NF-kappaB is essential for the progression of KSHV- and EBV-infected lymphomas in vivo

doi:10.1182/blood-2005-07-2730

.2006年4月15日；107(8):3295-302.

doi:10.1182/bloud-2005-07-2730。 Epub 2005年12月27日。

NF-kappaB对体内KSHV和EBV感染淋巴瘤的进展至关重要

香农·A·凯勒¹, 丹尼斯·埃尔南德斯-霍普金斯, 杰琳娜·维德, 弗拉基米尔·波诺马雷夫, 伊丽莎白·海耶克, 伊莱恩·沙特纳, 埃塞尔·塞萨尔曼

附属公司

PMID： 16380446
预防性维修识别码：项目经理1432097
内政部： 10.1182/血液-2005-07-2730

NF-kappaB对体内KSHV和EBV感染淋巴瘤的进展至关重要

香农·A·凯勒等人。血液. 2006.

.2006年4月15日；107(8):3295-302.

doi:10.1182/bloud-2005-07-2730。 Epub 2005年12月27日。

作者

香农·A·凯勒¹, 丹尼斯·埃尔南德斯·霍普金斯, 杰琳娜·维德, 弗拉基米尔·波诺马雷夫, 伊丽莎白·海耶克, 伊莱恩·沙特纳, 埃瑟尔·塞萨尔曼

附属

¹康奈尔大学威尔医学院病理学和实验医学系，地址：1300 York Ave，New York，NY 10021，USA。

PMID： 16380446
预防性维修识别码：项目经理1432097
内政部： 10.1182/血液-2005-07-2730

摘要

活化的NF-kappaB是一种关键机制，通过这种机制，感染EB病毒/HHV-4和卡波西肉瘤疱疹病毒（KSHV/HHV-8）的淋巴瘤细胞可以免受凋亡应激。选择性药物抑制NF-kappaB组成活性可诱导KSHV和EBV感染淋巴瘤细胞凋亡。在这两种肿瘤类型中，体外药物抑制NF-kappaB诱导了相同的线粒体介导的凋亡级联。通过微阵列分析对基因调控的评估表明，肿瘤细胞中NF-kappaB的抑制导致一组不同的前生存基因的下调，包括cIAP-1、cIAP-2、cFLIP和IL-6。在小鼠系统中使用EBV和KSHV相关淋巴瘤，我们证明Bay 11-7082是NF-kappaB的一种选择性药物抑制剂，可以预防或延缓肿瘤生长，延长无病生存期。使用可追踪报告KSHV阳性细胞系和体内成像进一步证明NF-kappaB活性抑制和肿瘤生长反应。这些发现表明，特异性NF-kappaB调节的生存因子协同保护KSHV和EBV感染的淋巴瘤细胞免受凋亡，从而促进小鼠KSHV及EBV相关淋巴瘤的建立和进展。他们还支持使用选择性NF-kappaB抑制剂治疗疱疹病毒相关淋巴瘤。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
**选择性抑制NF-κB后诱导EBV和KSHV感染的淋巴瘤细胞线粒体介导的凋亡。**（A）用5μM Bay 11处理EBV-IBL和BC-3细胞，并通过EMSA评估NF-κB和八聚体/DNA结合。在治疗后1小时和24小时从细胞中提取核蛋白，并使用NF-κB或八聚体特异性放射性标记寡核苷酸探针进行EMSA。细胞系在整个24小时的测定中表现出对NF-κB的抑制作用，但没有同时抑制八聚体/DNA的结合。（B）用Bay 11处理EBV-IBL和BC-3细胞，并在24小时处理后评估细胞凋亡。为了进行分析，在室温下用FITC缀合的膜联蛋白-V标记细胞，并通过流式细胞术进行分析。报告的结果是未经治疗的4个独立实验中的凋亡细胞百分比()和11号隔间处理(▪) 细胞。误差条代表SD。（C）EBV-IBL和BC-3细胞在7.5×10培养基中培养⁵细胞/mL，用Bay 11-7082处理24小时。在1、3、6和12小时后，生成全细胞提取物，并通过Western blot分析评估caspase 9、3和8和PARP的表达。caspase 9和3的抗体识别全长和裂解的caspase亚型，如图所示。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8抗体仅检测到全长或原氨酸蛋白酶亚型，因此通过衰减检测全长蛋白来评估其活性。在最初的探针之后，剥离印迹，并用肌动蛋白对照品进行复制。结果显示BC-3，但在半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶激活模式和时间方面具有代表性。

公式图像 — **图1。**
**选择性抑制NF-κB后诱导EBV和KSHV感染的淋巴瘤细胞线粒体介导的凋亡。**（A）用5μM Bay 11处理EBV-IBL和BC-3细胞，并通过EMSA评估NF-κB和八聚体/DNA结合。在治疗后1小时和24小时从细胞中提取核蛋白，并使用NF-κB或八聚体特异性放射性标记寡核苷酸探针进行EMSA。细胞系在整个24小时的测定中表现出对NF-κB的抑制作用，但没有同时抑制八聚体/DNA的结合。（B）用Bay 11处理EBV-IBL和BC-3细胞，并在24小时处理后评估细胞凋亡。为了进行分析，在室温下用FITC缀合的膜联蛋白-V标记细胞，并通过流式细胞术进行分析。报告的结果是未经治疗的4个独立实验中的凋亡细胞百分比()和11号隔间处理(▪) 细胞。误差条代表SD。（C）EBV-IBL和BC-3细胞在7.5×10培养基中培养⁵细胞/mL，用Bay 11-7082处理24小时。在1、3、6和12小时后，生成全细胞提取物，并通过Western blot分析评估caspase 9、3和8和PARP的表达。caspase 9和3的抗体识别全长和裂解的caspase亚型，如图所示。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8抗体仅检测到全长或原氨酸蛋白酶亚型，因此通过衰减检测全长蛋白来评估其活性。在最初的探针之后，剥离印迹，并用肌动蛋白对照品进行复制。结果显示BC-3，但在半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶激活模式和时间方面具有代表性。

**图2。**
**抑制EBV和KSHV感染的淋巴瘤细胞中NF-κB调节的抗凋亡基因表达。**从经和不经5μM Bay 11-7082处理6小时的BC-3和EBV-IBL细胞中分离出总RNA（5μg），随后标记并与Affymetrix UA95v2探针阵列杂交。根据3个独立实验的结果，使用Genespring软件进行数据分析。显示了两种细胞类型中变化超过2倍的基因。在这两种细胞类型中，Bay 11处理导致IL-6、cIAP-2、A20和IκBα的下调超过2倍。

**图3。**
**NF-κB调节的抗凋亡、信号转导和生长因子的下调与EBV和KSHV感染的淋巴瘤细胞的凋亡发生相关。**（A）通过Western blot分析评估EBV-IBL和BC-3全细胞提取物（如图2图例所示）的表达情况。在最初的探针之后，剥离印迹，并用肌动蛋白对照品进行复制。显示的结果是BC-3，但在下调和定时方面代表了这两种细胞类型。（B） KSHV感染的BC-1和BCBL-1细胞以及EBV感染的BCKN-1和LCL-9001细胞系的蛋白表达评估。使用7.5×10培养细胞系的全细胞提取物通过Western blot分析评估蛋白质表达⁵细胞/mL，用Bay 11-7082处理6小时。在最初的探针之后，剥离印迹并用肌动蛋白对照物进行复制。

**图4。**
**Bay 11-7082治疗NOD/SCID小鼠可延缓体内EBV和KSHV相关淋巴瘤的发展。**（A） NOD/SCID小鼠（n=10/组）用40×10⁶LCL 9001细胞，随后在肿瘤激发后第1、3和5天以及之后每周间隔注射载体或20 mg/kg Bay 11。每周对肿瘤进行测量；每只小鼠的肿瘤面积用圆点表示，每组的平均大小用条形图表示。RMANOVA评估的差异显示肿瘤大小存在显著差异(*P（P）*<.0352）在所有时间点上的平均值。（B）（i）原发性渗出性淋巴瘤小鼠模型。左侧的小鼠接受了BC-3细胞的注射，并出现了淋巴瘤性腹水，表现为腹胀。右边的老鼠是一只健康的对照老鼠。（ii）无病生存曲线。NOD/SCID小鼠（n=19/组）用10×10⁶BC-3细胞，然后在肿瘤注射后的第1、3和5天接受载体或Bay 11-7082（5或20 mg/kg）注射。通过Kaplan-Meier和log-rank检验评估的无病生存率表明Bay 11和车用治疗小鼠的肿瘤发展存在显著差异(*P（P）*<.001（对于5和20 mg/kg组）。5 mg/kg和20 mg/kg剂量组的曲线之间没有重大差异，因此仅显示了5 mg/kg数据。对照组代表未注射肿瘤细胞的小鼠。（C）对BC-3和LCL 9001感染小鼠的腹水和实体瘤细胞在肿瘤发生后的形态和病毒抗原表达进行评估。细胞用苏木精和伊红（H&E）染色；对于KSHV，进一步用LANA和vIL-6抗体进行评估，对于EBV，进一步用LMP-1抗体和EBER原位杂交进行评估。原始放大倍数为100倍，但LCL H&E和LMP-1除外，后者的原始放大倍数是400倍。

**图5。**
**PEL小鼠NF-κB活性的体内成像。**（A）用10×10攻击NOD/SCID小鼠⁶BC3/NFκB-luc可追踪细胞，随后在肿瘤激发后第3、5和7天注射载体（左侧）或5 mg/kg Bay 11-7082（右侧）。在注射荧光素后的指定日期对小鼠进行成像。选择用于数据采集的ROI由每个小鼠上方的绿色椭圆显示。（B）在体外用Bay 11-7082处理BC3/NFκB-luc细胞系后，测量其荧光素酶活性，显示出对NF-κB抑制的可靠的剂量和时间依赖性反应。误差条代表SD。（C）生物发光被量化，并报告为每个研究小鼠在不同时间间隔的相对生物发光单位（BLU）。第3天（注射药物前），除2只小鼠外，其余所有小鼠均显示高于背景水平的发光；直到实验第33天左右，溶媒组的小鼠2才出现可检测到的肿瘤，因此，在面板A中未显示，Bay 11 20 mg/kg剂量组的小鼠2中迄今尚未出现可见肿瘤。Bay 11-7082处理24小时后生物发光降低，表明NF-κB活性降低。用Bay 11-7082（正方形）治疗的小鼠的发光仍然较低，而单独用载体治疗的小鼠（三角形）的发光逐渐增加。在显示的最后一个时间点之前，线被中断的小鼠代表那些出现腹水并被人类杀死的小鼠。

**图6。**
**常见的NF-κB介导的生存机制保护KSHV和EBV感染的淋巴瘤细胞免受凋亡。**在KSHV和EBV感染的淋巴瘤细胞中，凋亡事件通过抗凋亡、细胞信号和NF-κB调节的生长因子（i；以红色显示的NFκB靶基因）来预防。当NF-κB组成活性消失时（ii），KSHV和EBV感染的淋巴瘤细胞对凋亡刺激敏感，自发凋亡通过线粒体依赖性凋亡事件的激活进行。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶的激活很可能是由正常应激刺激引起的，但由于生长因子缺乏，细胞中的DNA损伤会增强半胱氨酸蛋白酶的激活。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

蛋白酶体抑制剂诱导原发性渗出性淋巴瘤细胞凋亡并减少病毒复制。
Saji C、Higashi C、Niinaka Y、Yamada K、Noguchi K、Fujimuro M。 Saji C等人。生物化学与生物物理研究委员会。2011年12月2日；415(4):573-8. doi:10.1016/j.brc.2011.10.107。Epub 2011年10月31日。生物化学与生物物理研究委员会。2011 PMID：22074820
[爱泼斯坦-巴尔病毒（EBV）和卡波西肉瘤相关疱疹病毒（KSHV，HHV-8）]。
卡塔诺·H。卡塔诺·H。乌伊鲁苏。2010年12月；60(2):237-45. doi:10.2222/jsv.60.237。乌伊鲁苏。2010 PMID：21488336 审查。日本人。
EBV和KSHV对NF-kappaB信号的调制。
de Oliveira de、Ballon G、Cesarman E。 de Oliveira de等人。微生物趋势。2010年6月；18(6):248-57. doi:10.1016/j.tim.2010.04.001。Epub 2010年5月6日。微生物趋势。2010 PMID：20452220 审查。
EBV LMP2A通过调节TRAF2的表达影响LMP1介导的NF-kappaB信号传导和淋巴瘤细胞的生存。
瓜斯帕里一世、布曼D、塞萨尔曼E。 Guasparri I等人。鲜血。2008年4月1日；111(7):3813-20. doi:10.1182/bloud-2007-03-080309。Epub 2008年1月29日。鲜血。2008 PMID：18230756 免费PMC文章。
抑制NF-kappaB可诱导KSHV感染的原发性渗出性淋巴瘤细胞凋亡。
Keller SA、Schattner EJ、Cesarman E。 Keller SA等人。鲜血。2000年10月1日；96(7):2537-42. 鲜血。2000 PMID：11001908

查看所有类似文章

引用人

KSHV劫持FoxO1，通过对抗氧化应激促进细胞增殖和细胞转化。
Li T，Gao SJ。 Li T等人。医学病毒杂志。2023年3月；95（3）：e28676。doi:10.1002/jmv.28676。医学病毒杂志。2023 PMID：36929740 免费PMC文章。
鼻咽癌患者口腔微生物群的改变及其在EB病毒活化中的作用。
廖Y、张JB、卢LX、贾YJ、郑MQ、Debelius JW、何YQ、王TM、邓CM、童XT、薛WQ、曹LJ、吴ZY、杨DW、郑XH、李XZ、吴YX、冯L、叶W、穆J、贾WH。廖毅等。微生物规范。2023年2月14日；11（1）：e0344822。doi:10.128/光谱.03448-22。Epub 2023年1月16日。微生物规范。2023 PMID：36645283 免费PMC文章。
爱泼斯坦-巴尔病毒和卡波西肉瘤相关疱疹病毒的共同感染。
Böni M、Rieble L、Münz C。 Böni M等人。病毒。2022年12月2日；14(12):2709. doi:10.3390/v14122709。病毒。2022 PMID：36560713 免费PMC文章。审查。
Nm23-H1通过与卡波西肉瘤相关疱疹病毒致癌潜在蛋白vFLIP K13的相互作用抑制NF-κB信号传导，诱导原发性渗出性淋巴瘤细胞凋亡。
Mohanty S、Kumar A、Das P、Sahu SK、Mukherjee R、Ramachandranpillai R、Nair SS、Choudhuri T。 Mohanty S等人。 Cell Oncol（多德）。2022年10月；45(5):967-989. doi:10.1007/s13402-022-00701-9。Epub 2022年8月14日。 Cell Oncol（多德）。2022 PMID：35964258
与卡波西肉瘤相关的人类γ-疱疹病毒8癌基因。
Lopes AO、Marinho PDN、Medeiros LDS、de Paula VS。 Lopes AO等人。国际分子科学杂志。2022年6月29日；23(13):7203. doi:10.3390/ijms23137203。国际分子科学杂志。2022 PMID：35806208 免费PMC文章。审查。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Mesri EA、Cesarman E、Arvanitakis L等。人类疱疹病毒-8/卡波西肉瘤相关疱疹病毒是一种感染B细胞的新型可传播病毒。《实验医学杂志》，1996年；183: 2385-2390.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Miyashita EM，Yang B，Lam KMC，Crawford DH，Thorley-Lawson DA。体内正常B细胞中新型爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期。单元格。1995;80: 593-601.-公共医学
1. Babcock GJ、Decker LL、Volk M、Thorley-Lawson DA。EBV在体内记忆B细胞中的持久性。免疫。1998;9: 395-404.-公共医学
1. Devergne O、Hatzivassiliou E、Izumi KM等。TRAF1、TRAF2和TRAF3与对B淋巴细胞转化重要的EB病毒LMP1结构域的关联：在NF-κB活化中的作用。分子细胞生物学。1996;16: 7098-7108.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Chaudhary PM，Jasmin A，Eby MT，Hood L.通过病毒编码的包含死亡效应域的蛋白质调节NF-kappa B通路。致癌物。1999;14: 5738-5746.-公共医学

出版物类型

行动
行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

物质

行动
行动
行动
行动

赠款和资金

LinkOut-更多资源

[1] Mesri EA、Cesarman E、Arvanitakis L等。人类疱疹病毒-8/卡波西肉瘤相关疱疹病毒是一种感染B细胞的新型可传播病毒。《实验医学杂志》，1996年；183: 2385-2390.-项目管理咨询公司-公共医学

[2] Mesri EA、Cesarman E、Arvanitakis L等。人类疱疹病毒-8/卡波西肉瘤相关疱疹病毒是一种感染B细胞的新型可传播病毒。《实验医学杂志》，1996年；183: 2385-2390.-项目管理咨询公司-公共医学

[3] Miyashita EM，Yang B，Lam KMC，Crawford DH，Thorley-Lawson DA。体内正常B细胞中新型爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期。单元格。1995;80: 593-601.-公共医学

[4] Miyashita EM，Yang B，Lam KMC，Crawford DH，Thorley-Lawson DA。体内正常B细胞中新型爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期。单元格。1995;80: 593-601.-公共医学

[5] Babcock GJ、Decker LL、Volk M、Thorley-Lawson DA。EBV在体内记忆B细胞中的持久性。免疫。1998;9: 395-404.-公共医学

[6] Babcock GJ、Decker LL、Volk M、Thorley-Lawson DA。EBV在体内记忆B细胞中的持久性。免疫。1998;9: 395-404.-公共医学

[7] Devergne O、Hatzivassiliou E、Izumi KM等。TRAF1、TRAF2和TRAF3与对B淋巴细胞转化重要的EB病毒LMP1结构域的关联：在NF-κB活化中的作用。分子细胞生物学。1996;16: 7098-7108.-项目管理咨询公司-公共医学

[8] Devergne O、Hatzivassiliou E、Izumi KM等。TRAF1、TRAF2和TRAF3与对B淋巴细胞转化重要的EB病毒LMP1结构域的关联：在NF-κB活化中的作用。分子细胞生物学。1996;16: 7098-7108.-项目管理咨询公司-公共医学

[9] Chaudhary PM，Jasmin A，Eby MT，Hood L.通过病毒编码的包含死亡效应域的蛋白质调节NF-kappa B通路。致癌物。1999;14: 5738-5746.-公共医学

[10] Chaudhary PM，Jasmin A，Eby MT，Hood L.通过病毒编码的包含死亡效应域的蛋白质调节NF-kappa B通路。致癌物。1999;14: 5738-5746.-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

NF-kappaB对体内KSHV和EBV感染淋巴瘤的进展至关重要

附属

NF-kappaB对体内KSHV和EBV感染淋巴瘤的进展至关重要

作者

附属

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

医疗

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

医疗