Control of differentiation in a self-renewing mammalian tissue by the histone demethylase JMJD3

doi:10.1101/gad.1673508

.2008年7月15日；22(14):1865-70.

doi:10.1101/gad.1673508。

组蛋白脱甲基酶JMJD3对自我更新哺乳动物组织分化的控制

乔治·L·森¹, 丹尼尔·韦伯斯特, 黛博拉一世巴拉根, 霍华德·Y·张, 保罗·A·哈瓦里

附属公司

PMID： 18628393
预防性维修识别码： PMC2492733型
内政部： 10.1101/件1673508

组蛋白脱甲基酶JMJD3对自我更新哺乳动物组织分化的控制

乔治·L·森等。基因开发. 2008.

.2008年7月15日；22(14):1865-70.

doi:10.1101/gad.1673508。

作者

乔治·L·森¹, 丹尼尔·韦伯斯特, 黛博拉一世巴拉根, 霍华德·Y·张, 保罗·A·哈瓦里

附属

¹VA Palo Alto Health Care System，美国加利福尼亚州帕洛阿尔托市，邮编94305。

PMID： 18628393
预防性维修识别码： PMC2492733型
内政部： 10.1101/件1673508

摘要

最近发现的H3K27me3脱甲基酶表明，H3K17me3可能会动态调节基因表达，但这种在哺乳动物组织内稳态中的潜在作用仍未明确。在表皮中，一种平衡干细胞自我更新与分化的组织H3K27me3占据了许多分化基因的启动子。在钙诱导分化过程中，H3K27me3在这些启动子处被清除，同时PcG蛋白占有率降低，H3K27me3脱甲基酶JMJD3的结合增加。在表皮组织中，JMJD3缺失阻断了分化，而活性JMJD3主要诱导分化。这些结果表明JMJD3的表观遗传去表达控制着哺乳动物的表皮分化。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
表皮分化过程中基因组启动子H3K27me3富集的全局分析。(A类)富含H3K27me3标记的启动子的基因本体（GO）分析。黑条表示在某一GO类别中观察到的H3K27me3富集位点的百分比；灰色条表示预期的百分比。*P（P）*-使用超几何分布获得值。(B类)表皮分化基因的分类。这个左边图中显示了富含H3K27me3的表皮分化基因的数量。这个*正确的*该图显示了在分化过程中失去甲基化的富含H3K27me3的分化基因的数量。(C类)基因组平铺阵列上的H3K27me3富集率，比较在生长培养基（−钙）或分化培养基（+钙）中培养的细胞中所有探针的个体分化基因启动子。下面的箭头*IVL公司*该图表示一个替代的转录起始位点。

**图2。**
JMJD3与表皮分化基因的启动子结合。(A类)使用H3K27me3、SUZ12或JMJD3抗体对三个分化基因的启动子进行ChIP，*KRT1公司*,*2008年10月*、和*IVL、，*在没有或有钙的情况下。*SFRP4系统*用作H3K27me3结合的阳性对照。(B类)无钙或有钙条件下分化基因mRNA水平的QPCR分析。(C类)Western blot描绘了无钙或有钙条件下生长的角质形成细胞中JMJD3、SUZ12、H3K27me3和H3K9me3的水平。肌动蛋白被用作加载控制。

**图3。**
JMJD3是表皮分化所必需的。(A类)用接受抗JMJD3 siRNA（JMJD3i）或无功能对照siRNA（CTL）的表皮细胞在器官型培养中再生人类真皮上的表皮组织。组织切片染色以确定是否存在角蛋白1（K1）和角蛋白10（K10）。VII型胶原蛋白（绿色）被用作内涂层，标记表皮和真皮之间的边界。注意JMJD3缺失导致分化特异性角蛋白的丢失。(B类)通过QPCR分析定量组织mRNA水平，标准化为*GAPDH公司*.

**图4。**
JMJD3可诱导表皮早期分化。(A类)使用用于空载体控制的逆转录病毒表达构建物JMJD3和JMJD3 H1390A脱甲基酶缺陷点突变体转导角朊细胞，并在低钙条件下生长。转导后5天从样品中分离RNA，并使用QPCR测定表皮分化基因的去表达水平。(B类)在第2天、第3天和第4天采集表达JMJD3和对照再生器官型组织，以确定JMJD3表达对分化的影响。对组织切片进行角蛋白1和角蛋白10染色。注意分化蛋白的早期表达及其在组织工程表达JMJD3的组织中更靠近表皮基底膜的定位。(C类)表皮分化的表观遗传控制模型。

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