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.2005年11月;58(4):1074-86.
doi:10.1111/j.1365-2958.2005.04877.x。

鉴定导致裂变酵母中独特GTPase Rheb过度激活的新的单氨基酸变化

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鉴定导致裂变酵母中独特GTPase Rheb过度激活的新的单氨基酸变化

Jun Urano公司等人。 摩尔微生物. 2005年11月.
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摘要

Rheb GTPase在控制酵母对人类的生长、细胞周期和营养吸收方面起着关键作用。为了进一步了解Rhb途径,我们试图鉴定波姆裂殖酵母Rhb1中的超激活突变。发现Rhb1的高活性形式是由缬氨酸-17、丝氨酸-21、赖氨酸-120或天冬酰胺-153的单一氨基酸变化引起的。这些突变体的表达赋予了对canavanine和噻赖氨酸的抗性,这些表型与缺乏负调控Rhb1的Tsc1/Tsc2复合物的细胞所表现出的表型相似。过度活跃的Rhb1突变体的硫赖氨酸抗性表型被效应结构域中的第二个突变抑制。纯化的突变蛋白显示出与GDP的结合显著降低,而其GTP结合没有显著影响。此外,一些突变蛋白显示GTPase活性显著降低。因此,过度激活突变预计会导致Rhb1的GTP-结合/GDP-结合比率增加。通过使用超活性突变体Rhb1(K120R),我们能够证明Rhb1与两种S.pombe TOR(雷帕霉素靶蛋白)蛋白之一的Tor2相互作用。这些裂变酵母的结果为Rheb与Tor依赖GTP的关联提供了第一个证据。

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