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.2008年1月21日；205(1):43-51.
doi:10.1084/jem.20071412。 Epub 2008年1月7日。

连接伤口炎症和纤维化的分子机制：骨桥蛋白的敲除导致快速修复和减少瘢痕形成

森良治 1, Tanya J Shaw, 保罗·马丁
附属公司

连接伤口炎症和纤维化的分子机制：骨桥蛋白的敲除导致快速修复和减少瘢痕形成

森良治等。 实验医学杂志. .

摘要

以前的组织修复研究表明，骨桥蛋白（OPN）上调与伤口炎症反应相关。我们假设OPN可能导致炎症相关纤维化。在一系列体外和体内研究中，我们分析了阻断伤口OPN表达的效果，并确定哪些炎症细胞以及这些细胞中的哪些旁分泌因子可能会触发伤口成纤维细胞中OPN的表达。将OPN反义寡核苷酸从Pluronic凝胶中释放到小鼠皮肤伤口中，可降低伤口处的OPN蛋白水平，从而加速愈合，减少肉芽组织形成和瘢痕形成。为了确定哪些白细胞谱系可能与OPN表达有关，我们在巨噬细胞中培养成纤维细胞，中性粒细胞或肥大细胞调节介质（CM），发现巨噬细胞和肥大细胞分泌因子，特别是血小板衍生生长因子（PDGF），诱导成纤维细胞OPN表达。相应地，阻断PDGF受体信号传导的Gleevec和PDGF-Rbeta中和抗体抑制巨噬细胞CM对OPN的诱导。这些研究表明，炎症触发的OPN表达既阻碍修复速度，又有助于伤口纤维化。因此，OPN和PDGF是治疗性调节皮肤修复以提高治愈率和质量的潜在靶点。

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图1。
图1。
针对OPN的AS ODN可有效降低小鼠体内伤口中OPN蛋白的水平。（A） OPN（棕色）的免疫染色显示伤口结缔组织细胞在第1天和第3天表达，在创伤后7天解决。（B） 第3天伤口组织的双重免疫荧光显示，F4/80阳性细胞（绿色；闭合箭头）和阴性细胞（开放箭头）中都有OPN表达（红色）。（C） 对对照组和经OPN AS ODN处理的伤口组织中OPN的Western blot分析证实了A中免疫染色的时间分布，并表明AS ODN治疗导致OPN耗竭。（D） 通过对来自六个独立实验的印迹进行密度分析，量化了带强度，并显示了OPN/GAPDH比值的值（平均值±SEM）。（E） 将Cy3标记的OPN AS ODN（红色）应用于伤口，以评估OPN耗竭的深度和组织（在6小时时评估）。虚线表示表皮/结缔组织界面，箭头表示表皮伤口边缘。插图显示了同一截面的低放大率视图。棒材：（A）50μm；（B） 10微米；（E） 100微米；（E，插图）200μm。
图2。
图2。
OPN AS ODN治疗伤口可加速皮肤伤口愈合。（A） 图示成年雄性ICR小鼠剃光的背部皮肤上的全厚度切除和切口的位置和尺寸的示意图。虚线表示截面的轴。（B） 宏观观察创伤后不同时间点的兴奋控制和OPN AS ODN治疗伤口。（C） 对照组（开放栏）和OPN AS ODN治疗组（填充栏）创伤后每个时间点相对于初始创伤面积的创伤保持开放的比例（平均值±SEM；n个=6）。（D） 示意图显示组织切片的测量结果。（E） 创伤后第3天和第7天的伤口再上皮化(n个=两者均为9）。（F） 对照组和OPN AS ODN治疗的伤口修复3、7、10和14天后，结缔组织伤口剩余宽度（第3天和第7天，n个= 9; 第10天和第14天，n个=6）。（G） 用Western blotting检测第3天和第7天α-平滑肌肌动蛋白的表达。所示图像代表了四个独立实验。（H） 在创伤后14天采集切除伤口的组织，并用Masson三色染色，肉芽组织的范围（横截面积）在伤口中点处可视化并量化（用虚线表示）。（一） 与对照组（开放栏；第3天和第7天，n个= 9; 第10天和第14天，n个=6）。钢筋：（B和H）1 mm。
图3。
图3。
创伤部位OPN击倒后胶原组织的改变（A）伤后21天，对照组和OPN AS ODN治疗切口伤口疤痕的宏观视图。*，伤口边缘。所示图像代表了八个独立实验。（B） 在第21天，对照和OPN AS ODN处理的切口伤口的Picrosius红色染色切片。五个独立实验的代表。所示方框区域的高清晰度细节是差分干涉对比图像。箭头显示伤口边缘。（C） 未损伤皮肤、对照组和AS ODN治疗14天伤口结缔组织的TEM图像。高倍镜下的插图显示了这些组织中不同的胶原纤维直径。（D） 完整、未损伤皮肤、对照ODN-和OPN AS ODN-治疗伤口的至少5个视野中胶原原纤维平均直径的图示（±SEM）；未受伤的皮肤（条纹条，n个=200），控制ODN（开条，n个=300），OPN AS ODN（填充钢筋，n个= 150). 棒材：（B；低倍）100μm；（B；高倍）25μm；（C） 1微米；（C，插图）100 nm。
图4。
图4。
OPN的敲除抑制炎症细胞的募集并增加新生血管。（A） 髓过氧化物酶（中性粒细胞）和F4/80（巨噬细胞）或甲苯胺蓝染色（肥大细胞）的免疫组织化学（IHC）显示，与对照组相比，经AS ODN治疗的创面肉芽组织中的白细胞显著减少。（B） 量化伤口部位中性粒细胞、巨噬细胞和肥大细胞的数量，以用于对照组（开放栏）和OPN AS ODN处理的伤口（填充栏；平均值±SEM；n个≥ 5). （C） 实时RT-PCR分析测定了对照组ODN（开放条）和OPN AS ODN伤口（填充条；平均值±SEM；n个= 9). （D） CD31/血小板/内皮细胞粘附分子1 IHC显示受伤后第7天，对照组（左）和OPN AS ODN治疗的伤口（右）的血管（箭头所示的原始伤口边缘）。（E） 7天和14天时中央伤口肉芽区血管管腔数量的图示。棒材：（低倍）200μm；（高倍）50μm。
图5。
图5。
炎症细胞对OPN表达的调节。（A） 我们的体外实验示意图，用于确定哪些白细胞和哪些分泌因子负责诱导成纤维细胞中OPN的表达。Western blot分析用来自不同白细胞系（B）或EGF、PDGF-BB、TGFβ1、TGFα3、IL-6或TNF-α（C）的CM处理瑞士3T3成纤维细胞8小时，以确定哪些条件导致OPN表达增加。（D） 成纤维细胞与巨噬细胞CM和Gleevec、PDGF-R中和抗体（E）或沃特曼蛋白（F）共同作用。（G） 在指定的时间内用20 ng/ml PDGF-BB刺激瑞士3T3成纤维细胞，然后立即分析（左），或在新鲜培养基中冲洗并培养8小时，然后分析OPN表达（右）。
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    1. Chatziantoniou，C.和J.C.Dussaule。2005.肾纤维化机制的见解：有可能实现逆转吗？美国生理学杂志。肾脏生理学。289:F227–F234。-公共医学
    1. M.P.Keane、R.M.Strieter和J.A.Belperio，2005年。肺纤维化的机制和介质。批评。免疫学版。25:429–463.-公共医学
    1. Duffield，J.S.、S.J.Forbes、C.M.Constandiou、S.Clay、M.Partolina、S.Vuthoori、S.Wu、R.Lang和J.P.Iredale。巨噬细胞的选择性耗竭揭示了肝脏损伤和修复过程中截然不同的相反作用。临床杂志。投资。115:56–65.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Martin，P.、D.D’Souza、J.Martin、R.Grose、L.Cooper、R.Maki和S.R.McKercher。PU.1基因缺失小鼠的伤口愈合——组织修复不依赖于炎症细胞。货币。生物.13:1122–1128。-公共医学

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