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.2008年6月；9(6):582-9.
doi:10.1038/embor.2008.74。 Epub 2008年5月16日。

ZEB1和miR-200家族成员之间的相互抑制促进肿瘤细胞的EMT和侵袭

乌尔里克·伯克 1, 约格·舒伯特, 乌尔里希·韦纳, 奥托·施马尔霍弗, 伊丽莎白·文森, 西蒙·斯帕德纳, 托马斯·布拉伯茨
附属公司

ZEB1和miR-200家族成员之间的相互抑制促进肿瘤细胞的EMT和侵袭

乌尔里克·伯克等。 EMBO代表. 2008年6月.

摘要

胚胎计划“上皮-间充质转化”（EMT）被认为可以促进恶性肿瘤的进展。转录阻遏物锌指E盒结合同源异型盒1（ZEB1）是多种人类肿瘤中EMT的关键诱导剂，最近被证明可以促进肿瘤细胞的侵袭和转移。在这里，我们报道ZEB1直接抑制microRNA-200家族成员miR-141和miR-200c的转录，这强烈激活胰腺癌、结直肠癌和乳腺癌细胞的上皮分化。值得注意的是，EMT激活物转化生长因子β2和ZEB1是这些微RNA下调的主要靶点。这些结果表明，ZEB1触发了一个microRNA-介导的前馈回路，稳定EMT并促进癌细胞的侵袭。或者，根据环境触发因素，这个环路可能会切换并诱导上皮分化，从而解释了在许多人类癌症中观察到的强烈肿瘤内异质性。

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数字

图1
图1
敲除ZEB1可增强microRNA的表达。用于microRNA（miRNA）表达阵列筛选的乳腺癌（MDA-MB231）和结直肠癌（SW480和HCT116）细胞系的特征短发夹控制（shCtl）和shZEB1敲除克隆的E-cadherin和β-catenin的生长模式和染色。显示了每两个克隆的平均相对ZEB1表达水平。显示了平均miRNA表达值（每个细胞系中每两个独立的sh对照或shZEB1克隆的两次杂交）。敲除ZEB1导致所有三种细胞系中指示的miRNAs上调。ZEB1，锌指电子盒绑定同源盒1。
图2
图2
ZEB1直接抑制miR-141和miR-200c的转录。(A类)染色体12p13.31上hsa-miR-141和hsa-miR-200c的基因组组织示意图，以及高度保守的Z盒和E盒的对齐。指出了ZEB1结合位点、克隆的启动子和间隔区序列以及ChIP的扩增区域。所有数字都是相对于hsa-miR-200c干-环序列的开始。(B类)左图：在指示的未分化大肠（SW480）、乳腺（MDA-MB231）和胰腺（Panc-1）细胞克隆中稳定的ZEB1敲除增强了假定启动子的活性，但没有或仅微弱地增强了间隔序列的活性。相应的短发夹控制（shCtl）克隆的平均值设置为1。中间面板：HCT116细胞中ZEB1和Snai1的过度表达以剂量依赖的方式抑制启动子的活性，但不抑制间隔序列。启动子的绝对转录活性比间隔序列的活性高55倍。右面板：Z盒突变（mut）使启动子对ZEB1的抑制不太敏感。(C类)利用ZEB1重组DNA-结合域或SW480结直肠癌细胞核提取物（右图）和所示标记探针进行电迁移分析。两个保守Z盒（Z1，Z2）的突变强烈降低了特异性结合复合物（星号）。三种不同的抗ZEB1抗血清（非对照血清）超移（箭头）一种特殊的复合物（星号），该复合物在突变探针中缺失，表明它含有ZEB1。白细胞介素-2启动子（NRE）已知的ZEB1结合位点被用作阳性对照。(D类)具有两种不同ZEB1抗血清的ChIP显示体内ZEB1与所示结直肠癌细胞系中假定启动子的结合。ChIP，染色质免疫沉淀；甘油醛-3-磷酸脱氢酶；野生型；ZEB1，锌指电子盒绑定同源盒1。
图3
图3
miR-141和miR-200c诱导间充质-上皮转化。(A类)未分化癌细胞系中两种microRNAs（miRNAs）的过度表达可诱导间充质-上皮转化，表现为E-cadherin（绿色）的上调、E-cadherin的部分膜性移位和基底-顶端极性的恢复（见z模式）。miR-200c的作用更强，与ZEB1基因敲除的作用相当。(B类)上面板：miR-200c抑制MDA-MB231细胞的迁移。下面板：Matrigel侵入分析的图片和量化。miR-200c转染强烈抑制了MDA-MB231对Matrigel的侵袭，与短干扰（si）RNA介导的ZEB1敲除类似。(C类)转染miR-141和miR-200c的miRNA抑制剂的分化癌细胞株显示细胞散射增加、波形蛋白（HPAF2）上调或E-cadherin（DLD1）表达降低。相反，稳定敲除ZEB1（SW480-shZEB1）诱导的上皮表型不能被miRNA抑制剂逆转。sh，短发夹；ZEB1，锌指电子盒绑定同源盒1。
图4
图4
miR-141和miR-200c减少促进上皮-间质转化和侵袭的因子的表达。(A类)预测TGFβ2 3′UTR与miR-141干环的双重形成，以及两个ZEB1 3′UTR区与miR-200c干环的双相形成。推测的识别位点在不同物种中高度保守。(B类)实时反转录–在未分化癌细胞中转染指示的miRNA或短干扰（si）RNA后，对各种可能的靶因子进行PCR。注意到miR-141转染后TGFβ2表达的最强降低和miR-200c转染后ZEB1的最强降低。(C类)通过免疫印迹法确认蛋白质水平的结果。(D类)荧光素酶报告子分析显示，与shCtl克隆相比，所示SW480短发夹ZEB1（shZEB1）克隆中的3′UTR-荧光素酶报告子结构活性降低，miR-141和miR-200c水平增加。(E类)SW480细胞中miR-141和miR-200c的过度表达分别导致TGFβ2 3′UTR-荧光素酶和ZEB1 3′UTR荧光素酶结构体的活性降低。(F类)连接ZEB1和抵消miRNAs，特别是miR-200c的前馈回路模型。当ZEB1和两个miRNAs相互抑制时，它们在一个前馈回路中相连。根据初始信号，这个环路可以稳定间充质或上皮分化。在肿瘤中，环境TGFβ可以触发ZEB1的上调，促进肿瘤细胞中的自我增强环，最终导致EMT和侵袭。一旦最初的信号中断，环路可能会诱导上皮表型的逆转。这可能解释了单个肿瘤和转移瘤中常见的强烈表型异质性。EMT，上皮-间质转化；MET，间充质-上皮转化；miRNA，microRNA；转化生长因子；UTR，非翻译区；ZEB1，锌指电子盒结合同源盒1。
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中的注释

  • 癌细胞侵袭中的新调节环。
    俄亥俄州奥卡尼亚，马萨诸塞州尼托。 Ocaña OH等人。 EMBO代表，2008年6月；9(6):521-2. doi:10.1038/embor.2008.84。Epub 2008年5月16日。 2008年EMBO代表。 PMID：18483485 免费PMC文章。 没有可用的摘要。

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    1. Attoub S、Noe V、Pirola L、Bruyneel E、Chastre E、Mareel M、Wymann MP、Gespach C（2000）瘦素通过磷脂酰肌醇3-激酶、rho-和rac-依赖性信号通路促进肾和结肠上皮细胞的侵袭性。第14页：2329–2338-公共医学
    1. Barrallo-Gimeno A，Nieto MA（2005）《蜗牛基因作为细胞运动和存活的诱导物：在发育和癌症中的意义》。开发132:3151–3161-公共医学
    1. Bartel DP（2004）《微RNA：基因组学、生物发生、机制和功能》。手机116:281–297-公共医学
    1. Bates RC、Bellovin DI、Brown C、Maynard E、Wu B、Kawakatsu H、Sheppard D、Oettgen P、Mercurio AM（2005）上皮-间质转化期间整合素β6的转录激活定义了侵袭性结肠癌的新预后指标。临床研究杂志115:339–347-项目管理咨询公司-公共医学

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