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.2007年1月;4(1):47-9.
doi:10.1038/nmeth999。 Epub 2006年12月10日。

用缺失突变狂犬病病毒逆行追踪神经元

附属公司

用缺失突变狂犬病病毒逆行追踪神经元

Ian R Wickersham先生等。 Nat方法. 2007年1月.

摘要

我们构建了一种编码EGFP的缺失突变狂犬病病毒,并发现它是研究哺乳动物大脑内投射到注射部位的神经元的详细形态和生理学的极好工具。与其他病毒载体不同,该病毒不能在最初感染的细胞外传播,而是在细胞内复制其核心。因此,细胞发出强烈的荧光,显示出精细的树突和轴突结构,没有部分或微弱标记细胞的背景。

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数字

图1
图1
重组狂犬病病毒SADΔG-EGFP。()在SADΔG-EGFP中,糖蛋白(G)开放阅读框替换为EGFP的开放阅读框。EGFP mRNA使用真实的G转录起始(黑色箭头)和终止多聚腺苷酸化信号(黑色条)进行转录。病毒性开放阅读框,浅灰色框;非编码序列,灰色;转录信号,黑色。N、 P、M和L表示剩余的病毒基因。(b条)小鼠脑内SADΔG-EGFP逆行标记的一个例子。这些是注射后6天未染色组织内固有EGFP荧光的宽视野显微图像。丘脑注射后,顶部深层皮质锥体细胞感染。比例尺,150µm。插入,注射部位。比例尺,750µm。
图2
图2
SADΔG-EGFP与慢病毒的比较。这些固有荧光的共焦图像使用相同的仪器设置连续拍摄,显示皮质锥体细胞逆行感染狂犬病病毒糖蛋白假型慢病毒并在巨细胞病毒启动子驱动下表达EGFP,或者感染重组狂犬病毒SADΔG-EGFP。(c(c))慢病毒。(d日)狂犬病病毒SADΔG-EGFP。比例尺,150µm。

中的注释

  • hCMV对脑内病毒基因表达的适用性。
    卡斯帕罗夫S。 卡斯帕罗夫S。 自然方法。2007年5月;4(5):379; 作者回复379。doi:10.1038/nmeth0507-379a。 自然方法。2007 PMID:17464292 没有可用的摘要。

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