合剖面：*Ssty2型*,*Sly公司*,*Slx公司*,*斯佩尔4a*,*Hsc70型*、和*Ftmt.（英尺）。*每个启动子上15个探针的定位显示为启动子上方的条形，以确定HSF2的富集。多拷贝基因显示了一个具有代表性的启动子。假定的热休克因素（HSE）显示在每个促进剂下方。星号表示HSF结合所需的关键核苷酸；箭头表示ChIP分析中使用的引物。日志2，日志₂HSF2富集率，表示为测井中条带位置的差异₂规模；变更。，染色体+1，转录起始位点（注意基因是在不同方向转录的）。(B)使用WT睾丸提取物的标准ChIP分析验证ChIP-ChIP筛选。除HSF2的三个非靶向启动子外，对六个选定启动子的HSF2-结合（HSF2）进行分析：*Hsp25.1型*,*Fyn公司*、和*斯帕塔2*. (C)HSF2只在睾丸中占据靶基因。野生型睾丸、脑、肌肉和肾脏中六个靶启动子上HSF2结合（HSF2）的ChIP分析。非特异性抗体（NS）用作阴性对照，乙酰化组蛋白4抗体（AcH4）用作转录活性启动子的指示物。输入表示ChIP分析中使用的总材料的1%。

**图2。**
HSF2是精子发生过程中多拷贝基因表达的转录调节因子。(A类)RT-PCR分析*Hsf2型*,*Ssty2型*,*Sly公司*、和*Slx公司*在WT生精上皮周期的指定阶段进行表达。mRNA的相对数量标准化为*Gapdh公司*在整个生精上皮周期中均匀表达。小鼠生精上皮周期中12个阶段（I-XII）的示意图如下所示。每个阶段由特定的细胞类型集合定义，这些细胞类型根据发育中精子细胞的形态进行分类（21）。(B)全WT基因表达的RT-PCR分析(*Hsf2型*WT）和*Hsf2型*淘汰赛(*Hsf2型*KO）试验。mRNA的相对数量标准化为*Acrv1号机组*/*SP-10标准*。所有PCR均使用至少三个生物重复序列的样本进行重复。误差线表示标准偏差（±SD）。相对表达式是根据*Hsf2型*WT样本，任意设置为1。

**图3。**
HSF2缺乏小鼠的精子头部畸形显著增加。(A类)成人WT的苏木精染色精子涂片分析(*Hsf2型*WT）和*Hsf2型*淘汰赛(*Hsf2型*KO）雄性。不同形态的代表性示例显示在主图中，插图中显示了放大图。（比例尺，10μm）(B)如前所述，精子头部分为正常、轻微异常和严重异常三类（23）。每类精子的数量，从*Hsf2型*重量(n个=4）和*Hsf2型*KO公司(n个=4）雄性小鼠，盲法计算。误差线表示标准偏差（±SD）。

**图4。**
染色质包装蛋白水平改变和DNA片段增加*Hsf2型*淘汰精子。(A类)成年WT附睾尾过渡蛋白2（TNP2）、鱼精蛋白1（PRM1）和鱼精蛋白2（PRM2）水平的Western blot分析(*Hsf2型*WT）和*Hsf2型*淘汰赛(*Hsf2型*KO）小鼠。这些斑点是四个生物重复的典型例子。通过β-微管蛋白和α-肌动蛋白评估等负荷。(B)彗星实验分析DNA损伤。通过电泳分离DNA片段后，成人精子DNAHsf2型WT和*Hsf2型*KO雄性用SYBR绿色染色。图中用白色箭头显示了彗星的代表性示例。（比例尺，10μm）(C)彗星试验分析后，精子DNA损伤阳性率计算如下*Hsf2型*重量(n个=3）和*Hsf2型*KO公司(n个=3）小鼠。误差线表示标准偏差（±SD）。

**图5。**
HSF2在男性特异性Y染色体长臂（MSYq）上占据的示意图。大多数Y染色体基因位于短臂（Yp）上，未发现HSF2靶基因，而MSYq主要包含异染色质和重复序列。图中显示了ChIP-ChIP阵列中所有注释良好的Y染色体基因。请注意，染色体长度和HSF2分子的数量只是说明性的。PAR，假常染色体区域。

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1. Ellis PJ，Afara NA。精子发生和性染色体基因含量：进化观点。Hum Fertil（剑桥），2006年；9:1–7.-公共医学
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[1] Ellis PJ，Afara NA。精子发生和性染色体基因含量：进化观点。Hum Fertil（剑桥），2006年；9:1–7.-公共医学

[2] Ellis PJ，Afara NA。精子发生和性染色体基因含量：进化观点。Hum Fertil（剑桥），2006年；9:1–7.-公共医学

[3] Toure A等。通过Y染色体长臂缺失小鼠的睾丸转录组分析鉴定新的Y染色体编码转录物。基因组生物学。2005;6:R102。-项目管理咨询公司-公共医学

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[5] Sarge KD、Park-Sarge O-K、Kirby JD、Mayo KE、Morimoto RI。小鼠睾丸中热休克因子2的表达：在精子发生过程中作为热休克蛋白基因表达调节器的潜在作用。生物再现。1994;50:1334–1343.-公共医学

[6] Sarge KD、Park-Sarge O-K、Kirby JD、Mayo KE、Morimoto RI。小鼠睾丸中热休克因子2的表达：在精子发生过程中作为热休克蛋白基因表达调节器的潜在作用。生物再现。1994;50:1334–1343.-公共医学

[7] Alastalo T-P等。大鼠生精上皮中热休克因子2亚型的阶段特异性表达和细胞定位。实验细胞研究1998；240分16秒-27秒。-公共医学

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[10] Kallio M等。HSF2基因缺失小鼠的大脑异常、减数分裂染色体联会缺陷和雌性低生育能力。EMBO J.2002；21:2591–2601.-项目管理咨询公司-公共医学

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