Granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF) augments acute lung injury via its neutrophil priming effects

doi:10.3346/jkms.2008.23.2.288

.2008年4月；23(2):288-95.

doi:10.3346/jkms.2008.23.2.288。

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）通过其中性粒细胞启动作用增强急性肺损伤

Jae Chol Choi先生¹, Jae Woo Jung先生, Hee Won Kwak先生, 宋菊涵, Eun Ju Jeon公司, Jong Wook Shin先生, In Won公园, Byoung Whui Choi先生, 金在耀（Jae Yeol Kim）

附属公司

PMID： 18437014
预防性维修识别码： PMC2526424型
内政部： 10.3346/jkms.2008.23.2.288

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）通过其中性粒细胞启动作用增强急性肺损伤

Jae Chol Choi先生等。韩国医学科学杂志. 2008年4月.

.2008年4月；23(2):288-95.

doi:10.3346/jkms.2008.23.2.288。

作者

Jae Chol Choi先生¹, Jae Woo Jung先生, Hee Won Kwak先生, 居汉松, Eun Ju Jeon公司, Jong Wook Shin先生, In Won公园, Byoung Whui Choi先生, 金在镕

附属

¹韩国首尔市东贾克区香溪洞224-1号忠安大学医学院内科。

PMID： 18437014
预防性维修识别码： PMC2526424型
内政部： 10.3346/jkms.2008.23.2.288

摘要

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）具有免疫刺激作用。我们假设GM-CSF在脂多糖（LPS）和出血诱导的急性肺损伤（ALI）中起重要作用。我们还假设GM-CSF通过启动中性粒细胞来增强LPS诱导的炎症。通过LPS注射或出血在GM-CSF-/-或对照C57BL小鼠中诱导ALI。ALI后评估肺部炎症（通过肺部肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、巨噬细胞炎症蛋白-2（MIP-2）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）和角质细胞衍生趋化因子的表达）和肺损伤（通过髓过氧化物酶和伊文思蓝染色法）。向骨髓中性粒细胞中添加递增剂量的LPS（0、1、10和100 ng/mL）和GM-CSF（0、1,10和100 ng/mL）。用酶联免疫吸附试验评估TNF-α、MIP-2和IL-1β的表达。分别通过逆转录聚合酶链反应和电泳迁移率转移测定来评估三种细胞因子的mRNA表达和核因子κB（NF-κB）的核转位。GM-CSF-/-小鼠在LPS或出血后表现出中性粒细胞浸润减少、渗漏减少和肺部细胞因子表达降低。GM-CSF增加了LPS诱导的TNF-α、MIP-2和IL-1β的蛋白和mRNA表达，这是由NF-κB核内易位增加介导的。GM-CSF在大剂量LPS和出血诱导的ALI中起重要作用，这似乎是通过其对中性粒细胞的启动作用介导的。

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数字

图1
注射LPS或出血后，GM-CSF-/-小鼠肺部中性粒细胞浸润减少。GM-CSF-/-小鼠和对照C57BL小鼠经腹膜注射低或高剂量LPS（分别为0.5 mg/kg或5 mg/kg）。注射LPS或出血后4小时，处死小鼠，用MPO法检测肺中性粒细胞浸润。每组由五只小鼠组成。GM-/-、GM-CSF基因敲除小鼠；C57、C57BL对照小鼠；嗯，出血；LPS 0.5，LPS 0.5 mg/kg i.p。；LPS 5，LPS 5 mg/kg i.p。^*，第页<0.05。

图2
GM-CSF-/-小鼠对LPS注射或出血后的肺渗漏具有抵抗力。向GM-CSF-/-小鼠或对照C57BL小鼠腹腔注射低或高剂量LPS（分别为0.5 mg/kg和5 mg/kg）。注射LPS或出血后3小时，将Evans蓝色染料（50 mg/kg）注射到尾静脉。注射染料一小时后，处死小鼠并取出肺部。通过甲酰胺提取法从切除的肺中提取EBD。每组由五只小鼠组成。GM-/-、GM-CSF基因敲除小鼠；C57、C57BL对照小鼠；Hmr，出血；LPS 0.5、LPS 0.5 mg/kg腹腔注射。；LPS 5，LPS 5 mg/kg i.p。^*，第页<0.05。

图3
注射LPS后，GM-CSF-/-小鼠肺部TNF-α、MIP-2和IL-1β水平降低。GM-CSF-/-小鼠和对照C57BL小鼠经腹膜注射低或高剂量LPS（分别为0.5 mg/kg或5 mg/kg）。注射LPS后4h处死小鼠，用ELISA法检测肺组织中TNF-α、MIP-2和IL-11β的表达。每组由五只小鼠组成。^*，第页<0.05。

图4
GM-CSF-/-小鼠出血后肺部KC、IL-6和IL-1β水平降低。出血后4小时，处死小鼠，并通过ELISA评估肺样品中KC、IL-6和IL-1β的表达。每组由五只小鼠组成。^*，第页<0.05。

图5
GM-CSF增强小鼠骨髓中性粒细胞中TNF-α、MIP-2和IL-1β的表达。对照小鼠骨髓中性粒细胞（5×10⁵/用GM-CSF（0、1、10和100 ng/mL）和LPS（0、1,10和100 ng/mL）联合处理。用GM-CSF和/或LPS刺激4小时后，收集上清液，并用ELISA评估TNF-α、MIP-2和IL-1β的表达。这个实验独立进行了三次，显示的数据是平均值。^*，第页<0.05

图6
GM-CSF增强LPS诱导的小鼠骨髓中性粒细胞TNF-α、MIP-2和IL-1βmRNA表达。将LPS（100 ng/mL）和GM-CSF增量浓度（0、1、10和100 ng/mL）添加到对照小鼠（1×10）的骨髓中性粒细胞中⁶/微型管）。一小时后，将微管在4℃下离心12000 g，收集总RNA。RT-PCR检测TNF-α、MIP-2和IL-1β的mRNA表达。这个实验独立进行了三次，显示的数据是平均值。LPS 100，LPS 100纳克/毫升；LPS 100/GM1，LPS 100 ng/mL+GM-CSF 1 ng/mL；LPS 100/GM10，LPS 100 ng/mL+GM-CSF 10 ng/mL；LPS 100/GM100，LPS 100 ng/mL+GM-CSF 100 ng/mL。^*，第页<0.05。

图7
GM-CSF增强LPS诱导的小鼠骨髓中性粒细胞NF-κB的核转位。将分离的中性粒细胞分配到1.5mL微管中（10⁷细胞/管）。向对照小鼠的骨髓中性粒细胞中添加LPS（100 ng/mL）和递增浓度的GM-CSF（0、1、10和100 ng/mL）。1小时后，在12000 g和4℃下离心微管，提取核蛋白用于EMSA。上图和下图是三个独立实验的代表。GM、GM-CSF。

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1. Weisbart RH、Golde DW、Clark SC、Wong GG、Gasson JC。人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子是一种中性粒细胞激活剂。自然。1985;314:361–363.-公共医学
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