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2008年1月;39(1):21-9.
doi:10.1016/j.humpath.2007.05.023。 Epub 2007年10月24日。

蛋白激酶Cδ(PKCδ)在子宫内膜肿瘤中的表达分析

附属公司

子宫内膜肿瘤中蛋白激酶Cδ(PKCδ)的表达分析

伊莱恩·M·雷诺等。 人体病理学 2008年1月

摘要

子宫内膜癌是美国最常见的妇科恶性肿瘤。然而,其潜在的分子机制尚不清楚;很少有预后指标被确定。蛋白激酶C(PKC)家族已被证明调节恶性转化的关键途径;在子宫内膜肿瘤中,PKC表达和活性的变化与更具侵袭性的表型和不良预后有关。我们最近发现PKCδ是子宫内膜癌细胞凋亡和细胞存活的关键调节因子;然而,子宫内膜肿瘤中的PKCδ水平尚未确定。我们用免疫组织化学方法检测了正常子宫内膜和分级递增的子宫内膜样癌中PKCδ蛋白的水平。正常子宫内膜可见大量局限于腺上皮的PKCδ核和细胞质染色。在子宫内膜肿瘤中,随着肿瘤分级的增加,PKCδ的表达在上皮细胞染色的强度和比例上都有所下降,其中PKCδ优先从细胞核中丢失。与这些观察结果一致,来自低分化肿瘤的子宫内膜癌细胞系与高分化细胞系相比PKCδ水平降低。足叶乙甙治疗子宫内膜癌细胞导致PKCδ从细胞质向细胞核移位,同时诱导凋亡。PKCδ表达减少,尤其是在细胞核中,可能会损害细胞凋亡的能力,可能导致化疗耐药。我们的结果表明,PKCδ的丢失是子宫内膜恶性肿瘤和癌症分级增加的一个指标。因此,PKCδ可能在子宫内膜癌中起到抑癌作用。

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数字

图1
图1
与正常组织相比,恶性上皮中PKCδ的表达降低:(A)正常增殖、分泌或萎缩子宫内膜和(B)分级增加的子宫内膜样癌的典型图像。按照材料和方法中的描述,对样品进行处理和PKCδ染色。
图2
图2
恶性上皮细胞核PKCδ表达缺失:(A)一个低级别肿瘤的代表性图像,邻近正常萎缩子宫内膜(放大40倍)。与恶性上皮细胞(C)相比,正常组织(B)扩大,PKCδ的核和细胞质表达增强,细胞质染色减少,核PKCδ丢失。切片按材料和方法染色。
图3
图3
子宫内膜癌中PKCδ细胞质表达降低:对PKCδ染色的肿瘤样本进行分析,并对(A)每例染色的细胞分数和(B)细胞质中的平均染色强度进行评分。水平线表示正常或肿瘤分级增加的每个样本群体的平均染色细胞百分比(A)和强度。(C) 根据肿瘤分级,病例分为染色强度的每三分之一*第页<0.0001. **第页<0.05.
图4
图4
子宫内膜癌细胞核PKCδ表达显著降低或丢失:对肿瘤样本进行染色,并分析(A)每个病例显示细胞核PKCΔ染色的细胞比例和(B)细胞核平均染色强度。水平线表示正常或肿瘤分级增加的每个样本人群的平均染色细胞百分比(A)和强度(B)。(C) 根据肿瘤分级,病例分为核染色强度的每三分之一*第页<0.0001. **第页<0.05.
图5
图5
子宫内膜癌细胞系中的相对PKCδ水平:按照材料和方法中的描述,采集一系列子宫内膜癌的细胞系(石川、HEC-1-A和HEC-50),并通过western blotting检测提取物中的PKCδ和β-肌动蛋白。(A) PKCδ表达水平通过密度计进行量化,归一化为β-肌动蛋白,并相对于石川细胞中的水平进行表达。数据为3个实验的平均值±标准误差。(B) 显示PKCδ和β-肌动蛋白水平的典型western blot。
图6
图6
PKCδ在依托泊苷诱导的细胞凋亡中的转移:如图所示,用50μM依托泊甙或稀释剂(对照)处理HEC-1-A细胞6小时。细胞被固定、渗透、用PKCδ抗体探测并用免疫荧光二级抗体染色,如材料和方法所述。(A) 控制单元。(B) 足叶乙甙处理的细胞。(C&D)细胞核用DAPI逆行染色。显示了两个独立实验的典型共焦图像。三名独立观察者通过对对照组或依托泊甙处理的细胞的五个随机场进行计数来估计细胞核PKCδ的百分比。结果为平均值±标准误差。

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