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.2008年7月;153(1):86-95。
doi:10.1111/j.1365-2249.2008.03677.x。 Epub 2008年5月5日。

细胞内钙信号传导模式反映人类T细胞的分化状态

附属公司

细胞内钙信号模式反映了人类T细胞的分化状态

H P箭头等。 临床实验免疫学. 2008年7月.

摘要

刺激T淋巴细胞导致大量基因的钙依赖性激活和抑制。然而,不同T细胞亚群的功能反应是异质的,因为它们的分化导致其对激活的敏感性和细胞因子分泌的改变。在这里,我们研究了CD4和CD8 T细胞亚群中的钙反应模式,以帮助解释它们对激活的不同反应。刚从人血液中分离出来的CD4(+)CD45RA(+)T细胞在刺激后发出持续的钙信号,但这比CD4(+CD45RO(+)细胞发出的钙信号小。在体外将CD4(+)CD45RA(+)细胞分化为CD45RO(+)时,胞浆钙反应水平最初升高,但随后在进一步的分化过程中稳步下降。产生振荡钙反应或无反应的比例增加,分化伴随着细胞内钙池之间的钙转移。CD8(+)T细胞比配对CD4(+)T细胞产生的钙反应更小,并且在发出短暂而非持续钙信号的细胞数量上存在差异。CD4(+)CD45RO(+)群体中振荡细胞的增加可能反映了该群体的异质性,特别是在细胞因子产生方面。T细胞分化过程中钙反应的变化模式可以解释细胞在其寿命的不同阶段对活化反应的变化,并强调钙信号的数量和质量在决定T细胞活化结果中的重要性。

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数字

图1
图1
CD45RO中钙反应的大小和模式不同+和CD45RA+从外周血中分离出的T细胞。(a) CD4细胞+CD45RA+和CD4+CD45RO+从同一供体的外周血中分离出T细胞,负载Indo-1,并对用荧光计获得的10μg/ml植物血凝素(PHA-P)产生钙反应,细胞悬浮。显示了来自六个不同捐赠者的配对数据,并绘制了凝集素引起的基线和最大值之间的上升。(b) CD4细胞+CD45RA+和CD4+CD45RO+从同一供体的PB中分离出T细胞,加载Fura-2和10μg/ml PHA-P在长达20分钟的时间内成像的钙反应。对于每个供体,在每个群体的不同细胞上重复两到三次。每个细胞被单独分析,并分配到四种钙模式中的一种(峰值-平台、振荡、瞬时或无反应)。所示为三位捐赠者的结果;每次分析每种类型的70到270个细胞。显示的数据来自447 CD45RA+细胞和649 CD45RO+细胞。
图2
图2
植物血凝素(PHA-P)的表型和钙反应随着CD4的改变而改变+T细胞与CD45RA分化+至CD45RO+CD4的起始人群+CD45RA+在42天的培养期内,每隔14天用PHA反复刺激T细胞,并在每次再刺激前评估细胞表型和钙反应。(a) CD45亚型CD45RA、CD45RB和CD45RO的表达来自三个独立实验的一个代表性示例。(b) 分化培养中每个时间点的钙峰值升高如图所示(n个= 3).
图3
图3
在长期CD4的不同阶段,每种钙反应类型的比例不同+T细胞培养。图中显示了在给定培养日受刺激和分析的所有细胞的比例,给出了不同的钙反应模式。结果代表从三种不同培养物中提取的细胞(第42天仅代表一种培养物)。每个培养日期的结果都是通过对培养群体中不同样本细胞的五到八次单独刺激的反应进行聚合而得到的。共检测了6946个培养的T细胞(第1天3205个,第14天1261个,第28天2131个,第42天349个)。
图4
图4
细胞内钙池在长期CD4的不同阶段发生改变+T细胞培养。如图2和图3所示,在培养的细胞中评估了细胞内池中钙的释放。钙反应用钙评估2+-如前所述,通过依次加入植物血凝素、thapsigargin和离子霉素获得游离培养基[19]。离子霉素反应没有随时间变化,因此为了清楚起见,省略了。
图5
图5
[加利福尼亚州2+]CD8对植物血凝素(PHA-P)的反应信号较低+比CD4中的+T细胞。从同一供体新鲜分离的CD4和CD8 T细胞被加载Indo-1,并在荧光计中评估钙对PHA-P的反应。(a) CD4的典型反应+和CD8+图中显示了三个捐赠者之一的T细胞。(b) 显示了来自三个不同捐赠者的配对数据,并绘制了CD4和CD8 T细胞中PHA-P引起的基线和最大值之间的上升。
图6
图6
外周血CD4钙反应模式不同+和CD8+从外周血中分离出的T细胞。(a) CD4细胞+和CD8+从同一供体的外周血中分离出T细胞,并对植物血凝素(PHA-P)的反应进行成像。在四个供体的每种细胞类型上重复两到四次。共评估了1078个CD4和734个CD8 T细胞。(b) CD8(CD8)+CD45RA+和CD4+CD45RA+从同一供体中分离出T细胞。每个细胞制备过程中,至少要对四个区域的细胞进行评估,并与三个不同的供体进行重复。总计2671 CD8+CD45RA+和2493 CD4+CD45RA+对T细胞进行评估。

类似文章

引用人

  • 细胞内钙动力学对T细胞抗原特异性的机器学习预测。
    这位是S,Costantino S,Melichar HJ。 本S等人。 《科学进展》2024年3月8日;10(10):eadk2298。doi:10.1126/sciadv.adk2298。Epub 2024年3月6日。 科学进展2024。 PMID:38446885 免费PMC文章。
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工具书类

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