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.2007年2月;1768(2):291-8.
doi:10.1016/j.bbamem.2006.09.002。 Epub 2006年9月16日。

脂质体中重组的谷氨酰胺/氨基酸转运蛋白(ASCT2):转运机制、ATP调节和谷氨酰胺/谷氨酸反转运蛋白的表征

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脂质体中重组的谷氨酰胺/氨基酸转运蛋白(ASCT2):转运机制、ATP调节和谷氨酰胺/谷氨酸反转运蛋白的表征

弗朗西斯卡·奥佩迪萨诺等。 Biochim生物物理学报. 2007年2月.
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摘要

用C12E8从大鼠肾顶端质膜(刷状边界膜)溶解并重组为脂质体的谷氨酰胺/氨基酸转运蛋白先前已被鉴定为ASCT2转运蛋白。重组转运体催化一种反转运反应,其中外部谷氨酰胺和Na+与内部谷氨酰胺(或其他氨基酸)进行共转运。谷氨酰胺-Na+共转运以1:1的化学计量比进行。Na+浓度不影响谷氨酰胺的Km,反之亦然。谷氨酰胺-Na+共转运的双底物分析获得的实验数据,以及先前关于谷氨酰胺(ex)/谷氨酰胺(in)伪双反应物分析的报告表明,转运蛋白以随机同步机制催化三底物转运反应。蛋白质脂质体内部存在ATP,导致转运的Vmax增加,外Na+转运的Km减少。谷氨酸抑制重组谷氨酰胺/氨基酸转运体;在酸性pH下,抑制作用更为明显。动力学分析表明,抑制作用与谷氨酰胺竞争。谷氨酸也与谷氨酰胺交换。谷氨酸转运体的外部Km(13.3 mM)略高于内部Km(8.3 mM)。在酸性pH下,外部Km减少,但内部Km没有减少。根据Km值,谷氨酸应优先从内向外运输,以交换外部谷氨酰胺和Na+。

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