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.2008;3(4):619-28.
doi:10.1038/nprot.2008.31。

植物细胞共聚焦显微镜图像中荧光标记物的共定位

附属公司

植物细胞共焦显微镜图像中荧光标记的彩色化

Andrew P法语等。 Nat协议. 2008.

摘要

本协议描述了对双色共焦图像(特别是植物细胞)进行定量统计共定位所需的步骤。该程序包括一个校准测试,以检查共焦显微镜的色度校准。提供了一个软件工具,用于计算图像中感兴趣区域的皮尔逊和斯皮尔曼相关系数(“皮尔逊-皮尔曼相关共定位”ImageJ插件)。包括帮助用户练习使用软件的步骤。结果是对图像中的共定位量进行了定量估计。根据所需的细节,手动掩蔽每张图像大约需要1-15分钟,并且计算相关系数几乎是即时的。用于这种双色共定位的合适染料示例包括绿色范围内的俄勒冈州绿或Alexa Fluor 488染料(用488-nm激光线激发)和红色范围内的Alexa Fluor 555染料(用543-nm激光线激励)。

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