Sumo-1 function is dispensable in normal mouse development

doi:10.1128/MCB.00651-08

.2008年9月；28(17):5381-90.

doi:10.1128/MCB.00651-08。 Epub 2008年6月23日。

Sumo-1功能在正常小鼠发育中是不可或缺的

张福平¹, 劳拉·米科宁, 乔玛·托帕里, 乔玛·帕尔维莫, 伊尔玛·塞斯勒夫, 奥利·阿贾纳

附属公司

PMID： 18573887
预防性维修识别码：项目经理2519746
内政部： 10.1128/MCB.00651-08

Sumo-1功能在正常小鼠发育中是不可或缺的

张福平等。分子细胞生物学. 2008年9月.

.2008年9月；28(17):5381-90.

doi:10.1128/MCB.00651-08。 Epub 2008年6月23日。

作者

张福平¹, 劳拉·米科宁, 乔玛·托帕里, 乔尔马·J·帕尔维莫, 伊尔玛·塞斯勒夫, 奥利·A·Jänne

附属

¹赫尔辛基大学生物医学（生理学）研究所，赫尔辛基生物医学，邮政信箱63（Haartmanikatu 8），FI-00014赫尔辛基，芬兰。

PMID： 18573887
预防性维修识别码：项目经理2519746
内政部： 10.1128/MCB.00651-08

摘要

为了阐明SUMO-1在体内的功能，我们通过同源重组靶向小鼠SUMO-1基因的最后三个外显子。杂合子中的Sumo-1 mRNA丰度降低到一半，在Sumo-1（-/-）小鼠中检测不到，而在野生型小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）中检测到Sumo-1-共轭RanGAP1，但在Sumo-1MEF中未检测到，这表明基因靶向产生了Sumo-1空小鼠。Sumo-1 mRNA在野生型小鼠的所有组织中均有表达，其丰度在睾丸、大脑、肺和脾脏中最高。Sumo-2和Sumo-3 mRNA也在所有组织中表达，但其丰度在Sumo-1缺失小鼠中没有上调。在没有Sumo-1的情况下，睾丸的发育和功能是正常的，而Sumo-1（-）（/）（-）小鼠的雌雄都可以存活和繁殖。与之前的报告（F.S.Alkuraya等人，《科学》313:17512006）相比，我们没有观察到Sumo-1靶向小鼠的胚胎或出生后早期死亡；胚胎和21日龄小鼠的基因型符合预测的孟德尔比率，Sumo-1（+/-）或Sumo-1的胚胎在唇腭发育方面没有缺陷。Sumo-1（-/-）MEF分化为脂肪细胞的能力与野生型MEF没有差异。总之，我们的结果支持这样的观点，即SUMO-2和SUMO-3在体内补偿了SUMO-1的大部分功能（如果不是全部的话）。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
有针对性地中断*相扑-1*基因。（A）替换靶向载体以删除*相扑-1*。用于筛选同源重组体和基因型的PCR引物的大致位置如箭头所示，以及同源重组后基因的原始和预测结构。还描述了用于Southern印迹的探针3的位置。（B） SUMO-1的氨基酸序列。颜色编码是指由不同外显子编码的区域*相扑-1*.可能由靶向基因编码的29氨基酸长肽的序列*相扑-1*基因如下所示。（C）阳性ES克隆被发现含有*相扑-1*通过使用面板A中显示的引物Neo1和SUMO-1、P2进行PCR筛选。（D）基因组DNA从两个野生型ES克隆（WT）和一个具有代表性的ES克隆中分离出来，其中ES克隆具有同源重组*相扑-1*（KO），用HindIII消化，并通过Southern印迹分析。3.2kb和8.6kb条带的存在表明存在同源重组。（E）野生型（+/+）、杂合型（+/-）和*相扑-1*-带有特异性探针的缺陷（−/−）小鼠*相扑-1*和*α-肌动蛋白*信使核糖核酸。这个*相扑-1*cRNA探针对应于*相扑-1*mRNA，从而从第1外显子的3′端延伸到*相扑-1*基因。

**图2。**
野生型an小鼠的出生后生长率*相扑-1*-使鼠标无效。在12个月的时间里，记录了雄性（A）和雌性（B）同窝婴儿的体重。每个基因型至少有六只雄性和雌性小鼠。野生型，+/+；*相扑1号*^−/−, −/−. 显示了平均值（SEM）的平均值±标准误差。

**图3。**
*相扑-1*和*相扑2/3*野生型和*相扑-1*^−/−老鼠。（A） RNA印迹分析*相扑-1*信使核糖核酸和*相扑2/3*成人野生型（+）和*相扑-1*⁻^/⁻（-）小鼠。底部面板描述了相应样本中的28S和18S rRNA。（B）定量RT-PCR分析*相扑-1*,*相扑-2*，以及*相扑-3*成年小鼠睾丸中的mRNA丰度。这些值通过以下标准化*工作bscr1*mRNA水平，结果表示为三个样本的平均±SEM值。平均野生型值为1.0。

**图4。**
MEF和野生型睾丸裂解液中缺乏SUMO-1结合蛋白和游离SUMO-1相扑1号-使鼠标无效。细胞裂解液中的蛋白质在变性条件下通过4至20%聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳分离，并转移到硝化纤维素膜上。面板A至C显示带有抗SUMO-1抗体（A）、抗SUMO-2抗体（B）和抗VP16抗体（C）的免疫印迹（IB）。在面板A中，与主免疫印迹相比，暴露时间延长10倍后，窄条显示出游离SUMO-1区域。抗β-微管蛋白IB在每种情况下都显示出来进行比较。星号表示对应于sumoylated RanGAP1的～90-kDa带；箭头标记自由SUMO-1，箭头标识自由SUMO-2。

**图5：。**
野生型和野生型SUMO-1、SUMO-2和RanGAP1蛋白的免疫印迹分析*相扑-1*^−/−MEF公司。（A和B）野生型和*相扑-1*^−/−使用抗SUMO-1抗体（A）或抗SUMO-2抗体（B）生成MEF。用抗SUMO-1抗体（C）或抗SUMO-2抗体（D）免疫沉淀（C和D）MEF裂解物，然后通过12%SDS凝胶电泳分离抗体-抗原复合物，并用抗RanGAP1抗体免疫印迹。免疫印迹法；IP，免疫沉淀。RanGAP1的分子量为～70 kDa（箭头），磺酰化RanGAP1的分子量为～90 kDa（箭头）。

**图6。**
E18.5处野生型和纯合胚胎腭部的腹视图。在野生型（A）和*相扑-1*^−/−（B）胚胎。组织切片证实腭完全闭合*相扑-1*杂合子（C）和纯合子胚胎（D）。箭头表示两个腭架融合的腭中线。

**图7。**
野生型和非野生型脂肪细胞分化*相扑1号*^−/−MEF公司。到达汇合处两天后，MEF被诱导分化为脂肪细胞。（A）诱导后10天用油红染色。从四个培养皿中随机选择的八个培养皿进行脂肪细胞计数，野生型和野生型的脂肪细胞数分别为515±125（SEM）和467±23（SEM相扑-分别为空MEF。（B）的级别*PPAR（购电协议）*γ和*aP2型*脂肪细胞中的mRNA从野生型和*相扑-1*^−/−MEF公司。“对照组”是指在没有分化培养基的情况下培养的MEF。这些值通过以下标准化*Gapdh公司*mRNA水平，结果表示为三个样本的平均值±SEM值。

**图8。**
野生型（A、C、E和G）睾丸中SUMO-1（A、B、E和F）和SUMO-2/3（C、D、G和H）抗原的免疫组织化学分析*相扑-1*^−/−（B、D、F和H）小鼠在10天龄（10天）和成年期（成年）。XY体由精上皮小管内的深棕色斑点表示。棒，50μm。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

小鼠中SUMO1的缺失会影响RanGAP1的定位和PML核小体的形成，但并不是致命的，因为它可以被SUMO2或SUMO3补偿。
Evdokimov E、Sharma P、Lockett SJ、Lualdi M、Kuehn MR。 Evdokimov E等人。细胞科学杂志。2008年12月15日；121（第24部分）：4106-13。doi:10.1242/jcs.038570。Epub 2008年11月25日。细胞科学杂志。2008 PMID：19033381
SUMO2对小鼠胚胎发育至关重要，而SUMO3则是不可或缺的。
王磊，万斯利本·C，赵S，苗P，帕申·W，杨伟。王磊等。 EMBO代表2014年8月；15(8):878-85. doi:10.15252/embr.201438534。Epub 2014年6月2日。 2014年EMBO代表。 PMID：24891386 免费PMC文章。
通过对人类敲除细胞系和基因表达数据的系统分析，揭示了SUMO的旁系特异性功能。
Bouchard D、Wang W、Yang WC、He S、Garcia A、Matunis MJ。 Bouchard D等人。分子生物学细胞。2021年9月1日；32(19):1849-1866. doi:10.1091/mbc。E21-01-0031。Epub 2021年7月7日。分子生物学细胞。2021 PMID：34232706 免费PMC文章。
去氨酰化酶——SENPs。
拖曳M，Salvesen GS。 Drag M等人。 IUBMB寿命。2008年11月；60(11):734-42. doi:10.1002/iub.113。 IUBMB寿命。2008 PMID：18666185 审查。
SUMO——非经典泛素。
梅尔基奥尔·F。梅尔基奥尔·F。年收入细胞开发生物。2000;16:591-626. doi:10.1146/annurev.cellbio.16.1.591。年收入细胞开发生物。2000 PMID：11031248 审查。

查看所有类似文章

引用人

SUMO修饰GβL并介导mTOR信号传导。
Park SLL、Ramírez Jarquín UN、Shahani n、Rivera O、Sharma M、Joshi PS、Hansalia A、Dagar S、McManus FP、Thibault P、Subramaniam S。 Park SLL等人。生物化学杂志。2024年4月；300(4):105778. doi:10.1016/j.jbc.2024.105778。Epub 2024年2月21日。生物化学杂志。2024 PMID：38395307 免费PMC文章。
SUMO1和SUMO2/3在蛋白质质量控制和相关疾病中的副作用。
王伟，马图尼斯·乔丹。王伟等。细胞。2023年12月20日；13(1):8. doi:10.3390/cells13010008。细胞。2023 PMID：38201212 免费PMC文章。审查。
脾脏SUMO1控制实验性脓毒症的全身炎症。
Youssef A、Mohammed BK、Prasad A、Del Aguila A、Bassi G、Yang W、Ulloa L。 Youssef A等人。前免疫。2023年7月13日；14:1200939. doi:10.3389/fimmu.2023.1200939。电子收集2023。前免疫。2023 PMID：37520526 免费PMC文章。
在结肠癌中，SUMO1降解物通过TCF4的去SUMO化及其对StarD7转录的抑制来诱导ER应激和ROS积累。
赵YQ、Jin HR、Kim D、Jung SH、Liu S、Wan J、Lo HY、Fu XQ、Wang Q、Hao C、Bellail AC。赵玉强等。霉菌致癌。2023年9月；62(9):1249-1262. doi:10.1002/mc.23560。Epub 2023年5月16日。霉菌致癌。2023 PMID：37191369 免费PMC文章。
健康和疾病中的蛋白质翻译后修饰：功能、调节机制和治疗意义。
钟Q，肖X，邱Y，徐Z，陈C，冲B，赵X，海S，李S，安Z，戴L。钟强等。 MedComm（2020年）。2023年5月2日；4（3）：e261。doi:10.1002/mco2.261。eCollection 2023年6月。 MedComm（2020年）。2023 PMID：37143582 免费PMC文章。审查。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Alarcon-Vargas，D.和Z.Ronai。2002.癌症患者需要SUMO。癌症生物学。疗法。1237-242.-公共医学
1. Al-Khoial，F.、T.Enoch、I.M.Hagan和A.M.Carr。波贝裂殖酵母hus5基因编码正常有丝分裂所需的泛素结合酶。细胞科学杂志。108475-486之间。-公共医学
1. Alkuraya、F.S.、I.Saadi、J.J.Lund、A.Turbe Doan、C.C.Morton和R.L.Maas。2006年。SUMO1单倍体不足导致唇腭裂。科学3131751。-公共医学
1. Azuma，Y.、A.Arnaoutov、T.Anan和M.Dasso。PIASy介导有丝分裂染色体上拓扑异构酶-II的SUMO-2结合。EMBO期刊242172-2182。-项目管理咨询公司-公共医学
1. 阿祖玛、Y.、A.Arnaoutov和M.Dasso。SUMO-2/3在有丝分裂中调节拓扑异构酶II。《细胞生物学杂志》。163477-487.-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

物质

行动
行动
行动
行动
行动
行动

LinkOut-更多资源

[1] Alarcon-Vargas，D.和Z.Ronai。2002.癌症患者需要SUMO。癌症生物学。疗法。1237-242.-公共医学

[2] Alarcon-Vargas，D.和Z.Ronai。2002.癌症患者需要SUMO。癌症生物学。疗法。1237-242.-公共医学

[3] Al-Khoial，F.、T.Enoch、I.M.Hagan和A.M.Carr。波贝裂殖酵母hus5基因编码正常有丝分裂所需的泛素结合酶。细胞科学杂志。108475-486之间。-公共医学

[4] Al-Khoial，F.、T.Enoch、I.M.Hagan和A.M.Carr。波贝裂殖酵母hus5基因编码正常有丝分裂所需的泛素结合酶。细胞科学杂志。108475-486之间。-公共医学

[5] Alkuraya、F.S.、I.Saadi、J.J.Lund、A.Turbe Doan、C.C.Morton和R.L.Maas。2006年。SUMO1单倍体不足导致唇腭裂。科学3131751。-公共医学

[6] Alkuraya、F.S.、I.Saadi、J.J.Lund、A.Turbe Doan、C.C.Morton和R.L.Maas。2006年。SUMO1单倍体不足导致唇腭裂。科学3131751。-公共医学

[7] Azuma，Y.、A.Arnaoutov、T.Anan和M.Dasso。PIASy介导有丝分裂染色体上拓扑异构酶-II的SUMO-2结合。EMBO期刊242172-2182。-项目管理咨询公司-公共医学

[8] Azuma，Y.、A.Arnaoutov、T.Anan和M.Dasso。PIASy介导有丝分裂染色体上拓扑异构酶-II的SUMO-2结合。EMBO期刊242172-2182。-项目管理咨询公司-公共医学

[9] 阿祖玛、Y.、A.Arnaoutov和M.Dasso。SUMO-2/3在有丝分裂中调节拓扑异构酶II。《细胞生物学杂志》。163477-487.-项目管理咨询公司-公共医学

[10] 阿祖玛、Y.、A.Arnaoutov和M.Dasso。SUMO-2/3在有丝分裂中调节拓扑异构酶II。《细胞生物学杂志》。163477-487.-项目管理咨询公司-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

Sumo-1功能在正常小鼠发育中是不可或缺的

附属

Sumo-1功能在正常小鼠发育中是不可或缺的

作者

附属

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

分子生物学数据库

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

分子生物学数据库