Cardiac neural crest cells contribute to the dormant multipotent stem cell in the mammalian heart

doi:10.1083/jcb.200504061

.2005年9月26日；170(7):1135-46.

doi:10.1083/jcb.200504061。

心脏神经嵴细胞有助于哺乳动物心脏中休眠的多能干细胞

丰田裕一¹, 松本圭介, Wakamatsu吉雄, 松崎由美, Isao涉谷, 川口幸子, Masaki Ieda先生, Sachiko Kanakubo公司, 岛崎拓哉, 小川佐治, 诺里科·奥苏米, 冈野秀吉, 福田敬一

附属公司

PMID： 16186259
PMCID公司： PMC2171522型
内政部： 10.1083/jcb.200504061

心脏神经嵴细胞有助于哺乳动物心脏中休眠的多能干细胞

丰田裕一等。 J细胞生物学. 2005.

.2005年9月26日；170(7):1135-46.

doi:10.1083/jcb.200504061。

作者

丰田裕一¹, 松本圭介, 若松义雄, 松崎由美, Isao涉谷, 川口幸子, Masaki Ieda先生, Sachiko Kanakubo公司, 岛崎拓也, 小川佐治, 诺里科·奥苏米, 冈野秀吉, 福田敬一

附属

¹日本东京庆应义塾大学医学院再生医学和高级心脏治疗学系。

PMID： 16186259
PMCID公司： PMC2171522型
内政部： 10.1083/jcb.200504061

摘要

在无血清培养基中，有活力的心脏侧群体细胞部分形成克隆球体，表达巢蛋白、Musashi-1和多药耐药转运蛋白基因1，即未分化神经前体细胞的标志物。这些标记物在分化后丢失，取而代之的是神经元、胶质、平滑肌细胞或心肌细胞特异性蛋白的表达。移植到鸡胚中的心脏衍生细胞迁移到动脉干和心脏流出道，并形成背根神经节、脊神经和主动脉平滑肌细胞。使用编码蛋白0-Cre/Floxed-EGFP的双转基因小鼠进行的血统研究显示，胎儿心肌中的神经嵴衍生细胞未分化和分化。未分化细胞表达GATA-结合蛋白4和巢蛋白，但不表达肌动蛋白，而分化细胞被鉴定为心肌细胞。这些结果表明，心脏神经嵴衍生细胞迁移到心脏，作为休眠的多能干细胞留在那里，并在适当的条件下分化为心肌细胞和典型的神经嵴派生细胞，包括神经元、胶质细胞和平滑肌。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
**新生儿和成人心脏中SP细胞的分离、表征和心包形成。**（A）使用Hoechst 33342对二维新生儿心脏组织进行代表性FACS分析。（B）出生后SP细胞分数FACS分析的变化。（C） P2、P4、P7和P6周时的SP细胞百分比。（D）用抗肿瘤肌球蛋白单克隆抗体（MF20）对SP和MP细胞的胞浆进行染色。请注意，所有心肌细胞均归入MP细胞组。（E）新生儿心脏SP细胞表面标记抗原的FACS分析。（F–I）心脏球形成的相位对比显微镜。在0（F）、3（G）、7（H）和14（I）d时观察到心球形成。心球用抗毒素（J）和抗武藏-1（K）抗体染色。（L–N）用胰蛋白酶将心球分离，并将细胞镀到涂有明胶的玻片上。用抗武藏-1（L）和抗毒素（M）进行双重免疫染色。（N）合并视图。（O） RT-PCR分析巢穴和*武藏-1*胎儿大脑被用作阳性对照。

**图2。**
**体外心球衍生细胞的分化。**从P2新生儿身上获得了心脏球体。分离的心球衍生细胞保存在不含EGF和FGF-2的培养基中。第0天，几乎所有细胞都被抗毒素（A）和抗武藏-1（C）染色，但没有被抗肿瘤肌球蛋白（MF20）（E和F）、抗GFAP（G）或抗MAP2（I）抗体染色。在第14天，细胞没有被抗毒素（B）或抗武藏-1（D）抗体染色。相比之下，一些细胞被抗肿瘤肌球蛋白（F）、抗GFAP（H）或抗MAP2（J）抗体染色。图3 C中放大了（J）中的方框巢穴,*武藏-1*,*多药耐药-1*,*GFAP公司*、和*地图2*注意，在第0天时，来自心包膜的细胞表达巢穴,*武藏-1*、和*多药耐药-1*，但不是*GFAP公司*或*地图2*相比之下，这些干细胞标记物在第14天消失，细胞开始表达GFAP和MAP2。（五十） β的RT-PCR分析*-MHC公司*胎儿大脑或心脏作为阳性对照。

**图3。**
**心脏衍生细胞中神经元特异性标记物的表达分析。**如“材料和方法”所述，诱导P2新生儿获得的心球分化。（A–D）神经标记物的免疫染色：（A）外周蛋白，（B）p75 NGF受体，（C）MAP2，（D）Hu。（E和F）心球衍生细胞来自Tα-1–EYFP转基因小鼠，其中所有神经元在神经元特异性α1-微管蛋白启动子的控制下表达黄色荧光蛋白。一些表达EYFP（F）的心球衍生细胞用抗MAP2抗体染色。（G） RT-PCR分析*MASH-1型*,*第75页*、和*P0（P0）*.MASH-1型是一种前神经碱性helix-loop-helix转录因子，在第0天表达，而细胞反过来表达*P0（P0）*，髓磷脂糖蛋白，第14天。

**图4。**
**心球衍生细胞作为心肌细胞和平滑肌细胞干细胞的特性。**如“材料和方法”所述，从P2新生儿获得的心球被诱导分化。（A）心肌细胞特异性转录因子和蛋白质的RT-PCR分析。将心球分离并重新放置；在第0天，细胞表达*GATA4协议*，但不是*Nkx2.5，*肌肉增强因子2C,心钠素，心脏L型钙的a1亚单位²⁺通道，或α*-骨骼肌动蛋白*相比之下，细胞在第7天后表达了所有这些转录因子和蛋白质。（B）部分心球衍生细胞在第14天开始自发搏动。该痕迹代表了这些细胞在第14天的动作电位。用DAPI（D）对Nkx2.5（C）和细胞核进行双重免疫染色。GATA4（E）和DAPI（F）双重免疫染色。（G）肌球蛋白（红色）、GFAP（绿色）和DAPI（蓝色）的三重免疫染色。（H）肌动蛋白和DAPI的双重免疫染色。（I）平滑肌标志物的RT-PCR分析。在第0天（J）和第14天（K）用DAPI对α-平滑肌肌动蛋白（绿色）和细胞核进行双重免疫染色。在第0天（L）和第14天（M）对calponin（绿色）和DAPI进行双重免疫染色。

**图5。**
**心脏细胞在鸡胚环境中表现为神经嵴。**从P2新生儿获得的心脏球体用DiI标记，并移植到鸡的神经嵴中。（A）鸡胚的背视图，在第二体节水平将心包细胞导入MSA。心脏衍生细胞在移植后24小时在胚胎细胞中分布良好。（B–D）心脏移植胚胎的横切面，神经嵴衍生细胞用HNK1抗体染色，细胞核用DAPI染色。DiI-标记的心球衍生细胞有助于发育背根神经节（drg，B）和脊神经（sn，D）。神经管。许多球形细胞也进入侧向迁移途径（C）。（E）鸡胚的背视图，在第二体节水平将DiI-标记的心脏球细胞送入侧向通路。ov，耳囊。（F）胚胎移植到侧路48小时后的侧视图显示发育中的心脏。许多心球衍生细胞正在进入流出道区域。a、中庭；c、 conotruncal；v、心室。（G）移植胚胎的横切面，显示流出道和锥管区。c、 conotruncal公司。（G′）（G）中方框区域的放大倍数更高的视图。可见DiI标记的球形衍生细胞和HNK1阳性宿主衍生嵴细胞。（H）移植后48小时，在翼肢芽水平将三个心包细胞植入MSA的胚胎背外侧视图。磅，肢芽。（一）移植胚胎的横切面，显示发育中的交感神经节（sg）。da，背主动脉。（I′）用HNK1和DAPI染色的（I）中方框区域的高放大视图。心脏衍生细胞整合到神经节中。

**图6。**
**GFP标记的心球衍生细胞在鸡胚环境中的分化。**将取自GFP-Tg小鼠P2新生儿的心脏球移植到鸡神经嵴。心脏球在躯干水平（A–C）移植到MSA，或在第一体节水平（D–O）移植到外侧通路。移植胚胎可以发育2天。心脏细胞有助于外周神经节（A-K），并表达神经元标记物Hu（A-C，d-G）或胶质标记物GFAP（H-K）。箭头表示双重免疫荧光阳性细胞。一些心球衍生细胞也侵入前主静脉并表达平滑肌肌动蛋白（M–O，箭头）。E–G、I–K和M–O分别是D、H和L中方框区域的较高放大倍数。

**图7。**
**心脏神经嵴衍生细胞的分布和联合免疫。**用Toto-3和抗GFP抗体对（A–E）P0 Cre/CAG-CAT-EGFP双Tg小鼠心脏进行免疫染色。EGFP的分布⁺心脏中的细胞被显示出来。EGFP公司⁺细胞集中在流出道和主动脉瓣（A和B），并在心室的心外膜下层（C）和肌内层（D和E）观察到。EGFP公司⁺在游离壁（C）、心尖（D）、室间隔（E）和心房（C）观察到细胞。（F–H）E17.5 P0-Cre/CAG-CAT-EGFP双Tg小鼠心脏肌动蛋白（红色）、GFP（绿色）和Toto-3的三重免疫保护。EGFP公司⁺细胞未被肌动蛋白染色。（H）和（H′）表示相同的字段。（一） E17.5双Tg小鼠心脏GATA4（红色）和GFP（绿色）的双重免疫染色。一些EGFP⁺用抗GATA4抗体染色的细胞。（J和K）E17.5双Tg小鼠心脏巢蛋白（红色）、GFP（绿色）和Toto-3（蓝色）的三重免疫染色。EGFP公司⁺细胞用抗毒素抗体染色。（J和J′）和（K和K′）显示相同的字段。（L和M）10周龄成年P0-Cre/CAG-CAT-EGFP双Tg小鼠心脏肌动蛋白（红色）、GFP（绿色）和Toto-3的三重免疫保护。EGFP公司⁺细胞表达肌动蛋白，纹状体完整，表明心肌细胞。（N–N′′）从10周大的成年P0-Cre/CAG-CAT-EGFP双Tg小鼠分离的心脏球体中EGFP的表达，表明其神经嵴起源。AV，主动脉瓣；LA，左心房；LVFW，左室游离壁；IVS，脑室间隔。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

从成年小鼠角膜分离多能干细胞。
Yoshida S、Shimura S、Nagoshi N、Fukuda K、Matsuzaki Y、Okano H、Tsubota K。 Yoshida S等人。干细胞。2006年12月；24(12):2714-22. doi:10.1634/stemcells.2006-0156。Epub 2006年8月3日。干细胞。2006 PMID：16888282
胚胎干细胞衍生的神经嵴样细胞的多潜能细胞命运。
Motohashi T、Aoki H、Chiba K、Yoshimura N、Kunisada T。 Motohashi T等人。干细胞。2007年2月；25(2):402-10. doi:10.1634/stemcells.2006-0323。Epub 2006年10月12日。干细胞。2007 PMID：17038669
在LIF中培养的鸡心脏神经嵴细胞的回移植可挽救心脏发育。
Kirby ML、Kumiski DH、Myers T、Cerjan C、Mishima N。 Kirby ML等人。开发动态。1993年12月；198(4):296-311. doi:10.1002/aja.1001980407。开发动态。1993 PMID：8130377
【神经嵴衍生黑素细胞和雪旺细胞的表型可塑性】。
杜平E。杜平E。 Biol Aujourdhui公司。2011;205(1):53-61. doi:10.1051/jbio/201108。Epub 2011年4月19日。 Biol Aujourdhui公司。2011 PMID：21501576 审查。法国人。
心血管发育和定植心脏神经嵴谱系。
Snider P、Olaopa M、Firulli AB、Conway SJ。 Snider P等人。科学世界杂志。2007年7月3日；7:1090-113. doi:10.1100/tsw.2007.189。科学世界杂志。2007 PMID：17619792 免费PMC文章。审查。

查看所有类似文章

引用人

RNA-Seq数据集的荟萃分析突出了与绵羊脂肪尾部脂肪沉积有关的新基因/途径。
Hosseini SF、Bakhtializadeh MR、Salehi A。 Hosseini SF等人。前兽医科学。2023年5月12日；10:1159921. doi:10.3389/fvets.2023.1159921。eCollection 2023年。前兽医科学。2023 PMID：37252399 免费PMC文章。
自发性高血压大鼠老化过程中完整心肌和肥厚心肌中巢蛋白的表达。
Cizkova D、Zurmanova JM、Gerykova L、Kouvelas A、Heles M、Elsnicova B、Galatik F、Silhavy J、Pravenec M、Mokry J。 Cizkova D等人。肌肉研究细胞模型杂志。2024年6月；45(2):41-51. doi:10.1007/s10974-023-09641-9。Epub 2023年1月24日。肌肉研究细胞模型杂志。2024 PMID：36690826 免费PMC文章。
心脏神经嵴和心脏再生。
Erhardt S，Wang J。 Erhardt S等人。细胞。2022年12月28日；12(1):111. doi:10.3390/cells1201111。细胞。2022 PMID：36611905 免费PMC文章。审查。
不同人类口腔组织神经嵴衍生多系细胞的干特性和分子标记的差异。
Abe S、Kaida A、Kanemaru K、Nakazato K、Yokomizo N、Kobayashi Y、Miura M、Miki T、Hidai C、Kitano H、Yoda T。 Abe S等人。细胞增殖。2022年10月；55（10）：e13286。doi:10.1111/cpr.13286。Epub 2022年6月18日。细胞增殖。2022 PMID：35716037 免费PMC文章。
心外膜衍生Tbx18⁺CDC移植改善梗死小鼠的心脏功能。
郭Z，耿M，秦L，郝B，廖S。郭Z等。《Front Cardiovasc Med.2022年1月24日》；8:744353. doi:10.3389/fcvm.2021.744353。eCollection 2021年。《Front Cardiovasc Med.2022》。 PMID：35141286 免费PMC文章。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Beltrami，A.P.，L.Barlucchi，D.Torella，M.Baker，F.Limana，S.Chimenti，H.Kasahara，M.Rota，B.Nadal-Ginard，P.Anreverse等人，2003年。成人心脏干细胞具有多潜能，支持心肌再生。单元格。114:763–776.-公共医学
1. Bixby，S.、G.M.Kruger、J.T.Mosher、N.M.Joseph和S.J.Morrison。2002.来自外周神经系统不同区域的干细胞之间的细胞内在差异调节神经多样性的产生。神经元。35:643–656.-公共医学
1. Cai，C.L.、X.Liang、Y.Shi、P.H.Chu、S.L.Pfaff、J.Chen和S.Evans。2003年，Isl1确定了一个心脏祖细胞群体，该群体在分化前增殖，并将大部分细胞贡献给心脏。开发单元。5:877–889.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Gammill，L.S.和M.Bronner-Fraser。2003.神经嵴规范：迁移到基因组学。神经科学自然评论。4:795–805.-公共医学
1. Goodell，M.A.、K.Brose、G.Paradis、A.S.Conner和R.C.Mulligan。1996.体内复制的小鼠造血干细胞的分离和功能特性。《实验医学杂志》183:1797–1806。-项目管理咨询公司-公共医学

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

物质

行动

LinkOut-更多资源

全文源
其他文献来源
- 镜片-专利引文

[1] Beltrami，A.P.，L.Barlucchi，D.Torella，M.Baker，F.Limana，S.Chimenti，H.Kasahara，M.Rota，B.Nadal-Ginard，P.Anreverse等人，2003年。成人心脏干细胞具有多潜能，支持心肌再生。单元格。114:763–776.-公共医学

[2] Beltrami，A.P.，L.Barlucchi，D.Torella，M.Baker，F.Limana，S.Chimenti，H.Kasahara，M.Rota，B.Nadal-Ginard，P.Anreverse等人，2003年。成人心脏干细胞具有多潜能，支持心肌再生。单元格。114:763–776.-公共医学

[3] Bixby，S.、G.M.Kruger、J.T.Mosher、N.M.Joseph和S.J.Morrison。2002.来自外周神经系统不同区域的干细胞之间的细胞内在差异调节神经多样性的产生。神经元。35:643–656.-公共医学

[4] Bixby，S.、G.M.Kruger、J.T.Mosher、N.M.Joseph和S.J.Morrison。2002.来自外周神经系统不同区域的干细胞之间的细胞内在差异调节神经多样性的产生。神经元。35:643–656.-公共医学

[5] Cai，C.L.、X.Liang、Y.Shi、P.H.Chu、S.L.Pfaff、J.Chen和S.Evans。2003年，Isl1确定了一个心脏祖细胞群体，该群体在分化前增殖，并将大部分细胞贡献给心脏。开发单元。5:877–889.-项目管理咨询公司-公共医学

[6] Cai，C.L.、X.Liang、Y.Shi、P.H.Chu、S.L.Pfaff、J.Chen和S.Evans。2003年，Isl1确定了一个心脏祖细胞群体，该群体在分化前增殖，并将大部分细胞贡献给心脏。开发单元。5:877–889.-项目管理咨询公司-公共医学

[7] Gammill，L.S.和M.Bronner-Fraser。2003.神经嵴规范：迁移到基因组学。神经科学自然评论。4:795–805.-公共医学

[8] Gammill，L.S.和M.Bronner-Fraser。2003.神经嵴规范：迁移到基因组学。神经科学自然评论。4:795–805.-公共医学

[9] Goodell，M.A.、K.Brose、G.Paradis、A.S.Conner和R.C.Mulligan。1996.体内复制的小鼠造血干细胞的分离和功能特性。《实验医学杂志》183:1797–1806。-项目管理咨询公司-公共医学

[10] Goodell，M.A.、K.Brose、G.Paradis、A.S.Conner和R.C.Mulligan。1996.体内复制的小鼠造血干细胞的分离和功能特性。《实验医学杂志》183:1797–1806。-项目管理咨询公司-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

心脏神经嵴细胞有助于哺乳动物心脏中休眠的多能干细胞

附属

心脏神经嵴细胞有助于哺乳动物心脏中休眠的多能干细胞

作者

附属

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

MeSH术语

物质

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

MeSH术语

物质

相关信息

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源