Human brain microvascular endothelial cells and umbilical vein endothelial cells differentially facilitate leukocyte recruitment and utilize chemokines for T cell migration

doi:10.1155/2008/384982

.2008:2008:384982.

doi:10.1155/2008/384982。

人脑微血管内皮细胞和脐静脉内皮细胞促进白细胞募集并利用趋化因子进行T细胞迁移

舒梅曼¹, Eroboghene E Ubogu公司, 凯瑟琳·威廉姆斯, 芭芭拉·塔基, 梅丽莎·卡拉汉, 理查德·兰索霍夫

附属公司

PMID： 18320011
预防性维修识别码：项目经理2248224
内政部： 10.1155/2008/384982

人脑微血管内皮细胞和脐静脉内皮细胞促进白细胞募集并利用趋化因子进行T细胞迁移

舒梅曼等。临床开发免疫. 2008.

.2008:2008:384982.

doi:10.1155/2008/384982。

作者

舒梅曼¹, Eroboghene E Ubogu公司, 凯瑟琳·威廉姆斯, 芭芭拉·塔基, 梅丽莎·卡拉汉, 理查德·兰索霍夫

附属

¹美国俄亥俄州克利夫兰市克利夫兰诊所勒纳研究所神经炎研究中心神经科学系，44195。

PMID： 18320011
预防性维修识别码：项目经理2248224
内政部： 10.1155/2008/384982

摘要

功能性表达血脑屏障（BBB）特性的内皮细胞是研究BBB处白细胞-内皮细胞相互作用的有用替代物。在本研究中，我们比较了两种不同的内皮细胞模型：转染的人脑微血管内皮细胞（THBMECs）和人脐静脉内皮细胞（HUVECs）。在最佳条件下，融合的THBMEC培养物显示出持续的闭塞素和ZO-1免疫反应性，而HUVEC培养物仅在细胞与细胞接触的部位显示出点状ZO-1表达。与HUVEC相比，在24孔胶原涂层跨孔插入物上融合的THBMEC培养物具有明显更高的内皮电阻（TEER）和更低的溶质渗透性。融合的THBMEC比HUVEC对单核细胞迁移的限制更大。尽管THBMEC和HUVEC都使用CCL3促进T细胞迁移，但只有THBMEC利用白蛋白CCL5促进T细胞体外迁移。这些数据为使用THBMEC建立体外BBB模型以研究神经炎症期间白细胞-内皮相互作用建立了基线条件。

PubMed免责声明

数字

图2
*与HUVEC相比，汇合的THBMEC培养物具有更高的TEER和更低的溶质渗透性。*THBMEC和HUVEC在24孔胶原涂层的Transwell上培养汇合^TM（TM）插入。使用EVOM电压表测量TEER（a）。THBMEC具有较高的TEER值。溶质渗透率（b）通过添加100来评估μ在Transwell中加入1 mg/mL荧光葡聚糖-70^TM（TM）插入。如中所述，在15分钟后测量下室（井）中的荧光恢复第2节。测量了三个小孔，并使用没有培养内皮细胞的插入物作为对照（数据未显示）。THBMEC培养物显示出较低的溶质渗透性。*表示 $P（P） < .05$ 与HUVEC相比。

图3
*THBMEC公司文化对PBMC的迁移比HUVEC更具限制性。*10⁶PBMC的被添加到包含汇合THBMEC或HUVEC的跨孔嵌件中并允许在指定的时间内轮回。迁移的细胞使用抗CD3 PerCP和抗CD14 APC一步采集并进行三种颜色染色抗体。使用LSR流式细胞仪收集数据，并使用FlowJo®进行分析软件。使用钙调素-AM标记和未标记的PBMC，以及按照第2节所述计算的迁移率。这个使用四个不同的供体进行四次检测。汇流式HUVEC与THBMEC相比，培养物对PBMC的迁移更为宽容*表示 $P（P） < .05$ 比较THBMEC和HUVEC。PBMC通过这些内皮细胞迁移培养遵循以下模式：单核细胞>T细胞>B细胞（关于B细胞的数据单元格未显示）。

图4
*THBMEC公司培养物利用CCL3和CCL5来驱动T细胞迁移，而HUVEC培养物利用了CCL3只有。*THBMEC公司或培养HUVEC汇合在Transwell^TM（TM）插入。10⁶将来自同一供体的PBMC添加到插入物中，添加或不添加50 ng/mL将CCL3或100 ng/mL CCL5添加到下室（井）。迁移率为按第2节所述进行计算。CCL3促进T细胞跨THBMEC和HUVEC同时CCL5诱导T细胞跨THBMEC迁移只有。每个供者和三个供者的化验一式四份捐赠者也包括在内*表示*P（P）*与基底迁移相比<0.05不添加趋化因子。

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