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.1991年4月25日;266(12):7423-31.

禽成髓细胞病、人类免疫缺陷和Moloney小鼠白血病病毒的逆转录酶的聚合和RNase H活性在功能上是不偶联的

附属公司
  • PMID: 1708386
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禽成髓细胞病、人类免疫缺陷和Moloney小鼠白血病病毒的逆转录酶的聚合和RNase H活性在功能上是不偶联的

J J德斯特法诺等。 生物化学杂志. .
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摘要

使用在特定位置引物的272个核苷酸长的质粒衍生RNA转录物来检测RNA依赖性DNA聚合酶和逆转录酶(RT)的RNase H活性之间的功能相互作用。检测了禽成髓细胞病病毒(AMV)RT、人类免疫缺陷病毒RT和Moloney小鼠白血病病毒RT的特性。所有三种酶都与引物模板形成稳定的复合物,半衰期约为16至41秒。每种酶合成全长引物延伸产物,并在DNA合成期间至少切割RNA模板一次。然后在一轮DNA合成过程后,在有效隔离RT的挑战者RNA存在下对聚合进行分析。该测定允许测量在与引物模板的一次接触期间由RT催化的核内裂解的数量。结果表明,无论是否存在脱氧核苷三磷酸盐以进行合成,三种RT中的每一种都在从引物模板解离之前切割转录物。在合成过程中,RNA降解的程度在RTs之间有所不同,AMV-RT主要产生RNA-DNA杂交的大片段,几乎没有小RNA裂解产物。与AMV-RT相比,人类免疫缺陷病毒和Moloney小鼠白血病病毒-RT产生了更多的小降解产物,但仍有许多潜在的可降解杂交病毒未被消化。结果表明,在DNA合成过程中,RNase H功能的活性远低于聚合功能,并且这些活性没有严格耦合。

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