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.2007年3月；9(3):222-35.
doi:10.1593/neo.06673。

抗炎药吲哚美辛减少人类乳腺癌细胞系的侵袭并改变其代谢

艾伦·阿克尔斯塔夫 1, 巴乔·吉米, 德米特里·阿特莫夫, Zaver M Bhujwalla先生
附属公司

抗炎药吲哚美辛减少人类乳腺癌细胞系的侵袭并改变其代谢

埃伦·阿克斯塔夫等。 肿瘤形成. 2007年3月.

摘要

实体肿瘤中存在的缺氧和酸性细胞外pH值等不利生理环境可能通过炎症反应和二十烷酸的形成促进侵袭和转移。在这里，我们使用磁共振相容性侵袭试验，研究了消炎药吲哚美辛对人类乳腺癌细胞株MDA-MB-435在基于Dulbecco’s Modified Eagles（DME）或基于Roswell Park Memorial Institute（RPMI）的细胞培养基中侵袭和代谢的影响。吲哚美辛治疗显著降低了MDA-MB-435细胞的侵袭性，与所检测的培养和灌注条件无关。细胞内胆碱磷脂代谢物水平和这些细胞的甘油三酯（TG）浓度发生了显著变化，这取决于吲哚美辛治疗和使用的基底细胞培养基。此外，使用基于RPMI的培养基在细胞培养中用低剂量吲哚美辛培养和治疗的乳腺癌细胞的基因图谱显示，几个基因上调与环氧合酶诱导的吲哚美欣依赖性靶点有关。这些数据证实了抗炎药减少乳腺癌侵袭的能力，并证明，根据细胞培养和灌注条件，吲哚美辛诱导的侵袭减少与胆碱磷脂代谢、TG代谢和基因表达的变化有关。

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数字

图1
图1
样品结构（中心）的示意图显示，可在代表性T中清楚识别1-加权1右侧为H MR图像。左上角的照片显示了一个典型的Biosilon珠，上面覆盖着MDA-MB-435细胞。对照实验是在没有颗粒或卸载颗粒的情况下进行的。在吲哚美辛治疗的实验中，在ECM凝胶上方约4 mm处的上层细胞层中添加两个或三个可生物降解的21天缓释颗粒。对于灌注系统中约420毫升的总培养基体积，计算出的吲哚美辛释放浓度为-0.48µmol/（l x 24小时）（三粒）和-0.32µmol/（l x 24小时）（两粒）。标记为1和2的两个箭头反映了为获得I而整合的区域第页（t） 和我p、 7毫米（t） ，如等式（1）所定义。侵袭指数反映了细胞迁移和细胞外基质降解的综合作用。
图2
图2
T型1-加权1H MR图像（A和B）和随时间的侵袭指数（C和D）表明吲哚美辛治疗和细胞培养基对MDA-MB-435乳腺癌细胞降解（A和B）和侵袭（A-D）ECM凝胶的影响。侵袭包括细胞迁移和ECM降解。（A，A）在DME中培养的未经处理的MDA-MB-435细胞C并在DME中灌注人物配对关系（A，b）在二甲醚中培养的经消炎痛处理（三粒）的MDA-MB-435细胞C并在DME中灌注人物配对关系（B，a）在RPMI中培养的未经处理的MDA-MB-435细胞C并在RPMI中灌注人物配对关系（B，B）在RPMI中培养的经消炎痛处理（三粒）的MDA-MB-435细胞C并在RPMI中灌注人物配对关系.（C）DME人物配对关系：闭合圆，控制，n=4；开环，三粒吲哚美辛，n=3(‡治疗组与未治疗组MDA-MB-435细胞的P=0.16）。（D） RPMI公司人物配对关系：闭合圆，控制，n=3；开环，三粒消炎痛；开方格，两粒消炎痛（治疗组与未治疗组的MDA-MB-435细胞相比，*P＜0.05）。侵袭指数的值表示为平均值±SE。
图3
图3
代表1D31实验开始和结束时整个样品的P MR光谱。（A，A）DME人物配对关系，控制。（A，b）二甲醚人物配对关系，全球释放的吲哚美辛浓度为0.48µmol/（l x 24小时）。（B，a）RPMI人物配对关系，控制。（B，B）RPMI人物配对关系，全球释放的吲哚美辛浓度为0.48µmol/（l x 24小时）。信号分配：DPDE，二磷酸二酯；NADP（H），信号由NAD组成+、NADH、NADP+和NADPH；PCr，磷酸肌酸；NTP，三磷酸核苷；NDP，二磷酸核苷；P（P）我无机磷酸盐（ex，胞外；in，胞内）。
图4
图4
磁共振实验期间磷酸代谢物的相对变化。数值以平均值±SE表示。（A）吲哚美辛处理的（三粒或两粒吲哚美辛）和未处理的用DME灌注的MDA-MB-435细胞的β-NTP的相对变化人物配对关系或RPMI人物配对关系（B）经二甲醚灌注的MDA-MB-435细胞经治疗（开环，吲哚美辛三粒，n=3）和对照（闭环，n=4）后GPC的相对变化人物配对关系.‡吲哚美辛处理的MDA-MB-435细胞与未处理的细胞相比，P<0.05。（C） 对照组（闭圈，n=4）和消炎痛治疗组（开圈，三粒消炎痛，n=3）MDA-MB-435细胞灌注二甲醚后PC的相对变化人物配对关系（D）对照组（闭圈，n=3）和消炎痛治疗组（开圈，三粒消炎痛，n=3.开方块，两粒消炎炎，n=3.MDA-MB-435细胞灌注RPMI后PC的相对变化人物配对关系.*吲哚美辛处理的MDA-MB-435细胞与未处理的细胞相比，P<0.05。（*）未经处理的MDA-MB-435细胞与用两粒吲哚美辛处理的细胞有显著差异的两个时间点，但与用三粒吲哚美辛处理过的细胞没有显著差异。
图5
图5
（A） 代表性水抑制1D1加载47小时后沿样品采集的310-µm厚薄片的H CSI MR光谱，以及相应的1灌注DMECP的MDA-MB-435细胞的H MR图像。（B–F）LacTG的相对水平，以及MDA-MB-435细胞的样品。以平均值±SE表示的值来自1D1除非另有说明，否则每种条件下三次实验的H CSI光谱平均值。（B） 未经处理的DME人物配对关系，n=4。（C） 三粒消炎痛，二甲醚人物配对关系（D）未经处理的RPMI人物配对关系（E）两粒消炎痛丸，RPMI人物配对关系（F）三粒消炎痛丸人物配对关系（d）2; n=2的平均值）。ECM凝胶室的底部定义为0 mm。0至3 mm的空白区域代表形成ECM凝胶室底部的过滤材料。ECM=实验开始时ECM凝胶的厚度；Indo=磁共振实验开始时，吲哚美辛颗粒在上层细胞中的大致位置；d日1，天2，天三=加载电池后经过的时间（即分别为第1天、第2天和第3天）。
图6
图6
（A） DME中MDA-MB-435细胞随时间变化的LacTG相对水平人物配对关系或RPMI人物配对关系以平均值±SE表示的值来自全球1D1用基于STEAM的脉冲序列获得的核磁共振波谱。（B和C）二甲醚中MDA-MB-435细胞随时间变化的Lac（B）和TGs（C）相对水平人物配对关系或RPMI人物配对关系以平均值±SE表示的值来自全球1D1用基于自旋回波的脉冲序列和Lac编辑获得的核磁共振氢谱。
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