Expression of Prox1 during mouse cochlear development

doi:10.1002/cne.20944

比较研究

.2006年5月10日；496(2):172-86.

doi:10.1002/cne.20944。

Prox1在小鼠耳蜗发育过程中的表达

奥利维娅·伯明翰-McDonogh¹, 伊丽莎白·欧斯特尔, 詹妮弗·斯通, 克利福德·R·休姆, Huy M Huynh（休伊·M·休恩）, Toshinori Hayashi先生

附属公司

附属

¹弗吉尼亚-梅里尔-布洛德尔听力研究中心和耳鼻喉科，华盛顿大学医学院，西雅图，华盛顿98195，美国。oliviab@u.washington.edu华盛顿哥伦比亚大学

PMID： 16538679
预防性维修识别码：项目编号2572724
内政部： 10.1002/cne.20944

比较研究

Prox1在小鼠耳蜗发育过程中的表达

奥利维娅·伯明翰-McDonogh等。《计算机神经学杂志》. 2006.

.2006年5月10日；496(2):172-86.

doi:10.1002/cne.20944。

作者

奥利维娅·伯明翰-McDonogh¹, 伊丽莎白·欧斯特尔, 詹妮弗·斯通, 克利福德·R·休姆, Huy M Huynh（休伊·M·休恩）, Toshinori Hayashi先生

附属

¹弗吉尼亚-梅里尔-布洛德尔听力研究中心和耳鼻喉科，华盛顿大学医学院，西雅图，华盛顿98195，美国。oliviab@u.washington.edu华盛顿哥伦比亚大学

PMID： 16538679
预防性维修识别码：项目编号2572724
内政部： 10.1002/cne.20944

摘要

我们对小鼠内耳发育过程中Prox1（一种同源域转录因子）的表达进行了分析，特别强调了听觉系统。Prox1在胚胎第11天开始的耳囊中表达，在发育中的前庭感觉斑中表达。E16.5下调成熟（肌球蛋白VIIA免疫反应性）前庭毛细胞的表达，随后下调底层支持细胞层的表达。在听觉感觉上皮中，Prox1最初在胚胎第14.5天在耳蜗底部的一条狭窄的细胞中表达。这条条纹覆盖了感觉上皮的全部厚度，包括发育中的毛细胞和支持细胞。在接下来的几天里，表达条纹延伸到顶端，随着感觉上皮的分化，Prox1变得局限于支持细胞的一个子集。Prox1和细胞类型特异性标记物的双重标记显示，外毛细胞瞬时表达Prox1。E18后，毛细胞中不再检测到Prox1蛋白，但在胚胎发生的剩余时间和出生后第二周，它继续在支持细胞中表达。在此期间，Prox1并没有在Corti器官的所有支持细胞类型中表达，但仅限于发育中的Deiters细胞和支柱细胞。在出生后的第二周，这些细胞中的表达保持不变，此时Prox1被动态下调。这些研究为我们分析Prox1在脊椎动物感官发育中的作用奠定了基础。

J.公司。神经醇。496:172-186, 2006. （c） 2006年威利莱斯公司。

PubMed免责声明

数字

图1
用Prox1抗体标记的E11耳囊切片（红色）。箭头指向Prox1免疫反应的三个区域。R=吻侧，M=内侧。比例尺=50μm

图2
用探针对mProx1进行原位杂交。（A） E14处的耳囊切片显示发育中的前庭结构均表达Prox1，箭头指向发育中的椭圆囊和箭头至发育中的半规管嵴。（B） E16耳蜗的一部分，箭头表示Corti的发育器官，箭头表示螺旋神经节。（C，D，E）Corti发育器官染色的高倍图像。在发育的这个阶段，相对于顶点（E），基底（C，D）的标记更强烈。A中的标尺=50μm，也适用于B，D中的标杆=20μm，适用于C-E。

图3
E14胚胎耳囊切片显示发育中前庭器官中Prox1（红色）和Myosin VIIA（绿色）免疫反应。（A）通过正在发育的球囊的一部分。（B）通过发育胞果的部分。（C）半规管的嵴。（D）球囊发育过程中的切片显示一些双标记毛细胞（箭头）。比例尺=50μm

图4
用p27（A，C）、肌球蛋白VIIA和Prox1（B，D）抗体标记的E14小鼠耳蜗切片。A框中的区域在C中以高倍显示，而B框中的面积在D中以高倍率显示。A和C中的箭头指出了表达p27的非增殖细胞（ZNPC）区域。B中的箭头指向螺旋神经节SG，显示该年龄段Prox1免疫反应。（D）显示E14处Prox1或肌球蛋白VIIA缺乏标签（箭头）。在面板A和B中，顶点位于图的顶部。比例尺=100μm

图5
E15（A，B，C）和E14.5小鼠胚胎耳蜗切片，标记有p27（A）、肌球蛋白VIIA和Prox1（B，C，D）抗体。（A） ZNPC可以通过p27标签（箭头）清晰识别。（B）显示肌球蛋白VIIA和Prox1免疫反应的相邻切片。SG细胞强烈标记为Prox1，而ZNPC内位于耳蜗基底端的细胞子集标记为肌球蛋白VIIA和Prox1。（C）放大倍率较高时显示B框中区域的双标签。箭头指向肌球蛋白VIIA（绿色）标记的毛细胞，而紧邻它们的是Prox1标记的细胞核（红色）。（D）耳蜗底部E14.5处的Prox1免疫反应细胞（箭头所示）。在面板A和B中，顶点位于图的顶部。比例尺=A和B的100μm，C和D的25μm。

图6
通过E14.5和E15.5小鼠胚胎耳蜗的切片，在控制下表达GFP数学1发起人。（A） *数学1*-GFP标记的内毛细胞出现在E14.5处（绿色），在这个阶段紧邻Prox1免疫反应细胞（红色）。（B） *数学1*-E15.5的LER和GER中都存在GFP毛细胞；Prox1免疫反应细胞主要存在于LER的支持细胞层，尽管一些表达Math1的毛细胞也对Prox1具有免疫反应性。（C-E）B中显示的Corti器官放大倍率较高，以更好地显示Prox1（E）和GFP（C）的双标记（箭头）。LER：小上皮嵴，GER：大上皮嵴。比例尺=20μm。

图7
E16小鼠胚胎耳蜗切片显示p27（A，D）、肌球蛋白VIIA和Prox1（B，C）的标记。C所示的显微照片是B框中区域的高倍视图。B所示的截面与a所示的相邻。（B）螺旋神经节（SG）细胞在此阶段表达Prox1，LER中的许多细胞也是如此。（C）内毛细胞（绿色，箭头）在此阶段表达肌球蛋白VIIA，但未标记Prox1抗体（红色）。（D） E16小鼠耳蜗的一部分显示，只有p27阳性细胞的一个子集（红色）也标记为Prox1（绿色）。LER：小上皮嵴，GER：大上皮嵴。比例尺=B为100μm，D为20μm。

图8
E18小鼠胚胎耳蜗切片显示肌球蛋白VIIA（绿色）和Prox1（红色）标记。（A）低倍显微镜显示整个耳蜗。（B-D）A.Prox1中箭头所示区域的高倍视图标记了Deiters细胞和柱细胞的细胞核，但不标记内指骨细胞（星号）。比例尺=100μm

图9
胚胎第17天小鼠耳蜗顶部切片的共焦显微照片，标记为S100A1（红色）和Prox1（绿色）。（A；B；C）分别为Prox1、合并和S100A1标签。（D） B的高倍视图。箭头指向内毛细胞的S100A1标记，而箭头指向柱状细胞核，Prox1为阳性，S100A1为阴性。H： Hensen细胞，DC：Deiters细胞，PC：柱状细胞，IHC：内毛细胞，OHC：外毛细胞，IPC：内指骨细胞，B：边缘细胞。比例尺=10μm

**图10**
出生后第0天小鼠耳蜗切片显示肌球蛋白VIIA（绿色）和Prox1（红色）标记。（A）低倍显微镜显示整个耳蜗。（B，C）A中方框所示区域的高倍视图。Prox1标记的是Deiters细胞和柱细胞的细胞核，而不是毛细胞。SG=螺旋神经节。比例尺=100μm

**图11**
来自P3（A-C）、P5（D-F）和P10（G-H）耳蜗基底（A、D、G）、中间（B、E、H）和顶端（C、F、I）区域的Corti片完整安装器官的共焦图像。所有面板在上皮的支持细胞核层显示Prox1免疫标记。Z系列堆栈中的大约10个1μm切片被投影到最明亮的点，以捕捉每张图像中的支持细胞核。IPC（内部柱状电池）、OPC（外部柱状电池）、DC-1、DC-2和DC-3（第一到第三行Deiters电池）。E中的箭头指向第一排和第二排Deiters细胞以及外柱细胞中缺乏Prox1免疫反应的区域。F中的箭头指向IPC核标签。比例尺=15μm。

**图12**
显示果蝇prospero（灰色）表达与外部感觉器官细胞发育之间关系的图表（顶部），Prox1（灰色）和发育中的耳蜗细胞（底部）。SOP=感觉器官前体；SEP=内耳假想的感觉上皮前体；GER=大上皮嵴；LER=较小的上皮嵴。

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