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.2006年3月29日；26(13):3496-504.
doi:10.1523/JNEUROSCI.3792-05.2006。

突触前和突触后酪氨酸受体激酶B介导的磷脂酶Cgamma信号通路支持海马长时程增强

安妮特·加特纳 1, 多里特·波尔诺, 沃尔克·斯泰格, 卡拉·西亚雷塔, 莉莉亚娜·米尼奇埃洛, 汉斯·托恩, 托比亚斯·邦霍弗, 马丁·科特
附属公司

突触前和突触后酪氨酸受体激酶B介导的磷脂酶Cgamma信号通路支持海马长时程增强

安妮特·加特纳等。 神经科学. .

摘要

神经营养素已被证明在活动依赖性突触可塑性如海马体的长期增强（LTP）中发挥关键作用。尽管脑源性神经营养因子（BDNF）及其酪氨酸激酶受体[酪氨酸受体激酶B（TrkB）]的作用已有很好的文献记载，但TrkB的突触前或突触后激活是否参与LTP的诱导仍不清楚。为了解决这个问题，我们对TrkB受体的下游靶点磷脂酶Cgamma进行了局部和特异性干预。我们通过用Sindbis病毒载体过度表达PLCgamma补体同源性（PH）结构域来阻止PLCgama信号传导。分离的PH结构域具有抑制作用，从而阻断内源性PLCgamma信号传导，从而也阻断IP3的生成。令人惊讶的是，需要同时对PLCgamma信号进行突触前和突触后阻断，才能将LTP降低到与TrkB和BDNF基因敲除小鼠相当的水平。单独阻断突触前或突触后信号并没有显著降低LTP。

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数字

图1。
图1。
Sindbis病毒载体专门针对分离海马培养物和急性切片中的神经元。分离海马培养(A–F)用Sin–GFP转导24小时。只有MAP2阳性细胞（即神经元）表达GFP(C)而胶质特异性标记GFAP从未标记GFP阳性细胞(F类). 在局部注射的急性海马脑片中也观察到同样的特异性(G–I型)使用神经元标记物MAP2(我)或通过观察GFP表达细胞的特征性神经元形态(G公司,H（H）). 箭头指向G公司指向选定的中间神经元。
图2。
图2。
PLCγ1PH结构域与细胞内和细胞外膜相关。A类,B类，Sin–GFP转导的分离海马细胞的单共焦面(A类)或Sin–PHGFP(B类). PHGFP结构域显示膜相关蛋白的典型斑块状分布，而Sin-GFP均匀分布于细胞质和细胞核。C，PLCγ1PH结构域与膜内和质膜相关。图中显示了一个海马神经元表达GFP标记的PLCPH结构域的两个单独共焦平面。在中间平面，可以看到细胞膜中有明显的堆积，而穿过细胞底部的平面则表明蛋白质在质膜中堆积。天在Sindbis病毒介导的转导后6 h，PLCγ1PH结构域已被表达并运输到轴突（箭头）和树突的尖端（箭头）。在上图中，显示了轴突标记物tau-1的染色，在下图中，显示了GFP标记的PH结构域的斑片状GFP荧光。比例尺，10μm。
图3。
图3。
仅在CA1区或仅在CA3区局部表达PLCγPH结构域不会显著降低LTP。CA1区注射急性海马脑片的示意图和代表性图像(A–C)或CA3(E–G公司)使用Sin–GFP(B类,F类)或Sin–PHGFP(C,G公司)如图所示。在Sin–GFP或Sin–PHGFP转基因切片中，转基因表达的程度和强度没有明显差异。孵育至少6小时后，刺激Schaffer侧支循环，并在CA1区记录fEPSP。CA1中Sin–PHGFP和Sin–GFP控制切片的强直刺激前后（3×30脉冲；100 Hz；箭头）显示了EPSP斜率大小(天)和CA3(H（H）). 强直刺激后55-60分钟，Sin–GFP和Sin–PHGFP之间无显著差异(第页>CA1和CA3为0.1，t吨测试）。天,H（H），插图显示了具有代表性的单个实验的原始扫描。字母对应记录道的时间点。F类,G公司插图分别显示了Sin–GFP和Sin–PHGFP的轴突标记。误差线代表SEM、DG、齿状回；mf，苔藓纤维；sc，Schaffer侧支循环。
图4。
图4。
在CA1和CA3区表达PLCγ1PH结构域显著降低LTP。A–C，在CA3和CA1区同时注射Sin–GFP的急性海马脑片的示意图和代表性图像(B类)或Sin–PHGFP(C). 孵育至少6小时后，通过刺激Schaffer侧支，在CA1区激发突触场电位。天,E类，双区域注射Sin–PHGFP和Sin–GFP野生型（WT）控制切片和TrkB中显示破伤风刺激前后的分组记录（3×30脉冲；100 Hz；箭头）可编程控制器/可编程控制器老鼠。强直刺激后55-60分钟LTP幅度的差异与对照组有显著差异(第页= 0.012,t吨试验），而将Sin–PHGFP注入TrkB可编程逻辑控制器（PLC/PLC）切片导致与野生型切片中Sin–PHGFP相同的低水平增强(第页= 0.72,t吨测试）。值得注意的是，Sin–PHGFP注入TrkB可编程逻辑控制器（PLC/PLC）slice没有进一步降低剩余的低水平增强。天,E类，插图显示了具有代表性的单个实验的原始扫描。字母对应于进行跟踪的时间点。误差线代表SEM、DG、齿状回；mf，苔藓纤维；sc，Schaffer侧支循环。
图5。
图5。
经PLC抑制剂或IP预处理的海马脑片中LTP显著降低三受体阻断剂2-APB。A类用选择性膜渗透PLC抑制剂U-73122（10μ米)与使用无效对照物质U-73343（10μ米).第页= 0.003,t吨测试。B类，对Schaffer侧支进行强直刺激（3×30脉冲；100 Hz；箭头）后，对照切片表现出明显的增强，而在2-APB中培养的切片则没有LTP(第页= 0.0024,t吨测试）。误差条代表SEM。
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    1. Blum R、Kafitz KW、Konnerth A（2002年）。神经营养素诱发的去极化需要钠通道Na（V）1.9。自然419:687-693。-公共医学
    1. Brewer GJ，Cotman CW（1989年）。海马神经元在低密度特定培养基中的存活和生长：三明治培养技术或低氧的优势。脑研究494:65–74。-公共医学

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