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.2008年2月8日；4（2）：e29。
doi:10.1371/journal.ppat.0040029。

基孔肯雅病小鼠模型：年轻和低效的I型干扰素信号传导是严重疾病的危险因素

塞雷斯·库德克 1, Fabrice Chrétien公司, Clémentine Schilte公司, 奥利维尔·迪森, 疯狂的布里吉特, 佛罗伦斯·吉尔·本哈辛, 亚斯米娜·图雷特, 乔治·巴拉乌, 纳德盖·卡耶, 伊莎贝尔·舒芬内克, 菲利普·德斯普雷斯, 费尔南多·阿伦扎纳·塞斯多斯, 阿兰·米查特, 马修·阿尔伯特, 马克·勒奎特
附属公司

基孔肯雅病小鼠模型：年轻和低效的I型干扰素信号传导是严重疾病的危险因素

塞雷斯·库德克等。 公共科学图书馆-病理学. .

摘要

基孔肯雅病毒（CHIKV）是一种重新合并的虫媒病毒，导致了印度洋地区和印度目前的大规模疫情。CHIKV感染通常会导致人类出现轻微疾病，其特征是发热、肌痛、关节痛和皮疹。最近在新生儿和有潜在疾病的成人中描述了涉及中枢神经系统（CNS）的严重CHIKV感染病例。CHIKV感染的病理生理学和疾病严重程度的基础尚不清楚。为了解决这些关键问题，我们开发了CHIKV感染的动物模型。我们在这里表明，虽然野生型（WT）成年小鼠对CHIKV感染具有抵抗力，但WT小鼠的新生儿易感，新生儿疾病的严重程度取决于年龄。部分（IFN-alpha/betaR（+/-））或完全（IFN-alpha/beta R（-/-））阻断I型IFN通路的成年小鼠分别发生轻度或重度感染。在轻度感染的小鼠中，在肝脏病毒复制爆发后，CHIKV主要作用于肌肉、关节和皮肤成纤维细胞，这种细胞和组织的嗜性与CHIKV感染者的活检样本中观察到的细胞和组织嗜性相似。在严重感染的情况下，CHIKV也会传播到包括CNS在内的其他组织，在CNS中它会专门针对脉络丛和软脑膜。总之，这些数据表明CHIKV相关症状与病毒组织和细胞取向相匹配，并证明成纤维细胞是CHIKV的主要靶细胞。这些数据还确定新生儿期和低效I型干扰素信号是严重CHIKV相关疾病的危险因素。开发一种宽容的小动物模型将加快未来疫苗和治疗候选药物的测试。

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利益冲突声明

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数字

图1
图1。小鼠新生儿CHIKV感染
（A） 小鼠新生儿的存活率根据其年龄而定。给小鼠新生儿接种106通过ID途径观察CHIKV的PFU并观察其致死率(n个=每组6人）。（B） 9日龄新生儿组织中的病毒滴度。小鼠接种106CHIKV的PFU通过ID路由并在指定的时间点牺牲。用TCID50定量血清和组织中的感染病毒数量。每个数据点代表至少四只小鼠的算术平均值±SD。虚线表示检测阈值。
图2
图2。从干扰素α/β途径的完整性看小鼠CHIKV感染
（A） 接种10只小鼠的存活率6通过ID路由的CHIKV PFU(n个=每个类别6个）。（B） 干扰素-α/βR中的病毒滴度−/−，干扰素-α/βR+/−和WT成年小鼠通过ID途径感染20，106、和106PFU。在指定的时间点，处死小鼠，用TCID50定量血清和组织中的感染病毒数量。每个数据点代表至少四只小鼠的算术平均值±SD。虚线表示检测阈值。
图3
图3。小鼠CHIKV细胞和组织嗜性
干扰素-α/βR−/−接种20 PFU和IFN-α/βR的小鼠ID+/−ID接种106在D3pi处死PFU路径。在IFN-α/βR组织冰冻切片上进行多重免疫染色−/−小鼠（A到G）和IFN-α/βR+/−小鼠（I）和IFN-α/βR关节的透射电镜−/−小鼠（H）。Hoechst染色的细胞核呈蓝色，CHIKV呈红色（A至G和I）。基底层（IV型胶原）（A至D）和间充质细胞（波形蛋白）（I′）呈绿色。在所有这些图片中，条形图为10μm。肌肉成纤维细胞，特别是不被基底膜包围的细胞，在骨骼肌（a）的肌表膜（箭头）和肌内膜（箭头）中显示出强烈的CHIKV免疫染色。在骨骼肌（B和C）的肌内膜中，成纤维细胞（箭头）和极少数卫星细胞（箭头所示）容易识别为位于肌纤维基底层下方的单个单核细胞，并被标记为CHIKV抗原。在真皮深层（D和E）和关节囊（F和G）中也对成纤维细胞进行了CHIV免疫染色。（H） 接触的病毒颗粒（H和H′中的箭头）以及结缔组织细胞细胞质内的病毒颗粒的透射电子显微镜视图，由于周围没有基底层和相邻的I型胶原纤维，因此被确定为成纤维细胞。干扰素-α/βR骨骼肌CHIKV阳性感染细胞+/−小鼠（I），被鉴定为成纤维细胞，因为它们不被基底膜包围，并且表达波形蛋白（I′）。
图4
图4。小鼠新生儿CHIKV细胞和组织嗜性
90岁的干扰素-α/βR+/+小鼠感染了10只6通过ID路由的CHIKV PFU。免疫标记波形蛋白（B）和CHIKV（C）的感染肌肉结缔组织重叠图像（A）。骨骼肌纵切面苏木精-伊红染色（D）显示严重坏死性肌炎，肌纤维大量浸润和坏死。肌肉（E）和大脑（F）切片上CHIKV抗原（红色）和细胞核（蓝色）的免疫染色。注意，肌内膜显示出强烈的CHIKV免疫标记，以及软脑膜细胞。棒材为10μm。
图5
图5。CHIVV靶向脉络丛和脑膜组织，但不影响IFN-α/βR中BBB的通透性−/−老鼠
小鼠通过ID途径感染20个CHIKV PFU，并在D3pi处死。（A） 脑苏木精和伊红染色显示脉络丛上皮细胞严重空泡化（B）。用TCID50对分离脑膜和全脑中存在的感染病毒数量进行定量。每个数据点代表至少三只小鼠的算术平均值±SD(*对< 0.05). （C） 静脉注射VI型HRP后，感染和模拟感染小鼠的代表性脑切片显示BBB的完整性，因为没有任何残留在血管中的染色泄漏。作为阳性对照，显示了嗜神经酵母新生隐球菌诱导的HRP泄漏（箭头），已知其会破坏BBB完整性。
图6
图6。小鼠中枢神经系统的CHIKV细胞和组织嗜性
干扰素-α/βR−/−通过ID途径接种20 PFU的小鼠在D3pi处死，并在脑冷冻切片上进行免疫染色。细胞核呈蓝色，CHIKV呈红色。基底膜（IV型胶原）呈紫色（A）或绿色（B），星形胶质细胞和胶质细胞界限蛋白（GFAP）呈绿色（A和C）。脑膜细胞（箭头）对CHIKV显示出强烈的免疫标记，而脑微血管（箭头）和胶质细胞则没有（a）。Virchow-Robin间隙显示CHIKV（B）、室管膜细胞（C）和脉络丛（D）的免疫染色。棒材为10μm。
图7
图7。血脑屏障组成细胞的体外易感性
在MOI为10时用CHIKV感染原代细胞，然后用免疫荧光检测病毒抗原。脉络丛上皮细胞的顶端（A）和基底（B）感染持续18小时。注意，与顶端感染相比，基底感染后的免疫荧光细胞数量较少。脑微血管内皮细胞感染48小时，但未检测到病毒抗原（C）。
图8
图8。妊娠期干扰素-α/βR的CHIKV感染−/−小鼠和人同步滋养层细胞对CHIKV的耐药性
（A） 孕鼠在妊娠16至18天期间通过ID途径感染20个CHIKV PFU。两天后，在血清和肝脏以及胎盘和胎儿（四位母亲，每个母亲三到六个胎儿）中测定病毒滴度。虚线表示检测阈值。（B） 将人合胞滋养层细胞系BeWo和人包皮成纤维细胞HFF作为阳性对照，在MOI为10时感染CHIKV，并在指定的时间点用TCID50滴定培养液中的病毒载量。每个数据点代表至少四个独立实验的算术平均值±SD。
图9
图9。人体组织样品中的CHIKV免疫标记
在人体组织中，在真皮（A）、骨骼肌（B）和关节囊（C）的成纤维细胞中检测到病毒抗原。棒材为10μm。
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    1. Enserink M.传染病。大规模爆发引起人们对鲜为人知的病毒的新关注。科学。2006;311:1085.-公共医学
    1. Bessaud M、Peyrefitte CN、Pastorino BA、Tock F、Merle O等。基孔肯亚病毒株，留尼汪岛疫情。突发传染病。2006;12:1604–1606.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Schuffenecker I、Iteman I、Michault A、Murri S、Frangeul L等。导致印度洋爆发的基孔肯雅病毒基因组微进化。《公共科学图书馆·医学》2006；3:e263。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Pialoux G、Gauzere BA、Jaureguiberry S、Strobel M.Chikungunya，一种流行性虫媒病毒病。柳叶刀传染病。2007;7:319–327.-公共医学

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