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.2007年7月;25(7):786-93.
doi:10.1038/nbt1317。 Epub 2007年7月1日。

基于结构的二聚化界面重新设计降低锌指核酸酶的毒性

附属公司

基于结构的二聚化界面重新设计降低锌指核酸酶的毒性

米查尔·什切佩克等。 Nat生物技术. 2007年7月.

摘要

由连接到工程锌指DNA结合蛋白的FokI裂解域组成的人工核酸内切酶已被证明可用于刺激多种细胞类型中的同源重组。由于锌指核酸酶(ZFN)的催化结构域必须二聚才能发挥活性,因此两个亚基通常在裂解位点组装为异二聚体。ZFN的使用通常与显著的细胞毒性有关,可能是由于在非靶点发生裂解。在这里,我们描述了一种基于结构的方法来减少非目标解理。在硅蛋白建模和能量计算中,我们通过防止同二聚化和降低二聚化能量来提高靶点裂解的特异性。基于细胞的重组实验证实,修饰的ZFN与原始ZFN一样活跃,但引起的遗传毒性显著降低。改进后的安全性可促进ZFN技术的治疗应用。

PubMed免责声明

中的注释

  • 精确基因组手术。
    Pingoud A,Silva GH。 Pingoud A等人。 国家生物技术。2007年7月;25(7):743-4. doi:10.1038/nbt0707-743。 国家生物技术。2007 PMID:17621297 没有可用的摘要。

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