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.2006年2月14日;103(7):2257-61.
doi:10.1073/pnas.0510565103。 Epub 2006年2月3日。

人类实体肿瘤的microRNA表达特征确定了肿瘤基因靶点

附属公司

人类实体肿瘤的microRNA表达特征确定了肿瘤基因靶点

斯特凡诺·沃利尼亚等。 美国国家科学院程序. .

摘要

小的非编码microRNAs(miRNAs)可以促进癌症的发展和进展,并且在正常组织和癌症中有不同的表达。通过对540个样本(包括肺、乳腺、胃、前列腺、结肠和胰腺肿瘤)进行大规模miRnome分析,我们发现了一个由大量过度表达的miRNA组成的实体癌miRNA标志。在这些miRNA中,有一些具有良好特征的癌症相关性,如miR-17-5p、miR-20a、miR-21、miR-92、miR-106a和miR-155。差异表达miRNAs的预测靶点在蛋白编码的肿瘤抑制因子和癌基因中显著富集(P<0.0001)。许多预测的靶点,包括肿瘤抑制因子RB1(视网膜母细胞瘤1)和TGFBR2(转化生长因子,β受体II)基因已通过实验证实。我们的结果表明,miRNAs广泛参与实体肿瘤的癌症发病机制,并支持其作为显性或隐性癌症基因的功能。

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图1。
图1。
对代表六种实体癌和各自正常组织的540个样本进行聚类分析。当MiRNAs在至少90%的样本中的表达水平(背景吸收强度)高于阈值(256)时,将其纳入树中。保留137个miRNAs进行聚类。阵列以中位数为中心,通过使用基因簇2.0使用无中心相关度量进行平均连锁聚类。
图2。
图2。
六种实体癌的miRNA表达特征。(A类)实体癌中差异调节miRNAs的表达。至少90%的组织中存在61个miRNA。树显示log2转换后的平均绝对表达式值。计算来自相同组织或肿瘤组织类型的所有样本的平均值。基因和阵列以平均值为中心,并通过使用基因簇2.0利用欧氏距离进行平均连锁聚类。(B类)至少75%的实体肿瘤中存在miRNAs的折叠变化(癌症与正常),其中至少有一个肿瘤绝对值高于2。该树显示平均折叠变化的log2转换(癌症高于正常)。计算来自相同组织或肿瘤组织类型的所有样本的平均值。数组以平均值为中心,并使用基因簇2.0使用无中心相关度量进行平均连锁聚类。(C类)至少50%实体肿瘤的特征中存在miRNAs的折叠变化(癌症与正常)。该树显示平均折叠变化的log2转换(癌症高于正常)。对来自相同组织或肿瘤组织类型的所有样本计算平均值。数组以平均值为中心,并使用基因簇2.0使用无中心相关度量进行平均连锁聚类。
图3。
图3。
以蛋白质编码的癌症基因为靶点的固体癌症miRNA标记成分。(A类)不同癌症蛋白编码基因的3′UTR能够调节癌症miRNA。这些数据显示了萤火虫荧光素酶表达的相对抑制,该抑制标准化为转染对照肾小球荧光素酶。如图2和表2所示,miRNAs是从实体癌中差异调节的细胞中选择的。PLAG1,多形性腺瘤基因1;TGFBR2、转化生长因子、β受体II、Rb、视网膜母细胞瘤基因。pGL-3(Promega)用作空载体。miR-20a型miR-26a-1型、和miR-106型寡核苷酸(sense和scrambled)用于转染。第二个实验使用缺乏5′miRNA-end互补位点(MUT)的每个靶mRNA的突变版本作为对照,如赖特.所有实验均进行了两次,一式三份(n个= 6). (B类)在癌症患者中,RB1蛋白水平与miR-106a型表达。为了正常化,我们使用了β肌动蛋白。

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