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.2007年4月27日;282(17):13133-8.
doi:10.1074/jbc。M700584200。 Epub 2007年3月8日。

酵母液泡Vam7p的PX和SNARE结构域的独特靶向和融合功能

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酵母液泡Vam7p的PX和SNARE结构域的独特靶向和融合功能

Rutilio A Fratti公司等人。 生物化学杂志. .
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摘要

受调节的膜融合需要细胞器系留、在融合位点富集选定的蛋白质和脂质、双层畸变和脂质重排。酵母液泡同型融合需要调节脂质(麦角甾醇、二酰甘油和磷脂酰肌醇)、Rab家族GTPase Ypt7p、多亚单位Ypt7p-效应复合物HOPS(同型融合和液泡蛋白分选)和四个SNARE。一个SNARE,Vam7p,具有一个N端PX结构域,该结构域与磷脂酰肌醇3-磷酸(PI(3)P)和HOPS以及一个C端SNARE结构域结合,但没有非极性膜锚。我们利用液泡融合的体外反应来分析每个结构域的功能,去除PX结构域或对其进行突变以消除其PI(3)P亲和力。降低PX域的PI(3)P亲和力,甚至删除PX域,会影响Vam7p的融合K(m),但不会影响最大融合率。PLC抑制剂U73122通过增强Vam7p SNARE结构域与液泡的结合,显著增强了仅由SNARE域驱动的融合,而Plc1p的进一步添加阻断了U73122效应。因此,PX结构域通过其对磷脂酰肌醇和HOPS的亲和性,专门用于增强Vam7p的靶向性,而不是用于执行HOPS中的Vam7p功能。SNARE复杂装配和融合。

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