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.2006;1(2):859-69.
doi:10.1038/nprot.2006.113。

溴脱氧尿苷标记后的流式细胞术测量S和G2+M期持续时间加上体内外倍增时间

附属公司

溴脱氧尿苷标记后的流式细胞术测量S和G2+M期持续时间加上体内外倍增时间

尼古拉斯·H·A·特里等。 Nat协议. 2006.

摘要

本协议描述了计算细胞群增殖参数的方法。该技术的基础是用卤化胸腺嘧啶类似物(例如溴脱氧尿苷(BrdU))标记体外或体内的细胞。双变量DNA-BrdU流式细胞术用于分析BrdU标记和未标记细胞。计数在标记和细胞/组织取样之间的间隔内有或没有分裂的特定细胞群,可以计算群体的潜在加倍时间(T(pot)),加上细胞周期的DNA合成持续时间(T)和G2+M期(T(G2+M))。该方法提供了其他方法无法获得的信息,即抑制DNA合成和单独评估BrdU标记和未标记亚群中的细胞周期效应。乙醇固定样品的制备和染色需要1天的时间,通过标记后单个时间点的测量可以获得可靠的参数估计值。

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