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.2006年8月31日;442(7106):1050-3.
doi:10.1038/nature05025。 Epub 2006年8月23日。

热休克因子与活细胞天然基因座关联的动力学

附属公司

热休克因子与活细胞天然基因座关联的动力学

杰瑶等人。 自然. .

摘要

直接观察活细胞核中转录因子的作用可以为基因调控机制提供重要的见解。活体细胞成像技术已经使各种核内活动可视化,从染色体动力学到基因表达。然而,研究特定本地基因转录调控的进展有限,主要是因为在解析单个基因位点和检测活性转录单位内功能的少量蛋白质分子方面存在困难。在这里,我们报告了活果蝇唾液腺中多烯核的多光子显微镜成像,可以实时分析转录因子在特定天然基因上的募集和交换。热休克后,我们实时观察到RNA聚合酶II(Pol II)在天然hsp70基因位点87A和87C上的募集。我们发现热休克因子(HSF)是hsp70的转录激活因子,在热休克前定位于细胞核,热休克后从核质易位到染色体位点。基于光漂白后荧光恢复的分析表明,在非热休克条件下,染色体位点上的HSF交换迅速,但热休克后交换非常缓慢。然而,这并不是HSF扩散性变化的结果,正如荧光相关光谱直接显示的那样。我们的结果提供了强有力的证据,证明活化的HSF在体内稳定地与DNA结合,并且hsp70转录不需要转录激活剂的翻转或分解。这项研究和以前的研究表明,转录激活物在与活细胞中的靶位点的关联中表现出不同的动态行为。我们的方法可以用于研究转录和RNA处理中许多因素的动力学,以及它们在体内对天然热休克基因的调控。

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