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.2008年6月15日;171(1):78-86.
doi:10.1016/j.jneumeth.2008.02.014。 Epub 2008年3月2日。

CB1受体的特异性检测;大麻素CB1受体抗体并非所有产生的抗体都相同!

附属机构

CB1受体的特异性检测;大麻素CB1受体抗体并非所有产生的抗体都相同!

娜塔莎·L·格里姆西等。 神经科学方法杂志. .

摘要

神经组织和细胞中内源性大麻素CB1受体蛋白的研究依赖于高度特异性抗体的可用性。我们测试了一系列CB1抗体检测脑内内源性受体的能力,以及使用免疫学方法组合转染到HEK-293细胞中的血凝素(HA)标记受体的能力。对小鼠脑内几种CB1抗体的初步比较显示,放射自显影术显示配体结合的染色模式存在显著差异。然后对表达HA标记的大鼠和人CB1受体的HEK细胞进行抗体免疫细胞化学测试。在这种情况下,没有一种商业抗体能够检测到受体。然后使用HEK细胞和啮齿动物脑匀浆的裂解物通过Western blotting筛选所有抗体。同样,尽管所有商用抗体都能识别脑组织中的多种蛋白质,但没有一种抗体在转染细胞系或脑匀浆中检测到正确分子量的蛋白质。我们的结论是,我们测试的商用抗体未能检测到在HEK细胞中大量表达的CB1受体或脑切片或匀浆中的天然受体。因此,在使用前必须全面验证这些CB1抗体对特定应用的特异性。

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