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.2007年5月15日;364(2):128-37.
doi:10.1016/j.ab.2007.02.022。 Epub 2007年2月24日。

蓝色天然聚丙烯酰胺凝胶电泳分析线粒体亚单位组装成呼吸链复合物

附属公司

蓝色天然聚丙烯酰胺凝胶电泳分析线粒体亚单位组装成呼吸链复合物

马修·麦肯齐等。 Ana Biochem公司. .

摘要

线粒体呼吸链由内膜中嵌入的多亚单位蛋白质复合物组成。尽管大多数亚单位由核基因编码并导入线粒体,但人类的13个亚单位由线粒体DNA编码。由两个基因组编码的亚基的协调组装是一个鲜为人知的过程,组装途径缺陷是线粒体疾病的主要决定因素。在这项研究中,我们使用放射性标记的线粒体编码亚基和蓝色天然聚丙烯酰胺凝胶电泳来监测人类呼吸复合物的组装。发现复合物之间的组装效率存在显著差异,对于复合物I、III和IV,可以观察到含有新合成的线粒体DNA编码亚单位的中间复合物,我们在被完全组装成成熟复合物III之前的早期追逐时间检测到人细胞色素b作为单体和作为新的约120kDa中间复合物的组分。此外,我们表明,这种方法非常适合于线粒体疾病患者成纤维细胞呼吸复合体组装缺陷的快速检测,因此具有潜在的诊断应用价值。

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