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比较研究
1992年8月15日;267(23):16048-55.

磷脂酶C-β2的克隆、测序、表达和Gq依赖性激活

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  • PMID: 1644792
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比较研究

磷脂酶C-β2的克隆、测序、表达和Gq依赖性激活

D公园等。 生物化学杂志
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摘要

从HL-60细胞cDNA文库中分离出与先前未标记磷脂酶C相对应的cDNA。cDNA编码1181个氨基酸的假定多肽,计算分子量为133700道尔顿。将预测蛋白的氨基酸序列与五种哺乳动物磷脂酶C亚型(PLC-β1、PLC-γ1、PLCγ2、PLC-delta 1和PLC-delta2)的氨基酸序列进行比较,发现新酶与PLC-贝塔1关系最密切,总氨基酸序列同源性为48%。因此,新磷脂酶C被命名为PLC-β2。在羧基末端450个氨基酸中,PLC-beta 1和PLC-beta2之间的相似性最小。PLC-beta 1和PLC-beta2都是从HeLa细胞的提取物中纯化出来的,这些细胞已被转染含有相应cDNA的痘苗病毒。与包括PLCβ1在内的其他哺乳动物PLC异构体一样,PLCβ2的催化活性完全依赖于Ca2+,并且PLCβ2优选磷脂酰肌醇4,5-二磷酸而不是磷脂酰肌醇作为底物。最近,百日咳毒素不敏感G蛋白αq的α亚单位被证明激活了PLC-β1,但不激活PLC-γ1和PLC-δ1。当用PLC-beta 1或PLC-beta2重组牛脑中纯化的α-q时,在存在AlF4-或鸟苷5-O-(3-硫代三磷酸)(GTP-γS)的情况下,未观察到PLC-β2的刺激,而PLC-β1活性在AlF4-存在下显著增强,而在GTP-γS存在下不太显著但显著。这些结果表明,PLC-α1和PLC-γ2的受体依赖性刺激可能需要不同的G蛋白α亚单位。(另见随附文章(Lee,C.H.、Park,D.、Wu,D.、Rhee,S.G.和Simon,M.I.(1992)J.Biol)。化学。267, 16044-16047).

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